【正文】 (六) 取樣方法驗(yàn)證取樣過(guò)程需經(jīng)過(guò)驗(yàn)證。通過(guò)回收率試驗(yàn)驗(yàn)證取樣過(guò)程的回收率和重現(xiàn)性。要求包括取樣回收率和檢驗(yàn)方法回收率在內(nèi)的綜合回收率一般不低于50％，有的企業(yè)甚至要求不低于80％，多次取樣回收率的RSD 不大于20％。取樣過(guò)程的驗(yàn)證實(shí)際上是對(duì)藥簽、溶劑的選擇、取樣人員操作、殘留物轉(zhuǎn)移到藥簽、樣品溶出(萃取)過(guò)程的全面考察。驗(yàn)證方法如下。① 準(zhǔn)備一塊與設(shè)備表面材質(zhì)相同的500mm500mm 的板材。如平整光潔的不銹鋼板。 ② 在鋼板上用鋼錐劃出400mm400mm 的區(qū)域，每隔l00mm 劃線(xiàn)，形成16 塊100mm100mm 的方塊。③ ％的溶液，定量裝入噴霧器。④ 將約10ml 溶液盡量均勻地噴在400mm400mm 的區(qū)域內(nèi)。原因⑤ 根據(jù)實(shí)際噴出的溶液量計(jì)算單位面積的物質(zhì)量(約1μｇ／cm2)。⑥ 自然干燥或用電吹風(fēng)溫和地吹干不銹鋼板。⑦ 用選定的擦拭溶劑潤(rùn)濕擦拭工具，按前述擦拭取樣操作規(guī)程擦拭鋼板，每擦一個(gè)方塊(100cm2)換一根擦拭棒，共擦6～10 個(gè)方塊。⑧ 將擦拭棒分別放人試管中，蓋上試管蓋，加入預(yù)定溶劑10ml，加塞，輕搖試管，并放置10min，使物質(zhì)溶出。⑨ 用經(jīng)驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)，計(jì)算回收率和回收率的RSD。取樣員的取樣方式是產(chǎn)生較大RSD 的主要原因。應(yīng)盡可能采用固定的力度、擦拭速度和線(xiàn)路。取樣員可根據(jù)擦拭棒彎曲的程度估算加在擦拭表面的壓力。七、驗(yàn)證方案清潔驗(yàn)證方案可有多種形式，其共性是必須體現(xiàn)方案韻科學(xué)性。一般而言應(yīng)當(dāng)包含的內(nèi)容有。(1) 目的 明確待驗(yàn)證的設(shè)備和清潔方法。(2) 清潔規(guī)程 待驗(yàn)證的清潔方法的SOP 即清潔規(guī)程應(yīng)當(dāng)在驗(yàn)證開(kāi)始前確定下來(lái)，在驗(yàn)證方案中列出清潔規(guī)程以表明清潔規(guī)程已經(jīng)制定。(3) 驗(yàn)證人員 列出參加驗(yàn)證人員的名單，說(shuō)明參加者所屬的部門(mén)和各自的職責(zé)，對(duì)相關(guān)操作人員的培訓(xùn)要求(4) 確定參照物和限度標(biāo)準(zhǔn) 在本部分應(yīng)詳細(xì)闡述確定參照物的依據(jù)，確定限度標(biāo)準(zhǔn)的計(jì)算過(guò)程和結(jié)果。一般可將相關(guān)設(shè)備列表，計(jì)算總表面積，特殊表面面積；將相關(guān)產(chǎn)品列表，列入主要活性成分及其相關(guān)物理化學(xué)性質(zhì)，MTDD 值等，確定參照物質(zhì)，計(jì)算限度標(biāo)準(zhǔn)。(5) 檢驗(yàn)方法學(xué) 本部分應(yīng)說(shuō)明取樣方法、工具、溶劑，主要檢驗(yàn)儀器，取樣方法和檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證情況等。(6) 取樣要求 用示意圖、文字等指明取樣點(diǎn)的具體位置和取樣計(jì)劃，明確規(guī)定何時(shí)、何地、取多少樣品，如何給各樣品標(biāo)記。