《蛋白質化學最終版》ppt課件(文件)
【正文】 改變 例：鐮刀形紅細胞貧血 Nval pro his val 2. 蛋白質的變構現(xiàn)象 因蛋白質折疊錯誤或折疊導致構象異常變化引起的疾病，稱為蛋白質構象病。 ?生物活性的喪失 ?理化性質的改變 如：黏度增加，失去結晶能力，易被蛋白酶水解等。 P91表 410 蛋白質在其等電點時溶解度最低 。 五 、 蛋白質沉淀反應 3. 加熱沉淀反應 4. 重金屬鹽沉淀法 蛋白質在溶液 PH稍大于其等電點時 ， 蛋白質解離成負離子 ， 易與重金屬離子結合 ，生成不溶性的蛋白質鹽沉淀 。 （一）根據溶解度不同的分離純化方法 視頻：血紅蛋白的提取 是將硫酸銨 、硫 酸 鈉 或 氯化 鈉 等 加 入蛋白質溶液 ，使 蛋 白 質 表面 電 荷 被 中和 以 及 水 化膜被破壞 ，導 致 蛋 白 質沉淀 。 *等電聚焦電泳 ，通過蛋白質等電點的差異而分離蛋白質的電泳方法。這種生物大分子和配基之間形成專一的可解離的絡合物的能力稱為親和力。 第一次作業(yè)： ?氨基酸通式 ?氨基酸兩性解離定義 ?蛋白質一級結構定義 ?蛋白質二級結構類型 ?分子病 ?構象病 ?蛋白質的變性定義 第二次作業(yè)： 。 （三）蛋白質結構鑒定技術 * 二級結構測定 通常采用 圓二色光譜 （ CD)測定溶液狀態(tài)下的蛋白質二級結構含量 。 視頻 等電聚焦 雙向電泳， 2DE 2. 離子交換層析： *親和層析法： ? 生物體內有許多高分子化合物，具有和某些對應的專一分子可逆結合的特性。 這種通過蛋白質在電場中泳動而達到分離各種蛋白質的技術 , 稱為 電泳 。 六、蛋白質的顏色反應 （一）茚三酮反應：氨基 （二）雙縮脲反應：肽鍵 （三）酚試劑反應 P93 圖 411 七、蛋白質的免疫學性質 ?，抗原性 ? ? 單克隆抗體 ? 多克隆抗體 ? ? 免疫預防：疫苗 ? 免疫、診斷治療 骨髓瘤細胞 致敏的 B淋巴細胞 雜交瘤 一、蛋白質的提取 第六節(jié) 蛋白質的分離和純化基本原理 二、蛋白質的分離純化 等電點沉淀： 蛋白質在等電點時溶解度最小。 * 蛋白質膠體穩(wěn)定的因素 顆粒表面電荷 水化層 + + + + + + + 帶正電荷的蛋白質 － － － － － － － － 帶負電荷的蛋白質 水化膜 水化膜 2. 低溫 有機溶劑沉淀蛋白質： 0～ 4℃ 低溫操作 ，丙酮用量一般 10倍于蛋白質溶液體積 ， 沉淀后 ， 應立即分離 ， 以防蛋白質會變性 ， 也可用乙醇沉淀 。 ? 酒精、紫外線消毒； ? 高溫滅； ? 除去雜蛋白； ? 避免活性成分變性。 PrPc α螺旋 PrPsc β折疊 正常 瘋牛病 不同生物與人的 Cytc的 AA差異數目 生物 AA差異數目 黑猩猩 0 恒河猴 1 兔 9 牛、豬、羊、狗 10 響尾蛇 14 海龜 15 金槍魚 21 蛾 31 小麥 35 酵母 44 三、蛋白質的一級結構與生物進化 第五節(jié) 蛋白質的性質 一 、蛋白質分子的大小、形狀及分子量測定 分子篩層析 P87 表 49 SDSPAGE SDS十二烷基硫酸鈉 （ MS）測定蛋白質分子量大小 二、蛋白質的變性 在某些物理和化學因素作用下，其特定的空間構象發(fā)生改變或破壞，從而導致其理化性質改變和生物活性的喪失。C(146) 4. 一級結構的變化與疾病的關系 這種由遺傳物質 DNA突變引起
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