【正文】 基體,中心體,核仁,染色體等,一般經(jīng)過一定固定染色處理后,實(shí)驗(yàn)材料洋蔥根尖切片 小白鼠肝切片 兔神經(jīng)節(jié)切片 馬蛔蟲受精卵切片 四,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(1)洋蔥根尖切片細(xì)胞的觀察先用低倍鏡觀察根尖的縱切面,注意分生區(qū),伸長區(qū),成熟區(qū)細(xì)胞的異同,然后再仔細(xì)觀察細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),特別要注意細(xì)胞的形狀,大小,以及細(xì)胞壁,細(xì)胞核,核仁,細(xì)胞質(zhì),液泡的形態(tài)結(jié)構(gòu).(2)兔神經(jīng)節(jié)細(xì)胞切片高爾基體的觀察先在低倍鏡下找到兔神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,然后轉(zhuǎn)用高倍鏡觀察,可看到細(xì)胞內(nèi)淡黃色的背景上有黃褐色或者透明的細(xì)胞核,核的周圍分布著許多深褐色的(硝酸銀鍍?nèi)?高爾基體,呈彎曲的線狀,顆粒狀,少量分散在細(xì)胞質(zhì).(3)小白鼠肝細(xì)胞切片線粒體的觀察先用低倍鏡后用高倍鏡觀察,可見到許多肝小葉,每小葉有許多緊密排列成索狀的多角形的肝細(xì)胞,轉(zhuǎn)用油鏡觀察,可見到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分布著許多被蘇木精染成深紫色的線粒體,呈顆粒狀和線狀.(4)馬蛔蟲受精卵切片中心體的觀察取馬蛔蟲受精卵切片,在顯微鏡下找到充滿子宮腔的受精卵,每個馬蛔蟲受精卵外圍有一層較厚的卵膜,膜內(nèi)有寬大的圍卵腔,在細(xì)胞中央被染成藍(lán)色條狀或棒狀的結(jié)構(gòu),亦被染成藍(lán)色的小粒,圖一, 洋蔥根尖細(xì)胞圖圖二, 兔的神經(jīng)細(xì)胞中高爾基體 圖三, 小白鼠肝細(xì)胞切片示線粒體圖四, 馬蛔蟲受精卵切片示中心體生物繪圖應(yīng)注意的問題,先要把顯微鏡下的圖象觀察清楚,再根據(jù)繪圖的要求,安排好圖紙的布局,看到什么繪什么,不要隨意增多或減少,整齊,要用細(xì)的直線標(biāo)示在圖的右邊, ，并比較它們兩者有何不同。不要強(qiáng)力搖晃，以免造成人為的紅細(xì)胞破裂。，所以將溶血時間適當(dāng)?shù)匮娱L至15min，15min時仍然不溶即判斷為不溶血。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果將不同等滲溶液下的溶血現(xiàn)象列表，分析（是否發(fā)生溶血以及溶血發(fā)生的時間、原因）。記錄發(fā)生溶血（可以通過試管壁看清實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上的字為標(biāo)準(zhǔn)）的時間（自加入稀釋血液到溶液變成紅色透明澄清所需的時間）。 mol/L氯化鈉 mol/L氯化銨 mol/L醋酸銨 mol/L硝酸鈉 mol/L草酸銨 mol/L硫酸鈉 mol/L葡萄糖 mol/L甘油 mol/L乙醇 蒸餾水四、實(shí)驗(yàn)方法與步驟%血紅細(xì)胞懸液：（不透明的紅色液體）。本實(shí)驗(yàn)通過觀察紅細(xì)胞溶血現(xiàn)象時間的不同來記錄滲入速度，從而測量各種物質(zhì)通透性的差別。由于溶質(zhì)透入速度不同，溶血時間也不同。將紅細(xì)胞放在某些等滲鹽溶液中，由于紅細(xì)胞膜對各種溶質(zhì)的通透性不同，膜兩側(cè)的滲透壓平衡會發(fā)生改變，也會發(fā)生溶血現(xiàn)象。水是生物界最普遍的溶劑，水分子可以按照物質(zhì)濃度梯度從滲透壓低的一側(cè)通過細(xì)胞膜向滲透壓高的一側(cè)擴(kuò)散，這種現(xiàn)象就是滲透。二、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞膜在不斷變化的環(huán)境中必須保持自身的穩(wěn)定狀態(tài)才有生存。