這部分的內(nèi)容對(duì)方案的實(shí)施和保證驗(yàn)證結(jié)果的客觀性是至關(guān)重要的。(7) 可靠性判斷標(biāo)準(zhǔn) 在本部分，應(yīng)規(guī)定為證明待驗(yàn)證清潔規(guī)程的可靠性，驗(yàn)證試驗(yàn)須重復(fù)的次數(shù)。一般起碼連續(xù)進(jìn)行3 次試驗(yàn)，所有數(shù)據(jù)都符合限度標(biāo)準(zhǔn)方可。第四節(jié) 驗(yàn)證的實(shí)施當(dāng)驗(yàn)證方案獲得批準(zhǔn)，所有準(zhǔn)備工作進(jìn)行完畢后，即進(jìn)入了驗(yàn)證實(shí)施階段。驗(yàn)證實(shí)施應(yīng)嚴(yán)格按照批準(zhǔn)的方案執(zhí)行。本階段的關(guān)鍵在于清潔規(guī)程的執(zhí)行和數(shù)據(jù)的采集：取樣與化驗(yàn)。驗(yàn)證實(shí)施后寫(xiě)出驗(yàn)證報(bào)告。應(yīng)及時(shí)、準(zhǔn)確地填寫(xiě)清潔規(guī)程執(zhí)行記錄，保證清潔過(guò)程完全按照規(guī)程進(jìn)行。執(zhí)行規(guī)程的人員應(yīng)當(dāng)是將來(lái)進(jìn)行正式操作的那些人員，而不應(yīng)由方案設(shè)計(jì)人員或其他技術(shù)人員代替。當(dāng)然，有關(guān)技術(shù)人員可在旁觀察規(guī)程的執(zhí)行情況，以便及．時(shí)發(fā)現(xiàn)偏差并予以糾正。取樣應(yīng)由經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)培訓(xùn)并通過(guò)取樣驗(yàn)證的人員進(jìn)行，樣品標(biāo)簽可在取樣前貼好，根據(jù)標(biāo)簽的指示取樣，也可在取樣后立即貼上標(biāo)簽，無(wú)論采取何種方式，應(yīng)以方案規(guī)定為準(zhǔn)。檢驗(yàn)應(yīng)按照預(yù)先開(kāi)發(fā)并驗(yàn)證的方法進(jìn)行。所用的試劑、對(duì)照品、儀器等都應(yīng)符合預(yù)定要求。檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的化驗(yàn)報(bào)告及其原始記錄應(yīng)作為驗(yàn)證報(bào)告的內(nèi)容或附件。驗(yàn)證過(guò)程中出現(xiàn)的偏差均應(yīng)記錄在案，并由專(zhuān)門(mén)人員討論并判斷偏差的性質(zhì)，確定是否對(duì)驗(yàn)證結(jié)果產(chǎn)生實(shí)質(zhì)影響。一般如檢驗(yàn)結(jié)果超出限度，并經(jīng)證明并非化驗(yàn)誤差所致時(shí)，該偏差應(yīng)作為關(guān)鍵偏差。這時(shí)應(yīng)進(jìn)行原因調(diào)查，確定原因并采取必要措施后重新進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。驗(yàn)證結(jié)論應(yīng)在審核了所有清潔作業(yè)記錄、檢驗(yàn)原始記錄、化驗(yàn)報(bào)告、偏差記錄后方能做出。其結(jié)果只有合格或不合格兩種，不可模棱兩可。驗(yàn)證報(bào)告至少包括以下內(nèi)容。(1) 清潔規(guī)程的執(zhí)行情況描述，附原始清潔作業(yè)記錄。(2) 檢驗(yàn)結(jié)果及其評(píng)價(jià)，附檢驗(yàn)原始記錄和化驗(yàn)報(bào)告。(3) 偏差說(shuō)明，附偏差記錄與調(diào)查。(4) 驗(yàn)證結(jié)論。