培養(yǎng)基及制備ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-31 22:05 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ? 要求：促進菌體迅速生長，產(chǎn)生較多優(yōu)質(zhì)孢子且不會引起菌種變異。 ? 特點 ? C、 N源不宜多，否則只長菌絲，少長或不長孢子； ? 無機鹽濃度要適當控制，否則會影響孢子的顏色和孢子量。 種子培養(yǎng)基 ? 目的 擴大培養(yǎng)增加細胞數(shù)量；培養(yǎng)高活力細胞；加速細胞分裂或菌絲生長 ? 要求 ? 營養(yǎng)豐富、完全，氮和維生素的含量高些； ? 培養(yǎng)基中加入一些易于吸收利用的快 C、 N源，便于孢子發(fā)芽生長，保證球形； ? pH要穩(wěn)定； ? 最后一級盡可能接近發(fā)酵培養(yǎng)基，常加入少量發(fā)酵合成期才大量需要的物質(zhì)。 發(fā)酵培養(yǎng)基 ? 目的：使接種菌絲生長并能高效表達，獲得高的發(fā)酵產(chǎn)量，同時組分盡可能單一，以保證高的得率。 ? 要求 ? 營養(yǎng)豐富完全，有利于產(chǎn)物合成； ? 不能大量加入快 C、快 N源，應和慢 C、 N源相結(jié)合； ? 在產(chǎn)物分泌期間， pH 穩(wěn)定； ? 加入適量合成所需的物質(zhì)，如前體等，進行定向發(fā)酵； ? 采用中間補料，以提高發(fā)酵單位； ? 原料的考慮 ——成本問題 ? 能夠滿足生產(chǎn)菌生長、代謝需要 ? 目的代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量最高 ? 利于提高培養(yǎng)基和產(chǎn)物的濃度以提高生產(chǎn)能力 ? 利于提高產(chǎn)物合成的速度，縮短發(fā)酵周期 ? 減少副產(chǎn)物的形成便于分離純化 ? 原料低廉，質(zhì)量穩(wěn)定，取材容易 ? 原料減少對通氣攪拌的影響，提高氧利用率，降能耗 ? 來源廣泛且供應充足 ? 利于產(chǎn)品分離純化，減少產(chǎn)生三廢物質(zhì) ? 廢物的綜合利用能力強且容易處理 三、工業(yè)培養(yǎng)基選擇 ? 提供必要的營養(yǎng)成分 ? 配制合適的濃度 ? 主成分和其他成分的配比 ? 控制合適的 pH ? 添加有關(guān)前體物質(zhì)和誘導物 ? 阻遏物或抑制劑的影響 ? 金屬離子的影響 四、培養(yǎng)基的配制原則 ㈠ 、培養(yǎng)基成分的選擇原則 ? ? ? ? ③ 當培養(yǎng)基成分確定后，剩下的問題就是各成分最適 的濃度，由于培養(yǎng)基成分很多，為減少實驗次數(shù)常采 用一些合理的實驗設計方法。 ㈡ 、培養(yǎng)基設計的步驟 ① 根據(jù)前人的經(jīng)驗和培養(yǎng)基成分確定時一些必須考慮 的問題，初步確定可能的培養(yǎng)基成分； ② 通過單因子實驗最終確定出最為適宜的培養(yǎng)基成分； ㈢ 、實驗設計 ? 培養(yǎng)基成分的含量最終都是通過實驗獲得的 ? 合理的實驗方法 均勻設計、正交實驗設計、響應面分析 ?多因子實驗 原培養(yǎng)基 : ? 初步確定可能的培養(yǎng)基成分 (以碳源為例 ) 碳源 Y11 碳源 Y11 葡萄糖 ++ 檸檬酸鈉 +++ 果糖 + 蘋果酸鈉 ++ 蔗糖 +++ 酒石酸 ++ 木糖 ++ 丁二酸鈉 +++ 乙醇 ++ 淀粉 +++ 丙三醇 ++ 琥珀酸鈉 ++ 乙酸鈉 +++ Y11菌株對碳源的利用能力 ? 通過單因子實驗確定適宜的培養(yǎng)基成分 (以碳源為例 ) 考慮到成本：乙酸鈉是較為合適的碳源 進一步：通過單因素試驗確定乙酸鈉的濃度 %比較好 結(jié)果： 碳源：乙酸鈉 0. 2% 氮源：氯化銨 % 酵母膏 % 無機鹽 : 復合無機鹽 % ? 正交設計確定優(yōu)化的配方 水平 因 素 A（乙酸鈉） /% B（ NH4Cl） /% C（酵母膏） /% D（無機鹽） /% 1 2 3 正交分析表 改進后培養(yǎng)基 原培養(yǎng)基 改進后培養(yǎng)基的發(fā)酵結(jié)果 表 31 Plackett–Burman設計篩選影響 Y21生長的關(guān)鍵培養(yǎng)基組分 表 32 Plackett–Burman設計 12次試驗確定 9種變量的影響 用 SAS軟件分析試驗結(jié)果 用 SAS軟件分析試驗結(jié)果 ? 當 P值小于 ，為影響顯著因素，通過表可以看出 X1蔗糖， X2蛋白胨， X3酵母膏， X8磷酸二
教學課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1