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蛋白質化學最終版ppt課件(編輯修改稿)

2025-06-08 13:55 本頁面
 

【文章內容簡介】 端氨基酸C末端氨基酸分析 :肽鏈外切酶,從多肽鏈的 C端逐個水解氨基酸。 大分子多肽氨基酸順序的確定:裂解 : 溴化氰裂解法;羥胺 NH2OH裂解法 :胰蛋白酶,胃蛋白酶等 確定肽段在多肽鏈中的次序 :重疊法 P72 利用兩套或多套肽段的氨基酸順序彼此間的交錯重疊 , 拼湊出整條多肽鏈的氨基酸順序 。 16肽 , N端 H C端 S A法裂解: ONS PS EOVE RLA HOWT B法裂解: SEO WTON VERL APS HO 重疊法 確定序列: HOWTONSEOVERLAPS ⑤ 分析已純化蛋白質的氨基酸殘基組成 測定多肽鏈的氨基末端與羧基末端為何種氨基酸殘基 把肽鏈水解成片段,分別進行分析 測定各肽段的氨基酸排列順序,一般采用 Edman降解法 一般需用數(shù)種水解法,并分析出各肽段中的氨基酸順序,然后經(jīng)過組合排列對比,最終得出完整肽鏈中氨基酸順序的結果。 蛋白質一級結構測定 按照三聯(lián)密碼的原則推演出氨基酸的序列 分離編碼蛋白質的基因 測定 DNA序列 排列出 mRNA序列 蛋白質鏈 DNA mRNA 二、蛋白質的構象 又稱為空間結構,立體結構,高級結構,三維構象等。 蛋白質分子中原子和基團在三維空間上的排列,分布及肽鏈的走向。 (一)維持蛋白質構象的化學鍵 (鹽鍵) c c 二硫鍵 (二)蛋白質的二級結構 定義: 蛋白質分子中某一段肽鏈的局部空間結構,即該段肽鏈主鏈骨架原子的相對空間位置,并不涉及氨基酸殘基側鏈的構象。 主要的化學鍵: 氫鍵 ? ?螺旋 ? ?折疊 ? ?轉角 ? 無規(guī)線團 蛋白質二級結構的主要形式 肽鍵具有部分雙鍵的性質,不能自由旋轉。參與肽鍵的 6個原子C? C、 O、 N、H、 C?2位于同一平面,稱為肽鍵平面或 肽單元 。 2. ?螺旋 結構特點: ?右手 螺旋 ?每螺旋圈包含 酸殘基 ?氨基酸側鏈伸向螺旋外側,對 ?螺旋的形成有一定影響。 3.?折疊 要點: ⑴ 肽鍵平面折疊成鋸齒狀(折紙狀)R-基團交錯位于齒狀結構上下方 ⑵ 氫鍵 維持穩(wěn)定與主鏈長軸垂直 ⑶兩條以上肽鏈并列時, ?片層有順式和反式平行 (4)R基團太大時,?折疊不易形成 β 折疊:順式和反式中的氫鍵 4. ?折角 無規(guī)卷曲是用來闡述沒有確定規(guī)律性的那部分肽鏈結構。 α 角蛋白中的 α 螺旋和二硫鍵 (三)超二級結構 模體 多肽鏈順序上相鄰的二級結構常常在空間折疊中靠近,彼此相互作用,形成有規(guī)則的二級結構聚集體,是蛋白質發(fā)揮特定功能的基礎。 αα βββ βαβ 鈣結合蛋白中結合鈣離子的模體 鋅指結構 纖連蛋白分子的結構域 (四)結構域 在較大的蛋白質分子中,由多肽鏈上相鄰的超二級結構緊密的聯(lián)系,進一步折疊形成一個或多個相對獨立的三維實體,各行使其功能,稱為結構域 。 結構域特點 : ★ 結構域與分子整體以共價鍵相連 ★ 具有相對獨立的空間構象和生物學功能 免疫球蛋白 G的立體結構 疏水鍵、離子鍵、氫鍵和 范德華力等。 主要的化學鍵:次級鍵 整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對空間位置。即肽鏈中所有原子在三維空間的排布位置。 (五)蛋白質的三級結構 具有三級結構的蛋白質才具有生物學活性,三級結構一旦破壞,蛋白質的生物學功能喪失。 胰島素分子的三級結構 溶菌酶的三級結構 (六)蛋白質的四級結構 血紅蛋白的四級結構 蛋白質結構示意圖 視頻:蛋白質的折疊 三、蛋白質和多肽合成的基本原理 (二)采用生物技術合成蛋白質 (一)化學合成法的基本原理 1. 氨基酸的基團保護: 氨基保護、羧基保護、側鏈基團保護 2. 多肽的液相合成 P80 3. 多肽的固相合成 P81 1. 基因工程 2. 細胞工程 3. 酶工程 P82 基因工程合成蛋白質 基因工程藥品 ( 1) .傳統(tǒng)的蛋白質藥品(如動物激素): 控制某種物質合成基因 轉基因“工程菌” 基因工程藥品 基因表達產(chǎn)物 基因工程 發(fā)酵 分離提取 從動物組織中提取,生產(chǎn)量小,價格昂貴。 ( 3)基因工程生產(chǎn)的藥品 重組人生長激素 重組人白細胞介素 重組人
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