第五節(jié) 清潔方法的監(jiān)控與再驗(yàn)證一、日常監(jiān)控清潔驗(yàn)證報(bào)告一旦批準(zhǔn)，清潔驗(yàn)證即告完成，該清潔方法即可正式投入使用。同藥品生產(chǎn)工藝過(guò)程一樣，經(jīng)驗(yàn)證后，清潔方法即進(jìn)人了監(jiān)控與再驗(yàn)證階段，應(yīng)當(dāng)以實(shí)際生產(chǎn)運(yùn)行的結(jié)果進(jìn)一步考核清潔規(guī)程的科學(xué)性和合理性。在日常生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)清潔方法進(jìn)行監(jiān)控的目的是進(jìn)一步考察清潔程序的可靠性。驗(yàn)證過(guò)程中進(jìn)行的試驗(yàn)往往是有限的，它包括不了實(shí)際生產(chǎn)中各種可能的特殊情況，監(jiān)控則正好彌補(bǔ)這方面的不足。對(duì)手工清洗規(guī)程來(lái)說(shuō)，這點(diǎn)尤其重要，因?yàn)槠渲噩F(xiàn)性很大程度上更取決于對(duì)人員的培訓(xùn)和實(shí)施清潔人的工作態(tài)度。監(jiān)控的方法一般為肉眼觀察是否有可見(jiàn)殘留物，必要時(shí)可定期取淋洗水或擦拭取樣進(jìn)行化驗(yàn)。由于對(duì)指定殘留物的定量分析通常比較繁瑣，可開(kāi)發(fā)某些有足夠靈敏度且快速的非專(zhuān)屬性檢驗(yàn)方法，如測(cè)定總有機(jī)碳(TOC)。美國(guó)藥典、歐洲藥典已將TOC 指標(biāo)確立為注射用水和純水的法定項(xiàng)目，以反映水中有機(jī)物的污染情況。由于該方法的高靈敏性和自動(dòng)化，且絕大多數(shù)殘留物是有機(jī)物，發(fā)達(dá)國(guó)家或技術(shù)水平較高的制藥企業(yè)越來(lái)越多地將其作為清潔作業(yè)的日常監(jiān)控方法。如果日常樣品的TOC 值低且波動(dòng)較小，則證明清潔效果滿(mǎn)意，清潔規(guī)程得到了良好的遵守。一旦出現(xiàn)異常，則提示可能出現(xiàn)了問(wèn)題，此時(shí)再采用專(zhuān)門(mén)的分析方法對(duì)污染物定性定量。通過(guò)對(duì)日常監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)的回顧，以確定是否需要再驗(yàn)證或確定再驗(yàn)證的周期。二、變吏管理對(duì)已驗(yàn)證設(shè)備、清潔規(guī)程的任何變更以及諸如改變產(chǎn)品處方、增加新產(chǎn)品等可能導(dǎo)致清潔規(guī)程或設(shè)備變更的變更。應(yīng)有專(zhuān)門(mén)人員如驗(yàn)證工程師、生產(chǎn)經(jīng)理、QA 經(jīng)理等審核變更申請(qǐng)后決定是否需要進(jìn)行再驗(yàn)證。企業(yè)應(yīng)有變更管理SOP 統(tǒng)一規(guī)范所有變更行為。在發(fā)生下列情形之一時(shí)，須進(jìn)行清潔規(guī)程的再驗(yàn)證。① 清潔劑改變或清潔程序作重要修改。② 增加生產(chǎn)相對(duì)更難清潔的產(chǎn)品。③ 設(shè)備有重大變更。④ 清潔規(guī)程有定期再驗(yàn)證的要求。第六節(jié) 清潔方法的優(yōu)化在實(shí)際生產(chǎn)中，一臺(tái)(組)設(shè)備用于多種產(chǎn)品的生產(chǎn)是非常普遍的現(xiàn)象。有時(shí)各種產(chǎn)品的物理、化學(xué)性質(zhì)有很大差異。這就給清潔規(guī)程的制定者提出這樣的問(wèn)題：是否要為每個(gè)產(chǎn)品分別制定清潔規(guī)程呢?