發(fā)酵培養(yǎng)基滅菌ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-29 12:08 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 KK ? 結(jié)論 1：當(dāng)滅菌溫度上升時(shí)，微生物死亡速率的提高 要超過(guò)培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。 ```lnln1212EEKKKK???）（）（33 從上述的分析可知，在熱滅菌過(guò)程中，同時(shí)會(huì)發(fā)生微生 物死亡和培養(yǎng)基破壞這兩種過(guò)程，且這兩種過(guò)程的進(jìn)行 速度都隨溫度的升高而加速，但微生物的死亡速率隨溫 度的升高更為顯著。因此，可選擇合適的滅菌溫度和 時(shí)間來(lái)調(diào)和二者之間的矛盾。 滅菌溫度 ℃ 滅菌時(shí)間 （ 分 ） 營(yíng)養(yǎng)成分破壞量 % 100 400 110 36 115 15 120 4 130 145 150 再看表滅菌溫度、時(shí)間與營(yíng)養(yǎng)成分破壞 量的關(guān)系（ N/No=） 據(jù)測(cè)定，每升高 10℃ 時(shí)一般化學(xué)反應(yīng) 的反應(yīng)速率的增加倍數(shù)是 ， 而殺死芽孢為 510，殺死微生物細(xì)胞 為 35左右。 34 由此可見(jiàn)，若要減少營(yíng)養(yǎng)成分的破壞，可升高溫度滅菌。 結(jié)論 2：在滅菌時(shí)選擇較高的溫度、較短的時(shí)間，這樣便 既可達(dá)到需要的滅菌程度，同時(shí)又可減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失。 問(wèn)題 滅菌要達(dá)到殺死 %的細(xì)菌芽孢，有兩種方法可以采用， 一種是 118滅菌 15min，另一種是 128滅菌 5min。哪一種方 法好，為什么？ 答：從理論研究和生產(chǎn)實(shí)踐都可證明，在滅菌過(guò)程中，同時(shí)會(huì)發(fā)生微生物死亡和培養(yǎng)基破壞這兩種過(guò)程，且這兩種過(guò)程的進(jìn)行速度都隨溫度的升高而加速，但微生物的死亡速率隨溫度的升高更為顯著。 因此，對(duì)于同一滅菌效果，選擇較高的溫度、較短的時(shí)間，這樣便既可達(dá)到需要的滅菌程度，同時(shí)又可減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失。 35 影響滅菌的因素 ?培養(yǎng)基中氫離子濃度對(duì)滅菌的影響 培養(yǎng)基中氫離子濃度直接影響滅菌的效果。培養(yǎng)基的 酸堿度越大，所需殺滅微生物的溫度越低。 溫度 /℃ 孢子數(shù) /（個(gè)/ml） 滅菌時(shí)間 /min pH值 pH值 pH值 pH值 pH值 120 10000 8 7 5 3 3 115 10000 25 25 12 13 13 110 10000 70 65 35 30 24 100 10000 740 720 180 150 150 pH ～ ，微生物最耐熱； pH ＜ ，氫離子易滲入微生物細(xì)胞內(nèi)，從而改變細(xì)胞的生理反應(yīng)，促使其死亡。所以，培養(yǎng)基 pH值愈低，滅菌所需的時(shí)間愈短。 36 ?微生物細(xì)胞中水分對(duì)滅菌的影響 細(xì)胞含水越多，蛋白質(zhì)變性的溫度越低 ?微生物細(xì)胞菌齡對(duì)滅菌的影響 老細(xì)胞水分含量低、低齡細(xì)胞水分含量高 ?培養(yǎng)基的物理狀態(tài)對(duì)滅菌的影響 ?培養(yǎng)基中微生物數(shù)量對(duì)滅菌的影響 37 為什么說(shuō)培養(yǎng)基中脂肪、糖分和蛋白質(zhì)的含量越 高，滅菌溫度就得相應(yīng)高些 ？ 問(wèn)題 問(wèn)題 滅菌的徹底與否應(yīng)以殺死營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞為準(zhǔn)還是殺死細(xì)菌孢為標(biāo)準(zhǔn)，為什么？ 