實(shí)驗(yàn)二細(xì)胞膜的通透性觀一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?二)結(jié)果油鏡下觀察，顆粒狀的線粒體被詹納斯綠B染成藍(lán)綠色。2．加入0．25mol／L蔗糖一0．003mol／L氯化鈣液lml，用吸管吹打成懸液，以17000rpm離心20分鐘，將上清吸入另一試管中，留取沉淀物， 0．25mol／／L氯化鈣溶液混勻成懸液(可用牙簽)。(二)結(jié)果分別于高倍鏡下觀察三張涂片，描述鏡下所見。5．／L氯化鈣溶液懸浮沉淀物，以2500rpm離心15分鐘棄上清，將殘留液體用吸管吹打成懸液，滴一滴于干凈的載玻片上，涂片③，自然干燥。3．剪碎的肝組織倒入勻漿管中，使勻漿器下端浸入盛有冰塊的器皿中，左手持之，右手將勻漿搗桿垂直插入管中，上下轉(zhuǎn)動研磨3～5次，用3層紗布過濾勻漿液于離心管中，然后制備一張涂片①，做好標(biāo)記，自然干燥。三、細(xì)胞核的分離提取(一)操作步驟1．用頸椎脫位的方法處死小白鼠后，迅速剖開腹部取出肝臟，剪成小塊(去除結(jié)締組織)％NaCl的燒杯中，反復(fù)洗滌，盡量除去血污，用濾紙吸去表面的液體。由于樣品中各種大小和密度不同的顆粒在離心開始時均勻分布在整個離心管中，所以每級離心得到的第一次沈淀必然不是純的最重的顆粒，須經(jīng)反復(fù)懸浮和離心加以純化。分級分離(Fractionation)由低速到高速離心逐漸沉降。分離細(xì)胞器最常用的方法是將組織制成勻漿，在均勻的懸浮介質(zhì)中用差速離心法進(jìn)行分離，其過程包括組織細(xì)胞勻漿、分級分離和分析三步，這種方法已成為研究亞細(xì)胞成分的化學(xué)組成、理化特性及其功能的主要手段。第一篇：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)教案1（最終版）細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教案實(shí)驗(yàn)一細(xì)胞核與線粒體的分級分離一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私獠钏匐x心法分離細(xì)胞器的原理，以及練習(xí)使用差速離心法分離哺乳動物的細(xì)胞核與線粒體。二、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞內(nèi)不同結(jié)構(gòu)的比重和大小都不相同，在同一離心場內(nèi)的沉降速度也不相同，根據(jù)這一原理，常用不同轉(zhuǎn)速的離心法，將細(xì)胞內(nèi)各種組分分級分離出來。勻漿(Homogenization)低溫條件下，將組織放在勻漿器中，加入等滲勻漿介質(zhì)(／／L氯化鈣)進(jìn)行破碎細(xì)胞使之成為各種細(xì)胞器及其包含物的勻漿。先用低速使較大的顆粒沉淀，再用較高的轉(zhuǎn)速，將浮在上清液中的顆粒沉淀下來，從而使各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞核、線粒體等得以分離。分析 分級分離得到的組分，可用細(xì)胞化學(xué)和生化方法進(jìn)行形態(tài)和功能鑒定。2．將濕重約1g的肝組織放在小平皿中，／／L氯化鈣溶液，先加少量該溶液于平皿中，盡量剪碎肝組織后，再全部加入。4．將裝有濾液的離心管配平后，放入普通離心機(jī)，以2500rpm，離心15分鐘；(1)緩緩取上清液，移入高速離心管中，保存于有冰塊的燒杯中，待分離線粒體用；(2)同時涂一張上清液片②做好標(biāo)記，自然干燥；(3)余下的沉淀物進(jìn)行下一步驟。6．將①、②、③涂片用l％甲苯胺蘭染色后蓋片即可觀察。四、高速離心分離提取線粒體(一)操作步驟1．將裝有上清液的高速離心管，從裝有冰塊的燒杯中取出，配平后，以17000rpm離心20分鐘，棄上清，留取沉淀物。3．取上清液和沉淀物懸液，分別滴一滴于干凈載玻片上(分別標(biāo)記④、⑤涂片)，％詹納斯綠B染液蓋上蓋片染20分鐘。作業(yè)光鏡或油鏡下觀察制備的細(xì)胞核與線粒體樣本。、脂溶性大小、電解質(zhì)和非電解質(zhì)對細(xì)胞膜通透性的影響