專題一基因工程選修三dna重組技術(shù)的基本工具,基因工程(編輯修改稿)
2025-03-22 23:32 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 導(dǎo)入受體紳胞 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法： （ 1） 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ①農(nóng)桿菌特點(diǎn)： 易感染 雙子葉植物和裸子植物 ，對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力。 ② 原理：植物體受損傷時(shí)，傷口細(xì)胞會(huì)分泌 酚類化合物 ，吸引農(nóng)桿菌，農(nóng)桿菌的 Ti質(zhì)粒上的TDNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的 DNA上 。 ③ 過程： ④ 優(yōu)點(diǎn)： 經(jīng)濟(jì)有效 （ 2） 基因槍法 （ 3） 花粉管通道法 缺點(diǎn)：成本較高 受體細(xì)胞 (單子葉植物 ) 我國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)，轉(zhuǎn)基因抗蟲棉 將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞 ① 方法： 顯微注射法 ② 程序： ③常用的動(dòng)物受體細(xì)胞： 受精卵和卵細(xì)胞 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 ① 原核生物特點(diǎn)：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少 ② 方法： 用 Ca2+處理細(xì)胞 → 感受態(tài)細(xì)胞 (吸收環(huán)境中 DNA生理狀態(tài) ) → 表達(dá)載體 (緩沖液 )與感受態(tài)細(xì)胞混合 → (溫度 )感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子 （二）方法 將目的基因?qū)? 植物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 動(dòng)物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 微生物細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 —— 顯微注射法 —— 感受態(tài)細(xì)胞法 三、將目的基因?qū)胧荏w紳胞 四、目的基因的檢測(cè)與鑒定 （一）檢測(cè)（分子水平） 檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的 DNA上是否插入了目的基因 ① 提取轉(zhuǎn)基因生物的基因組 DNA ② 用含目的基因的 DNA片段用 放射性同位素 等作標(biāo)記，以此做 探針 ③ 使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交 ,若顯示出雜交帶 ，表明染色體已插入染色體 DNA中 （ 1） 方法 : DNA分子雜交 （ 2）過程 : 檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) （ 1）方法 : 分子雜交 方法 : 抗原 抗體雜交 （ 2）過程 : 用上述探針和轉(zhuǎn)基因生物的 mRNA雜交，若出現(xiàn) 雜交帶 ,表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了 mRNA （二）鑒定（個(gè)體生物學(xué)水平） 抗蟲、抗病接種實(shí)驗(yàn)，活性比較等 人體細(xì)胞 質(zhì)粒 大腸桿菌 目的基因 (人胰島素基因 ) 用同一種限制酶 進(jìn)行酶切 DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒 重組質(zhì)粒 (重組 DNA) 重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞 繁殖 人胰島素 復(fù)制目的基因 1. 獲取目的基因 ?從基因文庫中獲取目的基因 ?利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ?化學(xué)方法人工合成目的基因 2. 構(gòu)建基因表達(dá)載體 ?目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因 3. 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ?植物、動(dòng)物、微生物 4. 目的基因的檢測(cè)與鑒定 ?檢測(cè)：分子水平是否插入、轉(zhuǎn)錄、翻譯 ?鑒定：個(gè)體水平 小節(jié) : 基因工程的基本操作程序 1. 基因工程的基本工具？ 2. 限制酶的特點(diǎn)？ 3. DNA連接酶和載體的種類？ 4. 基因工程的基本操作程序？ 5. 獲取目的基因的方法？ 6. 基因工程的核心步驟是？ 7. 基因表達(dá)載體的組成？ 8. 將抗蟲基因轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞中遺傳和表達(dá)稱為？ 9. 將目的基因?qū)胫参?、?dòng)物、微生物細(xì)胞的方法？ ？ ？ ？ 復(fù)習(xí) 一、植物基因工程碩果累累 轉(zhuǎn)基因工程技術(shù)主要用于 提高農(nóng)作物的抗逆能力 ,以及 改良農(nóng)作物的品質(zhì) 和 利用植物生產(chǎn)藥物 等方面。 (一 )抗蟲轉(zhuǎn)基因植物 殺蟲基因： Bt毒蛋白基因 蛋白酶抑制劑基因 淀粉酶抑制劑基因 植物凝集素基因 ?Bt毒蛋白基因 ?蛋白酶抑制劑基因 ?淀粉酶抑制劑基因 ?植物凝集素基因 產(chǎn)生的抑制劑可與害蟲消化道的蛋白酶結(jié)合 淀粉酶抑制劑抑制昆蟲消化道中的淀粉酶活性 合成的糖蛋白可與昆蟲腸道粘膜上的某種物質(zhì)結(jié)合 編碼的蛋白質(zhì)在害蟲腸道降解成有毒的多肽 轉(zhuǎn)基因抗蟲棉 (二 )抗病轉(zhuǎn)基因植物 病原微生物： 主要有病毒、真菌和細(xì)菌等。 抗 病 轉(zhuǎn)基因植物采用的基因： 抗 真菌 轉(zhuǎn)基因植物采用的基因： 病毒外殼蛋白基因（ CP基因） 病毒復(fù)制酶基因 幾丁質(zhì)酶基因 抗毒素合成基因 (三 )抗逆轉(zhuǎn)基因植物 可以調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因 抗凍蛋白基因 抗除草劑基因 (四 )利用轉(zhuǎn)基
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