基因工程的基本操作程序ppt課件(已改無錯(cuò)字)
2022-09-02 04:29:28 本頁(yè)面
【正文】 A ． 基因槍法導(dǎo)入植物體細(xì)胞的方法比較經(jīng)濟(jì)有效 B ． 顯微注射技術(shù)是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中采用最多的方法 C ． 大腸桿菌最常用的轉(zhuǎn)化方法是使細(xì)胞的生理狀態(tài)發(fā)生改變 D ． 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞最常用的方法 解析： 不同生物目的基因?qū)氲姆椒ú煌?。目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ， 該方法比較經(jīng)濟(jì) 有效 ， 還有基因槍法和花粉管通道法 ， 但基 因槍法成本較高；目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射法； 大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法就是用鈣離子處理細(xì)胞 ，使細(xì)胞的生理狀態(tài)發(fā)生改變，完成轉(zhuǎn)化過程。 答案： A 4 ． 如圖為基因表達(dá)載體的模式圖。下列有關(guān)基因工程中載體的說法 ， 錯(cuò)誤的是 ( ) A ． 基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建 B ． 任何基因表達(dá)載體的構(gòu)建都是一樣的 ， 沒有差別 C ． 圖中啟動(dòng)子位于基因的首端 ， 是 RNA 聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位 D ． 抗生素 抗性基因的作 用是作為標(biāo)記基因，用于鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因 解析： 由于受體細(xì)胞有植物、動(dòng)物和微生物之分 ， 以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方式不同 ， 因此 ， 基因表達(dá)載體的構(gòu)建也會(huì)有所差別 ， 不可能是千篇一律的。 答案： B (1) 基因表達(dá)載體也可以稱為重組載體 ( 如重組質(zhì)粒 ) 、重組 DNA 分子等。 (2) 基因表達(dá)載體的構(gòu)建不只是需要 DNA 連接酶 ， 亦需限制酶參與。 (3) 啟 動(dòng)子與起始密碼子、終止子與終止密碼子的 比較。 比較 起始 (終止 )密碼子 啟動(dòng) (終止 )子 本質(zhì) 三個(gè)相鄰堿基 DNA片段 位置 位于 mRNA上 位于 DNA上 作用 啟動(dòng) (終止 )翻譯 啟動(dòng) (終止 )轉(zhuǎn)錄 要點(diǎn)三 目的基因的檢測(cè)與鑒定 1 ． 在分子水平上檢測(cè)轉(zhuǎn)基因是否成功的方法有哪些？ 2 ． 在個(gè)體水平 上檢測(cè)轉(zhuǎn)基因是否成功的方法有哪些？ 歸納提升 原因：一是目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的成功率很低；二是即使目的基因已導(dǎo)入受體細(xì)胞 ， 但在受體細(xì)胞中成功表達(dá) 的概率也很低 ， 故最后需要從分子水平、個(gè)體水平等方面進(jìn)行目的基因的檢測(cè)與鑒定。 類型 步驟 檢測(cè)內(nèi)容 方法 結(jié)果顯示 分子水平檢測(cè) 第一步 目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞 DNA分子雜交(DNA和DNA之間 ) 是否成功顯示出雜交帶 第二步 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA 分子雜交技術(shù)(DNA和mRNA之間 ) 是否成功顯示出雜交帶 第三步 目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 抗原 —抗體雜交 是否成功顯示出雜交帶 個(gè)體水平鑒定 需要做抗蟲、抗病的接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較，以確定二者的功能活性是否相同等 (1) DN A 探針是用放射性元素或熒光分子標(biāo)記的目的基因的脫氧核苷酸單鏈。 (2) 進(jìn)行轉(zhuǎn)錄水平的檢測(cè)原理與復(fù)制水平的檢測(cè)原理相似 ， 只是被檢測(cè)的物質(zhì)不再是轉(zhuǎn)基因生物基因組 DNA ，而是轉(zhuǎn)基因生物細(xì)胞內(nèi)的 mRNA ；進(jìn)行翻譯水平的檢測(cè) ，則是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理。 (3) 不論是復(fù)制水平、轉(zhuǎn)錄水平還是翻譯水平的檢測(cè) ，都是在體外進(jìn)行的。 典例研析 【典例 3 】 中國(guó)農(nóng) 業(yè)科學(xué)院的科學(xué)家于 199 3 年 ，運(yùn)用基因工程技術(shù)將蘇云金桿菌的伴胞晶體蛋白基因 ( 目的基因 ) ， 通過含抗青霉素抗性基因的質(zhì)粒導(dǎo)入棉花離體體細(xì)胞中 ， 再經(jīng) MS 培養(yǎng)基篩選培養(yǎng) ， 從而
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