《蛋白質(zhì)化學最終版》ppt課件-預覽頁
【正文】 賴氨酸 Lys K 精氨酸 Arg R 組氨酸 His H 酸性氨基酸 堿性氨基酸 ? 必需氨基酸 指體內(nèi)需要而又不能自身合成 ， 必須由食物供給的氨基酸 ， 共有 8種： Ile、 Met、 Val、 Leu、 Trp 、 Phe、 Thr 、 Lys 。 （三）、 氨基酸的兩性解離及等電點 C H R COO－ H3N+ pH=pI +OH pHpI +H+ +OH +H+ pHpI 氨基酸的兼性離子 陽離子 陰離子 CHNH 2COOHRCHNH 3 +C O O R CHNH 2C O O RCH C O O HRNH 3 +C O O－ C H H 3 N + CH3 K1 C O O H C H H 3 N + CH3 C O O－ H 2 N CH3 K2 Ala+ Ala 177。 一、蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu) 化學鍵 肽鍵 ，有些蛋白質(zhì)還包括二硫鍵。 * 肽鏈中的氨基酸分子因為脫水縮合而基團不全，被稱為 氨基酸殘基 。 （三）蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)測定的原理 C末端氨基酸分析 N末端氨基酸分析 N末端氨基酸分析 （ DNFB）法： P70 （ DNSCl） 靈敏度： 1?109mol。 16肽 ， Ｎ端 H Ｃ端 Ｓ Ａ法裂解： ONS PS EOVE RLA HOWT B法裂解： SEO WTON VERL APS HO 重疊法 確定序列： HOWTONSEOVERLAPS ⑤ 分析已純化蛋白質(zhì)的氨基酸殘基組成 測定多肽鏈的氨基末端與羧基末端為何種氨基酸殘基 把肽鏈水解成片段，分別進行分析 測定各肽段的氨基酸排列順序，一般采用 Edman降解法 一般需用數(shù)種水解法，并分析出各肽段中的氨基酸順序，然后經(jīng)過組合排列對比，最終得出完整肽鏈中氨基酸順序的結(jié)果。 主要的化學鍵： 氫鍵 ? ?螺旋 ? ?折疊 ? ?轉(zhuǎn)角 ? 無規(guī)線團 蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的主要形式 肽鍵具有部分雙鍵的性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn)。 α 角蛋白中的 α 螺旋和二硫鍵 （三）超二級結(jié)構(gòu) 模體 多肽鏈順序上相鄰的二級結(jié)構(gòu)常常在空間折疊中靠近，彼此相互作用，形成有規(guī)則的二級結(jié)構(gòu)聚集體，是蛋白質(zhì)發(fā)揮特定功能的基礎(chǔ)。即肽鏈中所有原子在三維空間的排布位置。 his glu leu glu 瘋牛病是由朊病毒蛋白 ( PrP)引起的一組人和動物神經(jīng)退行性病變。 變性蛋白的特征 變性作用的因素 加熱、紫外線、乙醇等有機溶劑、強酸、強堿、重金屬離子及生物堿試劑等 。 四、蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì) 蛋白質(zhì)分子大小在膠粒范圍之內(nèi) 。 5. 生物堿試劑沉淀法 蛋白質(zhì)溶液 PH小于其等電點時，蛋白質(zhì)解離成 正離子， 易與生物堿試劑結(jié)合，生成不溶性的 鹽而沉淀。 鹽析沉淀： 視頻：蛋白質(zhì)的鹽析 超過濾 加壓 蛋白質(zhì)溶液 半透膜 支持膜的柵板 超濾液 透析 （二）根據(jù)分子大小不同的分離純化方法 未知 logMr 洗出液中的蛋白質(zhì)濃度 洗脫體積（ mL） 層析的主要設(shè)備 3. 密度梯度離心 蔗糖密度梯度 滴加樣品 CsCl密度梯度離心 蛋白質(zhì)在高于或低于其 pI的溶液中為帶電的顆粒 ， 在電場中能向正極或負極移動 。 *雙向凝膠電泳 是蛋白質(zhì)組學研究的重要技術(shù)。 ?特點： 1. 高度特異性 ? 2. 可逆行 （四）根據(jù)配基特異性的分離純化方法 三、蛋白質(zhì)的純度鑒定、含量測定和結(jié)構(gòu)分析 （一）蛋白質(zhì)的純度鑒定 1. 層析法： 層析純 2. 電泳法： 電泳純 3. 免疫化學法： 免疫純 （二）蛋白質(zhì)含量測定 1. 凱氏定氮法 2. 福林（ Folin ） 酚試劑法（ Lowry法） 3. 雙縮脲法 4. 紫外分光光度法 5. BCA比色法 6. Bradford蛋白分析法 視頻：蛋白質(zhì)含量測定 X射線衍射法和核磁共振技術(shù) （ NMR)是研究蛋白質(zhì)三維空間結(jié)構(gòu)最準確的方
教學課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1