基因工程制藥技術(shù)(編輯修改稿)
2025-01-19 07:10 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 。l缺點(diǎn)：活性低，退出臨床應(yīng)用。l基因工程大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn)工藝：干擾素生產(chǎn)工藝路線（ 3）l上市產(chǎn)品：重組人干擾素 rhuIFN?? 1986， rhuIFNα2a， rhuIFNα2b；?? 1990， rhuIFNγ1b； 1993， rhuIFNβ1b；?? 2023－ 2023： PEG化 IFN， PEGIntron,Pegasysl表達(dá)產(chǎn)物：無糖基化， Nmet，無活性包涵體l工藝特點(diǎn)：發(fā)酵過程，隨后變性、復(fù)性過程。干擾素生產(chǎn)工藝路線（ 4）動(dòng)物無限細(xì)胞系培養(yǎng)生產(chǎn)工藝：l上市產(chǎn)品： rhuIFNβ1a?? 1996， Avonex(Biogen)； 2023，Rebif(Serono)l表達(dá)產(chǎn)物： 166aa糖基化蛋白， kul工藝特點(diǎn)：分泌表達(dá)，產(chǎn)量低，成本高 ,過程嚴(yán)格l宿主：腐生型假單胞桿菌（ Pseudomonasputida）l上市產(chǎn)品： IFNα2b/安福隆l表達(dá)產(chǎn)物：無糖基化可溶性蛋白質(zhì)，具有天然分子結(jié)構(gòu)和生物活性l工藝特點(diǎn)：?? 發(fā)酵周期短：幾個(gè)小時(shí)?? 無需變性、復(fù)性過程，獲得有活性產(chǎn)品?? 純化過程：淘汰抗體親和層析干擾素生產(chǎn)工藝路線（ 5）五 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)主要步驟：? 獲取外源目的基因? 外源目的基因?qū)肷臣?xì)胞或胚胎干細(xì)胞? 選擇攜帶目的基因的細(xì)胞，選擇體外培養(yǎng)系統(tǒng)和宿主動(dòng)物? 轉(zhuǎn)基因胚胎的發(fā)育及鑒定? 篩選所得的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物? 經(jīng)典的技術(shù)路線 目的基因顯微注射已交配的 取出 移植 受體動(dòng)物 妊娠供體動(dòng)物 受精卵 輸卵管 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 缺點(diǎn)：注入目的基因的命中率低，目的基因的整合率低，受精卵移植的受孕率低。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的技術(shù)路線? 整合胚胎移植的技術(shù)路線轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 受體動(dòng)物子宮目的基因 非手術(shù)胚胎移植體外受精 體外培養(yǎng) 多細(xì)胞胚胎 檢測 整合外源基因卵子 受精卵 或囊胚 的胚胎精子 優(yōu)點(diǎn)：受精卵的成活率高達(dá) 90％以上，外源基因整合率高，提高受孕率。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的技術(shù)路線（續(xù)）16
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