基因工程(復(fù)習(xí))(編輯修改稿)
2025-02-26 10:29 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 因文庫 .1變性（ 9095度）2 退火（ 5560度）3 延伸（ 7075度）利用 PCR技術(shù)擴增目的基因① 概念 ： PCR全稱為 _______________，是一項 在生物 ____復(fù)制 ___________的核酸合成技術(shù) ③ 條件 ： _______________________、 _______________、 ___________ 、 ___________.② 原理： __________④ 方式：以 _____方式擴增，即 ____（ n為擴增循 環(huán)的次數(shù)）⑤ 結(jié)果 ：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外 特定 DNA片段DNA復(fù)制已知基因的核苷酸序列四種脫氧核苷酸 一對引物耐高溫的 DNA聚合酶指數(shù) 2n使目的基因的片段在短時間內(nèi)成百萬倍地擴增⑥ 過程：a、 DNA變性（ 90℃95℃ ）：雙鏈 DNA模板 在熱作用下， _____斷裂，形成 ___________b、退火（ 復(fù)性 55℃65℃ ）：系統(tǒng)溫度降低，引 物與 DNA模板結(jié)合，形成局部 ________。 c、延伸（ 70℃75℃ ）：在 Taq酶的作用下，合成與模板互補的 ________。 氫鍵 單鏈 DNA雙鏈DNA鏈啟動子：位于基因的首端的一段特殊的 DNA片斷，它是 RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終獲得蛋白質(zhì)終止子：位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片斷，能終止 mRNA的轉(zhuǎn)錄標(biāo)記基因：是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的細胞篩選出來 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胛⑸锛毎?Ca2+處理細胞 感受態(tài)細胞 表達載體與感受態(tài)細胞混合 感受態(tài)細胞吸收 DNA分子四環(huán)素四環(huán)素抗性基因抗性基因氨芐青霉氨芐青霉素抗性基因素抗性基因(四 )目的基因的檢測與鑒定檢測 —鑒定 ——① 檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體上是否插入 了目的基因② 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA③ 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法：方法 ：方法
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