常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒-微生物分離、純化及培養(yǎng)技術-文庫吧
2025-04-27 16:20 本頁面
【正文】 ， 含糖培養(yǎng)基等可采用此法 。 徹底滅菌則采用間歇滅菌方法 。 煮沸滅菌法： 適用注射器和解剖器皿 ， 時間 10－ 15min， 超高溫殺菌 135150176。 C和 28s對牛乳和其它液態(tài)食品。 優(yōu)點 ： 保持食品價值和營養(yǎng)成分。 過濾除菌 ： 原理 ：介質(zhì)在有壓力時阻隔微生物。 適用范圍 ：許多材料如血清、抗生素及糖溶液采用此法。 設備 ：蔡氏過濾器，濾膜過濾器。 優(yōu)缺點 ：不破壞培養(yǎng)基成分，只適用少量濾液。需 大量無菌空氣以及凈化工作臺。 注意事項 ： 壓力適當； 無菌條件下進行； 防止?jié)B透現(xiàn)象。 輻射滅菌 ： 原理：紫外線波長在 200－ 300nm，具有殺菌作用，以 265266殺菌力強。此段波長易被細胞中核酸吸收；可產(chǎn)生臭氧和過氧化氫。殺菌效力與強度和時間的乘積成正比。 缺點：穿透力不大。距照射物 。 應用：無菌室，醫(yī)院。 注意事項：對眼睛和皮膚有刺激作用。 射線滅菌： r射線，穿透力強，適用于堆積物品的滅菌。 化學藥品滅菌 ： 原理：應用化學制劑破壞細菌代謝機能。 殺菌劑如重金屬離子； 抑菌劑如磺胺類及多數(shù)抗生素。 注意：與藥品的濃度高低，時間長短，微生物種類以及微生物所處的環(huán)境有關。 常用化學殺菌劑有：乙醇、醋酸、石碳酸 福爾馬林、升汞、高錳酸鉀、新潔爾滅等 實驗二 、 微生物的分離 、 純化及培養(yǎng)技術 分離與純化：從混雜的微生物群體中獲得只含某一種或某一株微生物的過程 。 為什么要進行純培養(yǎng)：平板上的單一菌落并不一定保證是一種菌 。 常用的分離 、 純化方法 ： 單細胞挑取法 稀釋涂布平板法 稀釋混合平板法 平板劃線法 稀釋涂布平板法 ： 原理： 步驟： 倒平板： 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 ， 高氏 I號培養(yǎng)基 ， 查氏培養(yǎng)基冷卻至 5560℃ 時 ， 混勻后倒平板 ， 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒 4皿 ， 高氏 I號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基各倒 3皿 。 制備污水稀釋液： 10g土樣 ， 加入 90ml無菌水中 ，在三角瓶中振搖 20min。 取 加入盛有 中 ， 以此類推 ， 制成不同稀釋度 。 涂布：將上述每種培養(yǎng)基平板底面標記稀釋度 ， 然后用無菌吸管從最后三種稀釋度 ， 即 10 105和 106的試管中吸取 ， 用玻棒涂布 。 培養(yǎng)：高氏 I號和查氏倒置培養(yǎng)于 28℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)35days， 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基在 37℃ 培養(yǎng) 12days。
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