基因工程概述(編輯修改稿)
2025-01-25 17:38 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 菌等B 提供目的基 因的生物 DNA連接酶 限制性核酸 內(nèi)切酶 質粒 大腸桿 菌等C 提供目的基 因的生物 限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶 質粒 大腸桿 菌等D 大腸桿菌等 DNA連接酶 限制性核酸 內(nèi)切酶 提供目的基 因的生物 質粒C4 531基因工程的一般步驟1. 獲得目的基因（獲得目的基因（ 目的基因的獲取目的基因的獲取 ））2. 制備重組制備重組 DNA分子（分子（ 基因表達載體的構建基因表達載體的構建 ））3. 轉化受體細胞轉化受體細胞 (將目的基因導入受體細胞將目的基因導入受體細胞 )（（ 篩選篩選 出獲得目的基因的受體細胞、培養(yǎng)出獲得目的基因的受體細胞、培養(yǎng) 重組細胞重組細胞 ））4. 目的基因的表達目的基因的表達 （（ 目的基因的檢測和鑒定目的基因的檢測和鑒定 ））第一步：獲取目的基因方法：將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段，導入受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫（ gene library）基因組文庫cDNA文庫?；蛭膸斓臉嫿Ｊ綀D通過對受體菌的培養(yǎng)而儲存基因 PCR技術擴增目的基因PCR（ polymerase chain reaction） :聚合酶鏈式反應 .是以 DNA變性、復制的某些特性為原理設計的 .1988， 。 前提條件是必須對目的基因有一定的了解，需要設計 引物 。 高溫變性 低溫退火 (復性 ) 中溫延伸第二步： 制備重組制備重組 DNA分子分子（（ 基因表達載體的構建）核心限制性核酸內(nèi)切酶需要哪兩種工具？DNA連接酶總結：表達載體需由哪幾部分組成? 復制原點? 啟動子? 目的基因? 終止子? 標記基因第三步：轉化受體細胞（將目的基因導入受體細胞）將目的基因導入植物細胞將目的基因導入動物細胞將目的基因導入微生物細胞目的基因進入受體細胞，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為 轉化（ ruansformation）將目的基因導入植物細胞的方法農(nóng)桿菌轉化法基因槍法花粉管通道法土壤農(nóng)桿菌轉化法示意圖P17積極思維 抗軟化番茄是如何培育出來的？? 普通番茄為什么不耐貯藏？普通番茄為什么不耐貯藏？? 說出抗軟化番茄的培育過程。說出抗軟化番茄的培育過程。將目的基因導入動物細胞的方法顯微注射法 1982年，美國，帕米特（）超級小鼠將目的基因導入微生物細胞方法宿主細胞（大腸桿菌）感受態(tài)細胞 （大腸桿菌）Ca2+? 基因工程中 常用的宿主細胞 有 大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌、霉菌、植物細胞、昆蟲細胞
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