【正文】 應用范圍廣： 酸堿滴定 指示電極： PH玻璃電極 參比電極：甘汞電極 氧化還原滴定 指示電極： 一般為鉑電極 參比電極：甘汞電極 沉淀滴定 指示電極：根據(jù)不同的沉淀反應來采用不同的指示電極 .如：硝酸鹽標準溶液滴定 鹵素 可用銀電極做指示電極 。儀器結構框架如下圖： 四、自動電位分析儀簡介 84 電位滴定法的應用和指示電極的選擇 在電位滴定中判斷終點的方法，比之用指示劑指示終點的方法更客觀，許多情況下電位滴定更為準確。即：曲線的極大點是終點，此法的依據(jù)是一級微商022???VE 商品電位滴定儀有半自動、全自動兩種。 二級微商法 Δ2E/ΔV 2二階微商。 繪 （△ E/ △ V)V曲線法 △ E/ △ V為 E的變化值與相對應的加入滴定劑的體積的增量的比。 一、電位滴定法的原理 二、電位滴定法的結構圖： 三、電位終點的確定 繪制 EV曲線 用加入滴定劑的體積（ V）作橫坐標，電動勢讀數(shù)（ E）作縱坐標，繪制 EV曲線，曲線上的轉(zhuǎn)折點即為化學劑量點。它也是基于能斯特方程。多“探頭”陣列組合，聯(lián)合工作，極大的提高了檢測效率， 生物芯片 稱為電極發(fā)展的前沿。其經(jīng)修飾后，穩(wěn)定性，重現(xiàn)性可大為改觀，應用范圍擴大， 修飾電極 扮演的角色越來越重要；隨著研究的深入化，分子化，常用電極由于其體積過大而無法實現(xiàn)生物體內(nèi)在線檢測，因此電極呈現(xiàn) 微型化 的趨勢；由于酶的專一性，高效性，免疫反應的特異性，生物化學與電化學相結合，形成 生物電極 稱為新寵。芯片技術是傳感器技術的發(fā)展。所以傳感器的精髓往往都被應用于芯片的發(fā)展。 芯片分析實際上是傳感器分析的組合。反應結果用同位素法、化學熒光法、化學發(fā)光法或酶標顯示，然后用精密的掃描儀或 CCD攝影技術記錄。 生物芯片 [10] 生物芯片的實質(zhì)是在面積不大的基片表面上有序地點陣排列了一系列固定于一定位置的可尋址的識別分子。 電位法免疫電極： 該電極是基于抗體與抗原發(fā)生反應時引起膜電極表面的某些物理性質(zhì)發(fā)生改變，進而使膜電位或電極電位發(fā)生改變。 微生物電極： 微生物電極的分子識別部分是由固定化的微生物構成。生物電極包括：酶電極 ， 微生物電極 和 電位法免疫電極 。 化學修飾電極 [7] 生物電極 [8][9] 將生物化學與電化學相結合可研制出生物電極。早期采用共價鍵合法和吸附法制備單分子層化學修飾電極，但電化學響應靈敏度較低，制備復雜，壽命較短；后研發(fā)出聚合物薄膜化學修飾電極，該電極電化學響應靈敏，制備簡單，且由于聚合物薄膜本身提供了固有的物理化學穩(wěn)定性，使其重現(xiàn)性好，壽命長。 化學修飾電極 （ CME）是在電極表面接上所需要的化學基團，以使其高選擇性的進行所期待的反應或使其擁有某種特定的電化學性質(zhì)。 （ 4）酶 pH傳感器 由于酶是蛋白質(zhì)分子，其作用如同生物催化劑催化復雜的化學反應，酶的專一性及其對低濃度底物的催化能力，使之可固定在選擇電極上，制得 pH傳感器。 （ 2）化學修飾電極 pH傳感器 利用在原電極上接上含有特殊基團的聚合物來提高電極的性能。特別適用于在線分析和生物醫(yī)學領域，尤其在體內(nèi)在線檢測方面獲得廣泛應用。同時，存在著體積大，不適應微區(qū)，微環(huán)境和生物活體的在線檢測等不足于是研發(fā)出各種新型的 pH傳感器。