常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒-微生物分離、純化及培養(yǎng)技術(shù)(編輯修改稿)
2025-07-06 16:20 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 挑菌落：轉(zhuǎn)至斜面，檢查是否一致，保存。 平板劃線法： 倒平板 ， 標(biāo)記培養(yǎng)基名稱 ， 編號和實驗日期 。 劃線方法 稀釋混合平板法 ： 先加菌 倒平板時注意培養(yǎng)基溫度 混合均勻 微生物培養(yǎng)技術(shù) 斜面接種 液體培養(yǎng)基接種 穿刺接種 將已接種的斜面、半固體和液體培養(yǎng) 基放置培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 將生長好的菌種用牛皮紙包好，置 4℃冰箱中保存。 實驗三、菌種保藏 幾種常用的保藏方法： 傳代培養(yǎng)法 保藏的菌種通過斜面、穿刺或皰肉培養(yǎng)基（用于厭氧細(xì)菌）培養(yǎng)好后，置 4C?冰箱中存放，定期進(jìn)行傳代培養(yǎng)、再存放。 可用膠塞代替棉塞或在斜面上覆蓋一層無菌液體石蠟來進(jìn)一步延長保存期。 載體法 使生長合適的微生物吸附在一定的載體上進(jìn)行干燥。 常用的載體有土壤、砂土、硅膠、明膠、麩皮、磁珠和濾紙片等。 懸液法 將細(xì)菌、酵母菌細(xì)胞懸浮在一定的溶液中保存。 溶液包括蒸餾水、糖溶液、磷酸緩沖液、食鹽水等。 冷凍法 使菌種始終存放在低溫環(huán)境下的保藏方法。包括低溫法和液氮法。 此法關(guān)鍵是要克服細(xì)胞的冷凍損傷。注意控制降溫速率及保護(hù)劑的使用。 真空干燥法 這類方法包括冷凍真空干燥法和 L－干燥法。 冷凍真空干燥法是將要保藏的微生物樣品先經(jīng)低溫預(yù)凍，然后在低溫狀態(tài)下進(jìn)行減壓干燥。 L干燥法則不需要低溫預(yù)凍樣品，只是使樣品維持在 10－20C?范圍內(nèi)進(jìn)行真空干燥。 操作方法 斜面保藏法 將菌種轉(zhuǎn)接在適宜固體斜面培養(yǎng)基上，待其充分生長后，用牛皮紙將棉塞部分包扎好（棉塞換成膠塞效果更好），置 4C?冰箱中包藏。 保藏時間依微生物的種類而定。霉菌、放線菌及芽孢菌保存 2－ 4個月移種一次，酵母菌間隔兩個月，普通細(xì)菌一個月，假單胞菌兩周傳代一次。 此法優(yōu)點是操作簡單、使用方便，缺點是保藏時間短、易被污染。 液體石蠟保藏法 將無菌石蠟加在已長好菌的斜面上，其用量以高出斜面頂端 1CM為準(zhǔn)，使菌種與空氣隔絕。 將試管直立，置低溫或室溫下保存。 此法實用且效果較好。霉菌、放線菌、芽孢菌可保藏兩年以上，酵母菌可保藏 1－ 2年，普通細(xì)菌也可保藏 1年左右。 穿刺保藏法 按穿刺接種方式培養(yǎng)菌種，菌種長好后用膠塞封嚴(yán)，置 4℃ 冰箱存放。
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