經(jīng)驗(yàn)告訴我們，為一臺(tái)(組)設(shè)備制定多個(gè)清潔規(guī)程并不可?。哼@不但由于為每個(gè)規(guī)程進(jìn)行驗(yàn)證的工作量過(guò)于龐大，更主要的是對(duì)操作者來(lái)說(shuō)要在多個(gè)規(guī)程中選擇適當(dāng)?shù)那鍧嵎椒ê苋菀自斐刹铄e(cuò)。比較可行的方法是在所有涉及的產(chǎn)品中，選擇最難清潔的產(chǎn)品為參照產(chǎn)品，以所有產(chǎn)品／原料中允許殘留量最低的限度為標(biāo)準(zhǔn)(最差條件)，優(yōu)化設(shè)計(jì)足以清除該產(chǎn)品／原料以達(dá)到殘留量限度的清潔程序。驗(yàn)證就以該程序?yàn)閷?duì)象，只要證明其能達(dá)到預(yù)定的要求，則該程序能適用于所有產(chǎn)品的清潔。當(dāng)然，從環(huán)保和節(jié)約費(fèi)用的角度考慮，如果實(shí)踐證明該清潔程序?qū)Υ蠖鄶?shù)產(chǎn)品而言過(guò)于浪費(fèi)，也可再選擇一個(gè)典型的產(chǎn)品進(jìn)行上述規(guī)程制定和驗(yàn)證工作。這時(shí)，在規(guī)程中必須非常明確地規(guī)定該方法適用于哪些產(chǎn)品，還須明確為防止選擇時(shí)發(fā)生錯(cuò)誤需要采取的必要的措施。參照產(chǎn)品的選擇原則如下。① 將所有產(chǎn)品列表(見(jiàn)表3—49)。② 確定產(chǎn)品的若干物理、化學(xué)性質(zhì)為評(píng)價(jià)項(xiàng)目：如主要活性成分的溶解度，黏度，吸附性等，其中最主要的性質(zhì)為溶解度。③ 對(duì)每個(gè)產(chǎn)品的評(píng)價(jià)項(xiàng)目打分。如將溶解度分為l／2／3／4 級(jí)，依次表示難溶／微溶／可溶／易溶。④ 根據(jù)經(jīng)驗(yàn)和產(chǎn)品性質(zhì)，擬定適當(dāng)?shù)那鍧崉┓N類(lèi)。⑤ 計(jì)算各產(chǎn)品的最大允許殘留限度。計(jì)算方法參見(jiàn)第二節(jié)的有關(guān)內(nèi)容。⑥ 將表格按照溶解度由小到大排序，選擇溶解度最小的產(chǎn)品作為參照產(chǎn)品。⑦ 如果表格中使用的清潔劑可分為水／水溶性清潔劑(包括酸、堿溶液)和有機(jī)溶劑兩類(lèi)，應(yīng)分別選擇一種參照代表產(chǎn)品。⑧ 將表中允許殘留限度最小的數(shù)值確定為驗(yàn)證方案的允許殘留物限度標(biāo)準(zhǔn)。⑨ 將 與參照產(chǎn)品對(duì)應(yīng)的清潔劑確定為清潔方法使用的清潔劑。從表中可見(jiàn)，產(chǎn)品丙、丁、乙、戊，可用水溶性清潔劑清潔，應(yīng)選最難溶的產(chǎn)品丙為參照產(chǎn)品，清潔劑為l％NaOH 熱水溶液，允許殘留限度定為1μg/cm。產(chǎn)品甲、己用乙醇為清潔劑，可另算一類(lèi)，應(yīng)選擇產(chǎn)品甲為代表產(chǎn)品，清潔劑為95％乙醇，允許殘留限度定為2．5μg/cm－2。根據(jù)設(shè)備的情況、已確定的清潔劑和殘留限度，設(shè)計(jì)清洗方法。在生產(chǎn)后依法清洗并驗(yàn)證。清潔驗(yàn)證試驗(yàn)至少進(jìn)行3 次。每批生產(chǎn)后按清潔規(guī)程清潔，按驗(yàn)證方案檢查清潔效果、取樣并化驗(yàn)。重復(fù)上述過(guò)程3 次。3 次試驗(yàn)的結(jié)果均應(yīng)符合預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。