【導(dǎo)讀】產(chǎn)品組分的過程，并達(dá)到可接受的殘留限度。設(shè)備的清潔驗證，是企業(yè)對其制定的設(shè)備清潔規(guī)。程草案科學(xué)性、合理性、合法性進(jìn)行確認(rèn)的過程。產(chǎn)品生產(chǎn)質(zhì)量的重要保證。案的制定、清洗規(guī)程草案的驗證、驗證方法的驗證、清潔合格標(biāo)準(zhǔn)的制定等。2020年12月27～2020年1月20日收集資料文獻(xiàn)，完成開題報告。2020年5月14日～5月27日在指導(dǎo)老師指導(dǎo)下修改、完善畢業(yè)論文。2020年5月28日～6月10日準(zhǔn)備畢業(yè)論文答辯相關(guān)事宜、完成論文答辯。[3]左敏.固體制劑生產(chǎn)設(shè)備的清潔驗證.中國制藥裝備，2020,8:30-33.[6]陳雯秋.清潔驗證中分析方法的驗證.中國藥業(yè)，2020,14:17-18.在GMP認(rèn)證或檢查時，容易蒙混過關(guān)。中，從而影響另一產(chǎn)品的安全和療效。由于最低殘留量的合格標(biāo)準(zhǔn)目前沒有統(tǒng)一規(guī)定，企業(yè)可通過擦拭法和。理的，能實現(xiàn)并能通過適當(dāng)?shù)姆椒z驗的限度標(biāo)準(zhǔn)。效的清潔溶劑，則根據(jù)產(chǎn)品組及其標(biāo)記物的性質(zhì)選擇。范圍內(nèi)完成，以保證數(shù)據(jù)的可靠性。反復(fù)試驗至少三次，分析測試的數(shù)據(jù)符合規(guī)定的殘留限度標(biāo)準(zhǔn)，

　　

【正文】 沿垂直和水平方向往復(fù)擦拭。將棉簽?zāi)┒饲械?，放入一個已加入 40mL低 TOC水玻璃瓶中，塞緊，渦流振蕩，并在檢測前放置 1h。取等量試液加入 40mL低 TOC水，然后檢測 擦拭回收率為 %～%,RSD=%～ 5) 檢測限 (LOD)和定量限 (LOQ) 在常規(guī)的原料藥或者制劑的分析中， LOD和 LOQ值一般并不重要，因為被測物的量一般要遠(yuǎn)大于 LOQ。但在清潔驗證中就不同了，因為其分析目的就是要確定痕量的殘留物 ,所以這兩個是清潔驗證非常關(guān)心的。 傳統(tǒng)的方法是信噪比法。大多數(shù)的現(xiàn)代色譜和光譜分析軟件都有測量基線噪音的方法。 LOD一般是噪音的三倍量， LOQ一般是十倍量。 LOQ是符合一定的精密度和線性要求的最低濃度。另外一種方法是利用校正曲線的有關(guān)信息。 ICHQ2B中給出 了兩個公式 :LOD= /S,LOQ=10σ /S，其中 S是校正曲線的斜率，而σ為響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差。 ICHQ2B對σ的確定推薦了兩種方法，一種是做多次空白，各次的響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)偏差為σ；另外一種方法是做多條校正曲線，各曲線的 Y軸截距的標(biāo)準(zhǔn)偏差為σ [12]。盡管計算 LOD和 LOQ的方法有很多，但是在法規(guī)性的文件中并沒有明確推薦使用哪一種。無論用何種方法，均應(yīng)用實際的樣品來確定真實的 LOD和 LOQ。確定 LOD和 LOQ的方法應(yīng)該寫在正式的文件中，例13 如寫在分析方法或者 SOP中。定量限一般要求 RSD不大于 10%。 殘留 物的限度不能以 LOQ值為基礎(chǔ)，因為低于 LOQ的結(jié)果有很高的不確定性。如果實驗證明某方法的 LOQ與殘留物限度很接近，那么也就說明了該方法不適合。 6) 準(zhǔn)確度 [11] 準(zhǔn)確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或認(rèn)可的參考值之間接近的程度，有時也稱為真實度，一般以回收率（ %）表示。對于清潔驗證來說，在某些情況下，回收率需要盡可能地接近100%，但是有的情況下，回收率低至如 50%也是可以接受的。做回收率的一種方法是，將雜質(zhì)、輔料、清潔劑與被測物一起制成溶液，模擬成最終淋洗水樣，取樣后證明被測物的分析結(jié)果與理論量接近。制備溶液的溶劑應(yīng)該是用于設(shè)備最終淋洗的液體。制備多份含有適量的雜質(zhì)、輔料和清潔劑的溶液，將不同濃度的被測物加入這些溶液中。這些濃度應(yīng)該包括被測物合格標(biāo)準(zhǔn)濃度，一般是 25%到 150%的被測物的殘留限度，也曾有人用 10%到 500%。