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基因工程(復習)(編輯修改稿)

2025-02-26 10:29 本頁面
 

【文章內容簡介】 因文庫 .1變性( 9095度)2 退火( 5560度)3 延伸( 7075度)利用 PCR技術擴增目的基因① 概念 : PCR全稱為 _______________,是一項 在生物 ____復制 ___________的核酸合成技術 ③ 條件 : _______________________、 _______________、 ___________ 、 ___________.② 原理: __________④ 方式:以 _____方式擴增,即 ____( n為擴增循 環(huán)的次數(shù))⑤ 結果 :聚合酶鏈式反應體外 特定 DNA片段DNA復制已知基因的核苷酸序列四種脫氧核苷酸 一對引物耐高溫的 DNA聚合酶指數(shù) 2n使目的基因的片段在短時間內成百萬倍地擴增⑥ 過程:a、 DNA變性( 90℃95℃ ):雙鏈 DNA模板 在熱作用下, _____斷裂,形成 ___________b、退火( 復性 55℃65℃ ):系統(tǒng)溫度降低,引 物與 DNA模板結合,形成局部 ________。 c、延伸( 70℃75℃ ):在 Taq酶的作用下,合成與模板互補的 ________。 氫鍵 單鏈 DNA雙鏈DNA鏈啟動子:位于基因的首端的一段特殊的 DNA片斷,它是 RNA聚合酶識別和結合的部位,有了它才能驅動基因轉錄出 mRNA,最終獲得蛋白質終止子:位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片斷,能終止 mRNA的轉錄標記基因:是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將有目的基因的細胞篩選出來 農桿菌轉化法將目的基因導入微生物細胞用 Ca2+處理細胞 感受態(tài)細胞 表達載體與感受態(tài)細胞混合 感受態(tài)細胞吸收 DNA分子四環(huán)素四環(huán)素抗性基因抗性基因氨芐青霉氨芐青霉素抗性基因素抗性基因(四 )目的基因的檢測與鑒定檢測 —鑒定 ——① 檢測轉基因生物染色體上是否插入 了目的基因② 檢測目的基因是否轉錄出了 mRNA③ 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法:方法 :方法
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