如果出現(xiàn)個(gè)別化驗(yàn)結(jié) 果超標(biāo)的情況，必須詳細(xì)調(diào)查原因。如果有證據(jù)表明結(jié)果超標(biāo)是因?yàn)槿印⒒?yàn)失誤等原因 造成，可將此數(shù)據(jù)從統(tǒng)計(jì)中刪除。否則應(yīng)判驗(yàn)證失敗。不得采用重新取樣再化驗(yàn)直至合格(Testing until clean)的做法。驗(yàn)證失敗意味著清潔規(guī)程存在缺陷，應(yīng)當(dāng)根據(jù)化驗(yàn)結(jié)果提供的線(xiàn)索修改清潔規(guī)程，隨后開(kāi)展新一輪的驗(yàn)證試驗(yàn)。 －2第七節(jié) 驗(yàn)證方案實(shí)例——大容量注射劑在線(xiàn)清洗驗(yàn)證方案一、目的驗(yàn)證本公司大容量注射劑配制和灌封生產(chǎn)線(xiàn)按清潔規(guī)程進(jìn)行在線(xiàn)清洗后的清潔效果能達(dá)穩(wěn)定到預(yù)定要求。二、清潔規(guī)程略。清潔劑為注射用水。三、驗(yàn)證人員略。四、參照產(chǎn)品與限度產(chǎn) 品與規(guī)格(表3－50)。(一) 參照產(chǎn)品氨基酸產(chǎn)品中胱氨酸的溶解度最小，選定12％氨基酸注射液為參照產(chǎn)品。(二) 限度標(biāo)準(zhǔn)1．最終淋洗水取樣最終淋洗水中總氨基酸濃度不大于1010，淋洗液澄明度與不溶性微粒符合中國(guó)藥典注射劑通則要求，微生物計(jì)數(shù)不大于10CFU／100ml。2．表面擦拭取樣(1) 表面殘留物限度 10μg／cm2。(2) 計(jì)算過(guò)程 實(shí)測(cè)設(shè)備總面積SA 為100 000cm2，特殊部位(灌封頭)面積SSA 為 100cm2，最小批量B 為1000L。根據(jù)公式計(jì)算普通表面殘留物限度，取安全因子F 為10L＝10B／(SAF)(mg／cm2)＝101000／(100 00010)mg／cm2＝0．01mg／cm2＝10μg／cm2因該設(shè)備生產(chǎn)的產(chǎn)品均為臨床營(yíng)養(yǎng)輸液，日用量都在幾十克或更多，故按此計(jì)算的特殊部位殘留物限度遠(yuǎn)大于10μg／cm2，可統(tǒng)一采用10μg／cm2 的限度。(3)表面微生物限度 不超過(guò)1CFU／25cm。五、取樣工具普通取樣瓶 500ml、無(wú)菌取樣瓶500ml、普通藥簽(15cm)、無(wú)菌藥簽(15cm)、帶螺旋蓋試管(15cm)、帶螺旋蓋無(wú)菌試管(1Scm)。六、取樣溶劑注射用水。七、檢驗(yàn)儀器HP 公司HPLC 儀，檢測(cè)器為熒光檢測(cè)器。八、取樣和檢驗(yàn)方法按 SOP進(jìn)行。擦拭取樣方法和檢驗(yàn)方法已驗(yàn)證，見(jiàn)驗(yàn)證報(bào)告R。九、取樣位置(圖)略。十、取樣計(jì)劃在生產(chǎn) 12％氨基酸注射液后按清潔規(guī)程實(shí)施清潔。在清洗進(jìn)行到最終淋洗將結(jié)束時(shí)按取樣位置圖的指示用普通取樣瓶取兩瓶各500mi 淋洗水，用無(wú)菌取樣瓶取兩瓶各500ml 淋洗水。取微生物樣品時(shí)注意避免取樣造成的污染。 清潔完成后按擦拭取樣位置圖的指示取表面殘留物樣和表面微生物樣，應(yīng)先取微生物樣，后在鄰近位置取殘留物樣。樣品應(yīng)及時(shí)貼上標(biāo)簽，表明取樣日期、取樣位置號(hào)、產(chǎn)品名稱(chēng)與批號(hào)及取樣目的。 填寫(xiě)取樣記錄表。(略)驗(yàn)證試驗(yàn)應(yīng)連續(xù)進(jìn)行3 次。45 / 45