對于擦拭樣品，可能要煩瑣些，要考慮到棉簽將被測物從設(shè)備表面去除的能力，被測物從棉簽中被回收的能力，以及雜質(zhì)、輔料、清潔劑以及棉簽材料本身可能造成的干擾。如果對分析方法的準(zhǔn)確度有足夠的信心，所有這些因素可以綜合在一起考察。如果得到的結(jié)果很差，則需要分步做實驗，首先要查明造成結(jié)果差的原因 ，然后通過換用溶劑或者棉簽材料以改善回收率。 用于清潔驗證的分析方法應(yīng)該有多少回收率，一直爭議頗多。 FDA在“審核指南，清潔工藝的驗證”中指出，回收率應(yīng)該予以確定，并且列出了 50%和 90%作為示例。回收率的值可用于計算殘留物的真實濃度，或者考慮到合格標(biāo)準(zhǔn)中去，二者取其一。如果回收率低于理想值，則應(yīng)做實驗確定造成回收率偏低的主要因素。常做的實驗是將原噴灑到模擬表面的溶液直接滴到棉簽上，全部吸收后再浸入提取溶劑中。如果噴灑用溶劑和提取溶劑不同，可以將棉簽揮干后，再放入提取溶劑中。如果該實驗的回收率仍低，那么應(yīng)換 用更強(qiáng)的提取溶劑或換用不同材料的擦拭棉簽。如果回收率可以接受，那么問題在于將殘留物從表面除下這一步，換用不同材料的棉簽，換用更強(qiáng)的擦拭溶劑，或者改變擦拭方式（如多支棉簽、或干或濕、更用力地擦拭等），觀察回收率是否有提高。被測物的揮發(fā)性也可能會造成回收率偏低，特別是當(dāng)揮干步驟中有使用加熱的或抽真空的烘箱。如果原因確實如此，則不必使用烘箱。 殘留物含量計算 1）制劑殘留物限度的計算：在某設(shè)備內(nèi)分別取 3塊不易清潔區(qū)域，面積 10 10㎝ 2，進(jìn)行擦拭取樣 檢測得出 3塊區(qū)域平均 A產(chǎn)品殘留濃度為 2mg 100cm2,設(shè)備內(nèi)表面積為 75000cm2,擦拭取樣回收率 75%那么 ,設(shè)備內(nèi)表面總殘留量為 2mg 100cm2 75000cm2247。 75%=2020mg。 假設(shè) A為標(biāo)記產(chǎn)品 ,其最小日給藥劑量 MTDA = 50mg。 B為同組產(chǎn)品里批量小 NB=200kg、且按批量折算成其制劑數(shù)量 (NB/MDDB)最少的產(chǎn)品 , B產(chǎn)品最大日給藥劑量 MDDB = 100mg。 A產(chǎn)品的殘留 100%轉(zhuǎn)移到隨后生產(chǎn)的 B產(chǎn)品中。 用 MTDD千分之一限度法計算殘留標(biāo)準(zhǔn)為 LA= MTDA 1/1000NB/MDDB=100000mg。用 10ppm限度法計算殘留標(biāo)準(zhǔn)為 LA= NB 10 106=2020mg。為了更好的保證藥品質(zhì)量和用藥安全 ,建議可以嘗試將 2種殘留限度標(biāo)準(zhǔn)對比 ,選擇更安全的為佳。舉例檢測的殘留量為 2020mg,符合最低限度要求。注意 :計算實際殘留量時應(yīng)用檢測的殘留量除以回收率。 2）原料藥殘留度的計算：原料藥殘留限度 14 國際上通常按雜質(zhì)對待 ,即殘留小于 1/1000。但原料藥在生產(chǎn)過程中 ,可能有部分未反應(yīng)物和副反應(yīng)物產(chǎn)生 ,如果它們有毒性或強(qiáng)藥理作用 ,就有必要計算其殘留限度 ,以免帶入下批原料藥產(chǎn)品中?；瘜W(xué)物質(zhì)毒性一般用“最低中毒劑 量 (TDLO)”和“半數(shù)致死量 (LD50)”來表示 ,兩者之間可用 Layton[13]經(jīng)驗常數(shù)換算 ,即 TDLO= LD50 0 0005 d1,一般認(rèn)為殘留限度為 TDLO的 1/1000最安全。例如 :假設(shè)某原料藥生產(chǎn)過程中生成毒性副產(chǎn)物。毒性數(shù)據(jù) LD50= 80mg kg1(注射 ),假設(shè)使用同一設(shè)備的下一品種最小批產(chǎn)量為 40kg,下批產(chǎn)品的最大日劑量為 200 mg,同時假設(shè)成人平均體重為 70kg,那么用于成人注射時 NOEL (活性成分無顯著藥理作用 ) = LD50 0 0005 d1體重 =80mg kg1 0 0005 d1 70kg =2 8mg d1。安全日攝用量 =2 8mg 1/1000 (安全系數(shù) )。下批產(chǎn)品折算成最少制劑數(shù) =最小批產(chǎn)量 /最大日劑量 ,殘留限量 =安全日攝用量下批產(chǎn)品含最少制劑數(shù) =2 8mg 103 40kg/200mg=560mg。 