基因工程的基本操作程序ppt課件-展示頁
2024-08-20 04:29本頁面
【正文】 目的基因 ，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。 3 ． 啟動子：位于基因的 首端 ， 它是 RNA 聚合酶識別和結(jié)合 的部位 ， 驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生 mRNA 。 二、基因表達載體的構(gòu)建 1 ． 表達載體的組成： 目的基因＋ 啟動 子 ＋ 終止子 ＋標(biāo)記基因。 (3) 過程：目的基因 DNA 受熱變性后解鏈為 單鏈 ， 與引物結(jié)合 ， 然后在 T aq DNA 聚合酶 的作用下進行延伸形成 DNA 。指數(shù)擴增約為 2n( n為擴增循環(huán)的次數(shù) ) 。 2 ． 利用 P CR 技術(shù)擴增目的基因： PCR 技術(shù)是一項在生 物體外 復(fù)制 特定 DNA 片段的核酸合成技術(shù)。 一、目的基因 的獲取 1 ． 從基因文庫中獲取目的基因：將含有某種生物 不同基因 的許多 DNA 片段導(dǎo)入受體菌的群體中儲存 ， 各個受體菌分別含有這種生物的 不同基因 ， 稱為基因文庫。 3. 理解目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法、目的基因檢測 與鑒定的方法。生物選修 3（人教版） 專題 1 基因工程 基因工程的基本操作程序 [ 目標(biāo)導(dǎo)航 ] 1. 了解基因工程原理及基本操作程序。2. 理解獲取目的基因的途徑及基因表達載體的構(gòu)建。 知識梳理 基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟： 目的基因的獲取 、 基因表達載體的構(gòu)建 、 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 、 目的基因的檢測與鑒定 ?；蛭膸炜纱罂尚?， 如果它含了一種生物所有的基因 ，就叫 基因組文庫 ；如果它只包含一種生物的一部分基因 ，就叫 部分基因文庫 ， 如 cDNA 文庫 。 (1) 原理：利用 DNA 復(fù)制 原理 ， 將基因的核苷酸序列不斷加以復(fù)制 ， 使其呈指數(shù)方式增加。 (2) 條件：已知目的基因的 核苷酸 序列、 引物 、 模板DNA 、 T aq _ DNA 聚合酶 。 3 ． 化學(xué)合成目的基因：如果 基因 比較小 ， 核苷酸序列又 已知 ， 也可以利用 DNA 合成儀化學(xué)合成。 2 ． 表達載體的功能：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在 ， 并且 遺傳 給下一代 ， 同時 ， 使目的基因能夠 表達和發(fā)揮作用。 4 ． 終止子：位于基 因的 尾端 ， 能夠終止 轉(zhuǎn)錄 。 三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 1 ． 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 、 基因槍法 、 花粉管通道法 。 3 ． 將目的 基因?qū)胛⑸锛?xì)胞時 ， 一般須首先用Ca2 ＋處理微生物細(xì)胞 ， 使其成為感受態(tài)細(xì)胞。 預(yù)習(xí)反饋 判斷正誤 1 ． 所有的目的基因都可從基因文庫中直接獲得。 ( ) 提示： 核心步驟為基因表達載體的構(gòu)建。 ( √ ) 4 ． 目的基因?qū)腚p子葉植物一般采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。( ) 6 ． 基因工程是否成功需進行個體生物學(xué)水平上的鑒定。 如果基因文庫中含有一種生物所有的基因 ， 這個基因文庫就叫做基因組文庫。基因文庫就相當(dāng)于某種生物的基因倉庫 ， 儲備著該生物大量的基因。它遵循的原理與 DNA 復(fù)制原理相同 ， 條件是有一段已知的目的基因的核苷酸序列和根據(jù)該核苷酸序列合成的引物 ， 原料是四種脫氧核苷酸 ， 也需要多種酶 ( 如 T aq DNA 聚合酶等 ) ， 在 PCR 擴增儀上自動復(fù)制。 (1) 反轉(zhuǎn)錄法的操作過程為： 目的基因的 mRN A ―― ― →反轉(zhuǎn)錄 單鏈DNA ―― →合成 雙鏈 DNA即目的基因 (2) 根據(jù)已知氨基酸序列合成 DNA 的操作過程為： 蛋白質(zhì)的氨基酸序列―― →推測 mRN A 的核苷酸序列―― →推測 基因的核苷酸序列―― →化學(xué)合成目的基因 4 ． 生物體內(nèi) DNA 復(fù)制與
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