【正文】 雪北國風(fēng)光，千里冰封，萬里雪飄。大家把概念中“穩(wěn)定性差異”勾畫下來，它的意思就是說細(xì)胞的分化一般條件下是持久的、不可逆的。今天我們就來學(xué)習(xí)細(xì)胞的分化。試驗(yàn)重點(diǎn)難點(diǎn)解決：通過示范和講解予以解決實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容：（1）藥敏實(shí)驗(yàn)的操作過程；（2）繪圖顯示出藥物敏感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并以文字說明；（3）對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行解釋。（3）徐徐吹入沙利氏比色管內(nèi)，不要產(chǎn)生氣泡，再反復(fù)吸、吹數(shù)次，以洗出沙利氏吸血管中的血液。（3）用血沉管吸取抗凝血至刻度0外，用棉花擦去管外血液，直立于血沉架上。在前期結(jié)束時(shí)，核仁核膜消失。試說明細(xì)胞融合的關(guān)鍵。PEG誘導(dǎo)細(xì)胞融合 吸取100μl 37℃的50%PEG溶液，慢慢沿著離心管壁逐滴加入，邊加邊輕搖離心管，使PEG與細(xì)胞混勻，然后在37℃水浴中靜置2min。③加入50ml預(yù)熱至50℃的GKN液，混勻，置37℃?zhèn)溆?。?xì)胞融合技術(shù)是研究細(xì)胞遺傳、基因定位、細(xì)胞免疫、病毒和腫瘤的重要手段。分裂時(shí)草履蟲大核向胞體兩端伸長，進(jìn)而在核的中部向內(nèi)凹陷，呈啞鈴形。：取10支試管，分別加入3ml不同的等滲溶液，做好標(biāo)記后，輕輕振蕩，仔細(xì)觀察是否發(fā)生溶血并記錄發(fā)生溶血的時(shí)間。作業(yè)光鏡或油鏡下觀察制備的細(xì)胞核與線粒體樣本。勻漿(Homogenization)低溫條件下，將組織放在勻漿器中，加入等滲勻漿介質(zhì)(／／L氯化鈣)進(jìn)行破碎細(xì)胞使之成為各種細(xì)胞器及其包含物的勻漿。5．／L氯化鈣溶液懸浮沉淀物，以2500rpm離心15分鐘棄上清，將殘留液體用吸管吹打成懸液，滴一滴于干凈的載玻片上，涂片③，自然干燥。由于溶質(zhì)透入速度不同，溶血時(shí)間也不同。，比較植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂過程的不同點(diǎn)。間期：間期細(xì)胞較小，可清晰看到染色均勻的細(xì)胞核，核內(nèi)有一個(gè)染色較深的圓形小體為核仁。材料：成年家雞。雞血細(xì)胞儲(chǔ)存液的制備在抗凝全血的試管中，%NaCl溶液，制成紅細(xì)胞儲(chǔ)備液，置于4℃冰箱內(nèi)可供一周內(nèi)使用。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，用Alsver液保存的紅細(xì)胞時(shí)間較短，而改用生理鹽水則明顯延長紅細(xì)胞的保存時(shí)間且不影響細(xì)胞融合率。然后在酒精燈上緩慢往復(fù)3～4次，微微加熱（不可煮沸），隨即用解剖針將材料撥碎，蓋上蓋玻片，覆以吸水紙，對準(zhǔn)蓋玻片下的材料，用鉛筆的橡皮頭在蓋玻片上輕輕敲擊，再用拇指適當(dāng)用力下壓，但注意勿使蓋片滑動(dòng)。四、作業(yè)繪出你所觀察到的植物細(xì)胞有絲分裂各期的圖象。計(jì)數(shù)時(shí)注意壓在左邊雙線上的紅細(xì)胞計(jì)在內(nèi)，壓在右邊雙線上的紅細(xì)胞則不計(jì)數(shù)在內(nèi)；同樣，壓在上線的計(jì)入，壓在下線的不計(jì)入，此所謂“數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下”的計(jì)數(shù)法則（3）白細(xì)胞計(jì)數(shù)，用計(jì)數(shù)板對牛的白細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)1．原理用稀釋液將紅細(xì)胞破壞后，計(jì)算出每微升血中白細(xì)胞數(shù)。將菌液用曲波棒均勻地涂布到培養(yǎng)基上，之后于37℃烘干培養(yǎng)基表面的水分。：細(xì)胞膜：保護(hù)，控制物質(zhì)的進(jìn)出細(xì)胞質(zhì)：生命活動(dòng)的場所細(xì)胞核：遺傳物質(zhì)細(xì)胞壁：保護(hù)，支持葉綠體：光合作用的場所（葉綠素）液泡：細(xì)胞液（在介紹細(xì)胞壁的支持功能時(shí)，可以用一個(gè)薄的塑料袋裝一些水，表示細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)，不能有一定的形狀。）師：舉個(gè)例子，大家看到書上圖68，紅細(xì)胞和心肌細(xì)胞的圖，它們的形態(tài)不同，功能上，紅細(xì)胞可以合成血紅蛋白運(yùn)輸氧氣，心肌細(xì)胞可以合成肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白，維持心臟的正常代謝。