清潔有效期的驗證 藥品生產(chǎn)企業(yè)必須嚴(yán)格按 CNIP((藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 ))要求組織生產(chǎn)與管理，以保證藥品符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，保障藥品有效性與安全性。隨著 GN[P管理工作不斷深入，驗證工作也需做的更細(xì)化，尤其是各類清潔驗證，對于潔凈區(qū)各 工序生產(chǎn)更為重要。衛(wèi)生不符合要求，很容易造成污染與交叉污染，最終影響藥品生產(chǎn)質(zhì)量。容器具、設(shè)備等的清潔效果與清潔周期均需經(jīng)驗證后確定。不同潔凈級別生產(chǎn)其清潔有效期不同， 如 口服固體制劑車間 (30萬潔凈級別 )容器具使用后清潔，其清潔有效期定為幾 天更合理。 驗證時，按各容器具相應(yīng)的清潔規(guī)程清潔后，將其倒放在容器具的存放架上，在車間每日正?？諝獾膬艋闆r下，取樣檢測（多個相同的設(shè)備在同一點進(jìn)行取樣，同時檢測（一般情況下以微生物殘留作為檢測對象））。依據(jù)檢驗結(jié)果制定出合理的清潔周期（清潔有效期）。 目前只有對清潔后的 容器具微生物指標(biāo)作限定 [12]并無 清潔周期驗證的微生物指標(biāo)的確定應(yīng)依據(jù)不同生產(chǎn)品種的工藝要求制定，以滿足產(chǎn)品生產(chǎn)環(huán)境和衛(wèi)生需求為依據(jù)。 如一般規(guī)定固體制劑容器具微生物限度標(biāo)準(zhǔn)≤ 200個 /cm2。 清潔方法的監(jiān)控與再驗證 日常監(jiān)控 對已驗證并投人運行的清潔方法進(jìn)行監(jiān)控，通過對日常監(jiān)控數(shù)據(jù)的回顧，以確定是否需要再驗證或確定再驗證的周期。監(jiān)控的方法一般為肉眼觀察是否有可見殘留物，必要時可定期取淋洗水或擦拭 取樣進(jìn)行化驗。由于對指定殘留物的定量分析通常較繁瑣，可開發(fā)某些有足夠靈敏度且快速的非專屬性檢驗方法，如測定總有機(jī)碳。 變更管理 對已驗證設(shè)備、清潔規(guī)程的任何變更以及諸如改變產(chǎn)品處方、增加新產(chǎn)品等可能導(dǎo)致清潔規(guī)程或設(shè)備變更的變更，應(yīng)有專門人員審核變更申請后決定是否需要進(jìn)行再驗證。在發(fā)生以下情形之一時，須進(jìn)行清潔規(guī)程的再驗證 :(l)清潔劑改變或清潔程序作重要修改 。(2)增加生產(chǎn)相對更難清潔的產(chǎn)品 。(3)設(shè)備有重大變更 。(4)清潔規(guī)程有定期再驗證的要求。 15 4 結(jié)論 設(shè)備的清潔以及設(shè)備的驗證可以有效的 防止交叉污染，保證 下批產(chǎn)品規(guī)定的 療效、質(zhì)量、安全性狀態(tài) 。同時通過驗證 ，可以 更直接的從中發(fā)現(xiàn)問題， 在減少投資成本的情況下 ， 為制藥企業(yè)提供 新的方法及新的思路 。 但是 ， 目前仍然 有許多問題需要注意和解決。 （ 1） 制藥企業(yè)應(yīng)根據(jù) 本企業(yè)的品種、劑型、及設(shè)備情況制定 清潔規(guī)程和驗證方案，開展清潔驗證 。 （ 2） 設(shè)備表面生物殘留物（如微生物等）的 可以參考以上的內(nèi)容 。 （ 3） 回收率問題 :設(shè)備 取樣方法回收率較低 ,甚至小于 50%的時候 ,我們就要在驗證中 逐步找原因，要考慮的對象有 :① 產(chǎn)品的粘性或吸附性較高 。② 選擇的擦拭溶媒不好 。③ 取樣人員用棉簽擦拭的力度、速度和路線產(chǎn)生的差異 。④ 棉簽是否進(jìn)行洗滌和擠干反復(fù)操作 。⑤ 洗滌液轉(zhuǎn)溶是否完全 。⑥ 標(biāo)記物是否穩(wěn)定等。 一般情況下 回收率至少應(yīng)大于 70%,RSD小于 10%為佳。因為 ,分析檢驗本身的回收率至少大于98%,對取樣方法回收 率 影響不大。如果取樣方法回收率過低 ,意味著清洗溶媒和清洗效果不佳。 16 參考 文獻(xiàn) [1] 程艷 .制藥企業(yè)工藝設(shè)備的清潔規(guī)程及清潔驗證 .中國藥業(yè)， 2020,15(9):1920. 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