常用培養(yǎng)基制備、滅菌與消毒-微生物分離、純化及培養(yǎng)技術(shù)(已修改)
2025-06-11 16:20 本頁(yè)面
【正文】 實(shí)驗(yàn)一 、 常用培養(yǎng)基的制備 、 滅菌與消毒 營(yíng)養(yǎng)：從外部環(huán)境攝取其生命活動(dòng)所必需的能量和物質(zhì) ， 滿足生長(zhǎng)和繁殖需要的一種生理過程 。 是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ) ，是生命活動(dòng)的起點(diǎn) 。 營(yíng)養(yǎng)物：具有營(yíng)養(yǎng)功能的物質(zhì) 。 也包括光能 。 提供生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì) 、 能量 、 代謝調(diào)節(jié)物質(zhì)和良好的生理環(huán)境 。 營(yíng)養(yǎng)要素：碳源 、 氮源 、 能源 、 生長(zhǎng)因子 、 無機(jī)鹽和水 培養(yǎng)基：人工配制、適合微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的混合養(yǎng)料。要求：應(yīng)具備 6大營(yíng)養(yǎng)要素；物質(zhì)比例合適；必須滅菌。 選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的原則 、 方法 及制備過程： 原則：目的明確 、 營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào) 、 經(jīng)濟(jì)節(jié)約 物理化學(xué)條件適宜 方法：生態(tài)模擬 、 查閱文獻(xiàn) 精心設(shè)計(jì) 、 試驗(yàn)比較 步驟：稱量 、 熔化 、 調(diào) PH、 過濾 、 分裝 、 加塞 、 包扎 、 滅菌 、 冷卻 、 無菌檢查 培養(yǎng)基種類： 一 、 按成分的不同分 天然培養(yǎng)基 、 合成培養(yǎng)基 、 半合成培養(yǎng)基 二 、 按培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分 固體培養(yǎng)基 、 液體培養(yǎng)基 、 半固體培養(yǎng)基 三 、 按培養(yǎng)基用途 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 、 選擇培養(yǎng)基 加富培養(yǎng)基 、 鑒別培養(yǎng)基 消毒與滅菌 消毒：消滅病原菌和有害微生物的營(yíng)養(yǎng)體 滅菌：殺滅一切微生物的營(yíng)養(yǎng)體 ， 芽胞和孢子 。 方法： 一、物理的方法：加熱、過濾、輻射 二、化學(xué)的方法：用化學(xué)試劑抑制或殺滅微生物。主要破壞細(xì)菌代謝機(jī)能。如重金屬離子，磺胺類藥物及抗生素等。 加熱法： 干熱法：火焰灼燒滅菌和熱空氣滅菌。 火焰灼燒適用于接種環(huán)、接種針和金屬用具如鑷子等，試管口和瓶口，涂布用玻璃棒。 熱空氣滅菌利用高溫干燥空氣（ 160－ 170C）加熱滅菌 1－ 2h，適用于玻璃器皿和培養(yǎng)皿等。原理加熱使蛋白質(zhì)變性，與水的含量有關(guān)，當(dāng)環(huán)境和細(xì)胞含水量越大，凝固越快。 注意事項(xiàng)： 1） 培養(yǎng)基、橡膠制品、塑料制品不能用此法； 2） 溫度控制在 180176。 ； 3） 物品不能太擠； 4） 溫度降至 70176。 時(shí)才開箱門。 濕熱法 ： 原理：因?yàn)闈駸嶂芯w吸水，蛋白質(zhì)容易凝固，因蛋白質(zhì)含水量增加，所需凝固溫度降低；濕熱的蒸氣有潛熱存在。所以效果比同溫度下干熱好。 高壓蒸汽滅菌法： 設(shè)備：高壓滅菌鍋 時(shí)間長(zhǎng)短根據(jù)滅菌物品的種類和數(shù)量不同有所變化。 適用于培養(yǎng)基、工作服、橡膠物品等的滅菌，也可用于玻璃器皿的滅菌。 注意事項(xiàng)： 1） 冷空氣徹底排除； 2）加水； 3）壓力降為 “ 0”時(shí)方可打開。 常壓蒸汽滅菌 ： 對(duì)于不宜用高壓蒸汽滅菌的培養(yǎng)基如明膠培養(yǎng)基 、 牛乳培養(yǎng)基
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