環(huán)境 耐熱性 大腸桿菌 水 60～ 65℃ 便死亡 10％糖液 70℃ ， 4～ 6min 30％糖液 70℃ ， 30min 答：培養(yǎng)液中油脂、糖類(lèi)及一定濃度的蛋白質(zhì)會(huì)增加微生物的耐熱性， 高濃度有機(jī)物會(huì)包于細(xì)胞周?chē)纬梢粚颖∧ぃ绊憻岬膫鬟f；因此，在固形物含量高的情況下，滅菌溫度可高些。 高濃度鹽類(lèi)、色素能削減其耐熱性 。 38 答：泡沫中的空氣形成隔熱層 ,使傳熱困難，熱難穿透過(guò)去殺滅微生物。 因而有時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產(chǎn)生，或適當(dāng)提高滅菌溫度，延長(zhǎng)滅菌時(shí)間。 問(wèn)題 在滅菌過(guò)程中，為什么說(shuō)培養(yǎng)基發(fā)生泡沫對(duì)滅菌很不利？ 液膜 空氣 空氣 39 問(wèn)題 答：蒸汽滅菌過(guò)程中，溫度的控制是通過(guò)控制罐內(nèi)的 蒸汽壓力 來(lái)實(shí)現(xiàn)。壓力表顯示的壓力應(yīng)與罐內(nèi)蒸汽壓力相對(duì)應(yīng)，即壓力表的壓力所對(duì)應(yīng)的溫度應(yīng)是罐內(nèi)的實(shí)際溫度。但是如果罐內(nèi)空氣排除不完全，壓力表所顯示的壓力就不單是罐內(nèi)蒸汽壓力， 還包括了空氣分壓 ，因此，此時(shí)罐內(nèi)的實(shí)際溫度就低于壓力表顯示壓力所對(duì)應(yīng)的溫度，以致造成滅菌溫度不夠而滅菌不徹底 在滅菌過(guò)程中，為什么要排除罐內(nèi)空氣？ 蒸汽壓力與溫度的關(guān)系 蒸汽壓力(atm) 相 應(yīng) 的 溫 度（ ℃ ） 空氣完全驅(qū)除程度 罐內(nèi)實(shí)際溫度（ ℃ ） 完全驅(qū)除 驅(qū)除 2/3 驅(qū)除 1/2 驅(qū)除 1/3 全未驅(qū)除 40 培養(yǎng)基的 PH值越低，滅菌所需的時(shí)間就愈短。（ ） 問(wèn)題 判斷 在實(shí)際生產(chǎn)中，不宜采用嚴(yán)重霉腐的腐敗的水質(zhì)，是因?yàn)槠湮⑸飻?shù)量多，影響滅菌效果。（ ） 微生物含水量越多，滅菌時(shí)間就得越長(zhǎng)。（ ） 年輕細(xì)胞比年老細(xì)胞更易殺死。（ ） 在滅菌過(guò)程中，充分?jǐn)嚢韪欣跍缇＃? ） 41 三、生產(chǎn)上培養(yǎng)基的滅菌方法 （一）分批滅菌 概念： 先將輸料管內(nèi)的污水放凈并沖洗干凈將配制好的培養(yǎng)基輸入發(fā)酵罐、種子罐或補(bǔ)料罐，用 蒸汽直接加熱 ，達(dá)到滅菌要求的溫度和壓力后 維持 一定時(shí)間，再冷卻至發(fā)酵要求的溫度，這一工藝過(guò)程稱(chēng)分批滅菌 （實(shí)罐滅菌） 優(yōu)點(diǎn) ：設(shè)備要求低，操作簡(jiǎn)便 缺點(diǎn) ：營(yíng)養(yǎng)成份有損失 罐利用率低 不能采用高溫快速滅菌工藝 43 操作 在進(jìn)行培養(yǎng)基滅菌之前，通常應(yīng)先把發(fā)酵罐的分空氣過(guò)濾器滅菌并用無(wú)菌空氣吹干。 若已先行空罐滅菌，此步可不進(jìn)行 預(yù)熱 向夾套或蛇管中通入蒸汽，間接將培養(yǎng)基加熱至70℃ 左右。 作 用： 利于糊化；減少冷凝水的生成；減輕噪音 44 開(kāi)啟蒸汽管，向培養(yǎng)基中通入蒸汽，升溫。 罐壓達(dá) 1kg/cm2 ( MPa)時(shí)，按裝在發(fā)酵罐封頭的接種管、補(bǔ)料管、消泡劑管等應(yīng)排汽。 保溫 調(diào)節(jié)好各進(jìn)汽和排汽閥門(mén)，使罐壓和溫度保持在一穩(wěn)定水平，維持一定時(shí)間。 在保溫階段，凡進(jìn)口在培養(yǎng)基液面下的各管道都應(yīng)通入蒸汽；在液面上的其余管道則應(yīng)排放蒸汽，這樣才能保證滅菌徹底，不留死角。 45 保溫結(jié)束后，依次關(guān)閉各排汽、進(jìn)汽閥；待罐內(nèi)壓力降至，向罐內(nèi)通入無(wú)菌空氣，向夾套或蛇管中通入冷水，使培養(yǎng)基降至所需溫度。 通入無(wú)菌空氣的作用： 加速降溫；保持罐內(nèi)正壓 46 事故 ? 2022年 9月 5日衡陽(yáng)市某啤酒廠釀造車(chē)間一臺(tái)容積 100m3的不銹鋼發(fā)酵糖在清洗過(guò)程中發(fā)生收縮變形而吸癟
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