（五）動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到了抑制，科學(xué)家還沒能利用已分化的動(dòng)物細(xì)胞來合成一個(gè)完整的生物個(gè)體。俱往矣，數(shù)風(fēng)流人物，還看今朝。）對。這些細(xì)胞構(gòu)成成了不同的組織和器官，具有不同的功能，維持著正常生命活動(dòng)的進(jìn)行?？梢詮募?xì)胞生命活動(dòng)需要什么，會(huì)產(chǎn)生什么著手，并回憶海水淡化中的淡化膜的作用，學(xué)生很容易理解細(xì)胞膜的功能）【活動(dòng)】觀察鵪鶉蛋的結(jié)構(gòu) 出示鴨蛋和鵪鶉蛋，學(xué)生先議論蛋的結(jié)構(gòu)，在大家都錯(cuò)了的情況下，更有興趣聽老師的介紹。實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)和難點(diǎn)：藥物敏感實(shí)驗(yàn)前所用細(xì)菌濃度測定主要參考資料： 《獸醫(yī)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》，林艷春主編，校內(nèi)教材，2003 《獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》，胡桂學(xué)主編，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2006實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：（1）無菌操作制作營養(yǎng)培養(yǎng)基；藥敏試驗(yàn)最好用專用MuellerHinton 培養(yǎng)基。計(jì)數(shù)時(shí)，先用低倍鏡，光線要稍暗些，找到計(jì)數(shù)室的格后，把中央的大方格置于視野之中，然后轉(zhuǎn)用高倍鏡。在兩新核之間赤道面上，出現(xiàn)細(xì)胞板，并逐漸形成細(xì)胞壁，最后分成兩個(gè)子細(xì)胞。（4）解離將固定后的根尖用清水漂洗數(shù)次，用1摩爾/升鹽酸在60℃恒溫箱內(nèi)處理6～20分鐘后，清水漂洗。計(jì)算細(xì)胞融合率細(xì)胞融合率是指在顯微鏡的視野內(nèi)，已發(fā)生融合的細(xì)胞其細(xì)胞核總數(shù)與視野內(nèi)所有細(xì)胞（包括已融合細(xì)胞）的細(xì)胞核總數(shù)之比，通常以百分比表示，而且要進(jìn)行多個(gè)視野測定；進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。6）詹納斯綠染液。融合的頻率和活力與所用PEG的相對分子質(zhì)量、濃度、作用時(shí)間、細(xì)胞的生理狀態(tài)與密度等有關(guān)。選擇生長區(qū)的細(xì)胞觀察，可見這一部位的細(xì)胞染色較深，緊密排列成一行行的四方形。實(shí)驗(yàn)三 細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與幾種細(xì)胞器的觀察一,實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谄胀ü鈱W(xué)顯微鏡下識(shí)別細(xì)胞和細(xì)胞器的形態(tài)結(jié)構(gòu),實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞在形態(tài)上是多種多樣的,有球形,橢圓形,扁平形,立方形,梭形,但是它們卻有共同的基本結(jié)構(gòu)特點(diǎn),都由細(xì)胞膜(動(dòng)物),細(xì)胞壁(植物),如線粒體,高爾基體,中心體,核仁,染色體等,一般經(jīng)過一定固定染色處理后,實(shí)驗(yàn)材料洋蔥根尖切片 小白鼠肝切片 兔神經(jīng)節(jié)切片 馬蛔蟲受精卵切片 四,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(1)洋蔥根尖切片細(xì)胞的觀察先用低倍鏡觀察根尖的縱切面,注意分生區(qū),伸長區(qū),成熟區(qū)細(xì)胞的異同,然后再仔細(xì)觀察細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),特別要注意細(xì)胞的形狀,大小,以及細(xì)胞壁,細(xì)胞核,核仁,細(xì)胞質(zhì),液泡的形態(tài)結(jié)構(gòu).(2)兔神經(jīng)節(jié)細(xì)胞切片高爾基體的觀察先在低倍鏡下找到兔神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,然后轉(zhuǎn)用高倍鏡觀察,可看到細(xì)胞內(nèi)淡黃色的背景上有黃褐色或者透明的細(xì)胞核,核的周圍分布著許多深褐色的(硝酸銀鍍?nèi)?高爾基體,呈彎曲的線狀,顆粒狀,少量分散在細(xì)胞質(zhì).(3)小白鼠肝細(xì)胞切片線粒體的觀察先用低倍鏡后用高倍鏡觀察,可見到許多肝小葉,每小葉有許多緊密排列成索狀的多角形的