是直接電位分析法的重要誤差來源之一。 （ 3）與介質(zhì)的離子強度有關 ,含有大量非干擾離子響應快 （ 4）共存離子的存在對響應時間有影響 （ 5）與膜的厚度，表面光潔度等有關。 響應時間 電極浸入溶液后達到穩(wěn)定的電位所需時間 （ 1）與待測離子到達電極表面的速度有關。 被測離子的濃度 離子選擇電極可以檢測的線形范圍一般為： 101~106mol/l。 測定帶來誤差，電極響應時間增加 消除干擾離子的作用，加掩蔽劑，必要時進行預處理。值求出測得的由可由上式求的，因而可為常數(shù)，式中xsEnxxCECSCCCCnSE???????????1/)110()1l g (五、影響測定的因素 )( nFRT溫度 影響直線的斜率 直線的截距 電極電位、液接電位 測定過程應保持溫度恒定，提高測定準確度 電動勢測量 測量的準確度（亦即測量的誤差）直接影響測量的準確度。2?? 式中 r2和 x2分別為 加入標準溶液后新的活度系數(shù)和游離離子的摩爾分數(shù)。是游離（及未絡合）的式中 1x 然后加入小體積 Vs(約為試樣體積的 1/100) 的待測離子的標準溶液（濃度為 Cs，此時 Cs約為 Cx的 100倍。標準加入法可在一定程度上避免這種誤差。 離子強度調(diào)節(jié)劑 ： 是濃度很大的電解質(zhì)溶液，它對欲測離子沒有干擾，加到標準溶液及試樣溶液中后，它們的離子強度都達到很高二近乎一致，從而使活度系數(shù)基本相同，同時可調(diào)節(jié)溶液的 PH值，掩蔽干擾離子?？刂迫芤弘x子強度的方法常有 “恒定離子背景法” 和加入 “離子強度調(diào)節(jié)劑” 法。在同樣條件下，測出對應于待測溶液的 E 值，即可從標準曲線上查出。 標準曲線法 將離子選擇電極與參比電極插入一系列活（濃）度已知的標準溶液中，測出相應的電動勢。 四、測量離子濃（活）度的方法 離子選擇性電極可以直接用來測定離子的活（濃）度。 ISFET具有以下優(yōu)點：全固體器件、體積小、易于微型化，本身具有高阻抗轉(zhuǎn)換和放大功能等優(yōu)點。 ISFET是將 MOSFET的金屬柵極代之以離子選擇電極的敏感膜。當該電極上的 hCG 抗體與被測液中的 hCG形成免疫復合物時，電極表面的電荷分布發(fā)生變化，改變化通過電極電位的測量被檢測出來。 其機制為，固定在膜或電極的表面上的抗原（或抗體），與抗體（或抗原）形成免疫復合物后，膜中電極表面的物理性質(zhì)，如表面電荷速度，離子在膜中的擴散速度發(fā)生了改變，從而引起膜電位或電極電位的改變。 電位法免疫電極 (potentiometric immune electrode) 生物中的免疫反應具有很高的特異性。 如：將大腸桿菌固定在二氧化碳氣體敏感電極上實現(xiàn)了對賴氨酸的分析；球菌固定在氨敏電極上實現(xiàn)了對精氨酸的檢測。 組織電極的酶源與測定對象一覽表 微生物電極 微生物電極的分子識別部分是由固定化的微生物構 成的。 （ 4）生物組織一般具有一定的機械性和膜結構，適于固定，因而組織電極的制作簡便而經(jīng)濟。 （ 2）組織細胞中的酶處于天然狀態(tài)和理想環(huán)境下，因而 性質(zhì)最穩(wěn)定 ， 功效最佳 。于是有以動植物組織代替酶 作生物膜催化材料所構成的組織電極（ tissue based membrane electrodes）出現(xiàn)，這是敏化電極的一種有