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基因工程的基本操作程序(3)-展示頁

2024-09-26 20:46本頁面
  

【正文】 ,對(duì)單子葉植物無感染能力 Ti質(zhì)粒 的 T— DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到其染色體上 轉(zhuǎn)化過程 : Ti質(zhì)粒 目的基因 構(gòu)建 表達(dá)載體 導(dǎo)入 植物細(xì)胞 插入 植物細(xì)胞染色 DNA 表達(dá) 新性狀 轉(zhuǎn)入 農(nóng)桿菌 步驟三:目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ( 2)基因槍法 基因槍法又稱微彈轟擊法,是利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力,將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體 DNA打入受體細(xì)胞中,使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。 編碼蛋白質(zhì) 核苷酸 染色體 轉(zhuǎn)錄 表達(dá) 體外 核苷酸 引物 人工合成 步驟二:基因表達(dá)載體的構(gòu)建 ( 1)用一定的 _________切割質(zhì)粒,使其出現(xiàn)一個(gè)切口,露出 ____________。( 2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,該技術(shù)是一項(xiàng)在 ________完成的核酸合成技術(shù),前提條件是有一段已知目的基因的________序列,以便于合成 _________。 構(gòu)建基因組 DNA文庫時(shí),首先應(yīng)分離細(xì)胞的 A、染色體 DNA B、線粒體 DNA C、總 mRNA D、 tRNA 目的基因可從基因文庫中獲得,下列有關(guān)基因文庫的描述正確的是 A、某生物的全套基因就是一個(gè)基因文庫 B、將含有某種生物不同的許多 DNA片段,導(dǎo)入某個(gè)生物 體內(nèi),則這個(gè)生物就是一個(gè)基因文庫 C、含有一種生物所有基因的基因文庫叫做基因組文庫 D、含有一種生物的一部分基因的基因文庫叫 cDNA文庫 A C 2) PCR技術(shù) —— 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ? 原理: ? 前提: ? 原料 ? 方式 PCR擴(kuò)增儀 DNA復(fù)制 一段已知目的基因的核苷酸序列 : 以 _____方式擴(kuò)增, 即 ____( n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)) 指數(shù) 2n 模板 DNA; DNA引物;四種脫氧核苷酸;熱穩(wěn)定 DNA聚合酶( Taq酶);離子 ? 過程 變性、退火、延伸三步曲 ?變性: 加熱至 90~ 95℃雙鏈 DNA解鏈成為單鏈DNA ?退火: 冷卻至 55~ 60℃部分引物與模板的單鏈DNA的特定互補(bǔ)部位相配對(duì)和結(jié)合 ?延伸: 加熱至 70~ 75℃以目的基因?yàn)槟0?,合成互補(bǔ)的新 DNA鏈 變性 退火 延伸 ? ( 3) 人工合成 —— 根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 推測(cè) 推測(cè) 目的基因 化學(xué)合成 在遺傳工程中,若有一個(gè)控制有利性狀的 DNA分子片段為 ATGTG/ TACAC,要使其數(shù)量增多,可用 PCR技術(shù)進(jìn)行人工復(fù)制,復(fù)制時(shí)應(yīng)給予的條件是
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