基因工程基本操作程序-展示頁
2025-01-13 17:52本頁面
【正文】 含子是能夠編碼蛋白質的序列B．乳酸菌與酵母菌基因結構中都存在外顯子和內含子C．大腸桿菌基因與 RNA聚合酶結合位點位于編碼區(qū)的下游D．水稻細胞基因的編碼區(qū)中存在非編碼序列2．（多選）原核細胞與真核細胞基因結構的共同特點是 （ ）A．編碼區(qū)都有能編碼蛋白質的序列B．編碼區(qū)都是連續(xù)的C．非編碼區(qū)都能調控遺傳信息的表達D．非編碼區(qū)都有 RNA聚合酶結合的位點DACD提取某種生物的 全部 DNA用適當?shù)南拗泼该盖幸欢ù笮〉?DNA片段將 DNA片段與載體連接重組載體基因組文庫導入受體菌中儲存（ 2） .基因文庫的構建方法① 基因組文庫的構建提取某種生物的 某器官或 特定發(fā)育時期 的 mRNA單鏈 DNA雙鏈 cDNA片段重組載體與載體連接cDNA文庫反（逆）轉錄酶DNA聚合酶導入受體菌中儲存② cDNA文庫的構建 反轉錄法： mRNARNA－－ DNA雜合雙鏈雜合雙鏈單鏈單鏈 DNA雙鏈雙鏈 DNA逆轉錄逆轉錄（ cDNA）DNA聚合酶 真核生物的基因用逆轉錄法得到的cDNA與原基因相同嗎？有哪些差異？原核生物基因呢？思考？編碼區(qū)編碼區(qū) 非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)DNA聚合酶剪接有關的酶RNA聚合酶mRNA前體mRNA單鏈 DNAcDNA逆轉錄酶轉錄剪接逆轉錄復制啟動子啟動子 終止子基因不含 非編碼系列 。依據(jù)：目的基因的有關信息。 ② 原理： __________多聚酶鏈式反應體外 特定 DNA片段DNA復制PCR技術? 原理：? 前提：? 原料：? 優(yōu)點 過程：PCR擴增儀DNA復制已知目的基因的一段核苷酸序列：以 _____方式擴增， 在短時間內大量擴增目的基因指數(shù)模板 DNA； DNA引物；四種脫氧核苷酸；熱穩(wěn)定 DNA聚合酶（ Taq酶）；離子變性 復性 延伸③ 過程：a、 DNA變性 （ 90℃95℃ ）：雙鏈 DNA模板在熱作用下，_____斷裂，形成 ________b、退火 （ 復性 55℃60℃ ）：系統(tǒng)溫度降低， 引物 與 DNA模板結合，形成局部________。 氫鍵 單鏈 DNA雙鏈DNA鏈 ：每重復一次，目的基因增加 ___倍一PCR反應體系中目的基因成反應體系中目的基因成 指數(shù)指數(shù) (2n)形式擴增形式擴增④ 方式：以 _____方式擴增，即 ____（ n為擴增循環(huán)的次數(shù)）⑤ 條件： _______________________、 _______________、 ___________ 、 _____________ 、前提條件 :________________⑥ 結果：模板 DNA(含目的基因 )四種脫氧核苷酸 一對引物熱穩(wěn)定 DNA聚合酶指數(shù) 2n使 ____________________在短時間內成百萬倍地擴增已知基因的核苷酸序列含目的基因的 DNA片段DNA復制 PCR技術場所原理條件解旋方式酶特點結果PCR技術擴增與 DNA復制的比較堿基互補配對原則 堿基互補配對原則四種脫氧核苷酸、模板、酶、 ATP四種脫氧核苷酸、模板、酶、 引物DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化解旋半保留復制、邊解旋變復制半保留復制、全解旋再復制體外復制主要在細胞核內大量的 DNA片段形成整個 DNA分子熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶細胞內的 DNA聚合酶、解旋酶、 DNA連接酶等蛋白質的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列基因的核苷酸序列目的基因化學合成推測推測人工合成法： 在 基因較小，核苷酸序列已知的情況下， 可以利用 DNA合成儀人工合成 化學法合成的目的基因含 內含子、啟動子和終止子 嗎？反轉錄法目的基因的信使 RNA目的基因化學合成法肽鏈氨基酸序列信使 RNA序列基因的核苷酸序列目的基因合成人工合成法（ 真核生物 ）推測推測單鏈 DNA合成上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點？優(yōu)點 缺點鳥槍法反轉錄法化學合成法操作簡便廣泛使用工作量大，盲目，分離出來的有時并非一個基因專一性強操作過程麻煩，mRNA很不穩(wěn)定，要求的技術條件較高專一性最強 僅限于合成核苷酸對較少的簡單基因一、目的基因的獲取從基因文庫中獲取利用 PCR技術擴增人工合成種類基因組文庫： 含有一種生物的 全部 基因部分基因文庫： 只包含了一種生物的 部分 基因， 如： cDNA文庫課堂小結：下列屬于獲取目的基因的方法的是 ( )① 利用 mRNA反轉錄形成 ② 從基因組文庫中提?、?從受體細胞中提取 ④ 利用 PCR技術 ⑤ 利用 DNA轉錄 ⑥ 人工合成A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥1．在已知基因的核苷酸序列的情況下，獲取目的基因的最方便方法是 A、化學合成法 B、基因組文庫法 C、 CDNA文庫法 D、聚合酶鏈反應 在基因工程中，把選出的一個目的基因（共1000個脫氧核苷酸對，其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是460個）放入 DNA擴增儀中擴增 4次，那么，在擴增儀中應放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)是（ ）個A. 540 B. 8100 C. 17280 D. 7560下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是① 從基因文庫中獲取目的基因 ② 利用 PCR技術擴增目的基因 ③ 反轉錄法 ④ 通過 DNA合成儀利用化學方法人工合成A． ①②③④ B ． ①②③ C． ②③④ D． ②③D 95攝氏度的目的是使 DNA中的 斷裂，這一過程在細胞內是通過 的作用來完成的。（
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