基因工程概述(編輯修改稿)
2025-01-25 17:38 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 菌等B 提供目的基 因的生物 DNA連接酶 限制性核酸 內(nèi)切酶 質(zhì)粒 大腸桿 菌等C 提供目的基 因的生物 限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶 質(zhì)粒 大腸桿 菌等D 大腸桿菌等 DNA連接酶 限制性核酸 內(nèi)切酶 提供目的基 因的生物 質(zhì)粒C4 531基因工程的一般步驟1. 獲得目的基因（獲得目的基因（ 目的基因的獲取目的基因的獲取 ））2. 制備重組制備重組 DNA分子（分子（ 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建 ））3. 轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞 (將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 )（（ 篩選篩選 出獲得目的基因的受體細(xì)胞、培養(yǎng)出獲得目的基因的受體細(xì)胞、培養(yǎng) 重組細(xì)胞重組細(xì)胞 ））4. 目的基因的表達(dá)目的基因的表達(dá) （（ 目的基因的檢測(cè)和鑒定目的基因的檢測(cè)和鑒定 ））第一步：獲取目的基因方法：將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫(kù)（ gene library）基因組文庫(kù)cDNA文庫(kù)?；蛭膸?kù)的構(gòu)建模式圖通過(guò)對(duì)受體菌的培養(yǎng)而儲(chǔ)存基因 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因PCR（ polymerase chain reaction） :聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) .是以 DNA變性、復(fù)制的某些特性為原理設(shè)計(jì)的 .1988， 。 前提條件是必須對(duì)目的基因有一定的了解，需要設(shè)計(jì) 引物 。 高溫變性 低溫退火 (復(fù)性 ) 中溫延伸第二步： 制備重組制備重組 DNA分子分子（（ 基因表達(dá)載體的構(gòu)建）核心限制性核酸內(nèi)切酶需要哪兩種工具？DNA連接酶總結(jié)：表達(dá)載體需由哪幾部分組成? 復(fù)制原點(diǎn)? 啟動(dòng)子? 目的基因? 終止子? 標(biāo)記基因第三步：轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞（將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱為 轉(zhuǎn)化（ ruansformation）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖P17積極思維 抗軟化番茄是如何培育出來(lái)的？? 普通番茄為什么不耐貯藏？普通番茄為什么不耐貯藏？? 說(shuō)出抗軟化番茄的培育過(guò)程。說(shuō)出抗軟化番茄的培育過(guò)程。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法顯微注射法 1982年，美國(guó)，帕米特（）超級(jí)小鼠將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞方法宿主細(xì)胞（大腸桿菌）感受態(tài)細(xì)胞 （大腸桿菌）Ca2+? 基因工程中 常用的宿主細(xì)胞 有 大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌、霉菌、植物細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞
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