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正文內(nèi)容

細(xì)胞實驗教案1最終版-文庫吧資料

2024-11-16 00:21本頁面
  

【正文】 min,分別記錄紅細(xì)胞沉降的刻度數(shù),用分?jǐn)?shù)形式表示(分母代表時間,分子代表沉降mm數(shù))。(2)自頸靜脈采血,沿管壁加入上述試管,輕輕混合。2.操作方法魏(Westergren)氏法:魏氏血沉管長30cm,管壁有200個刻度,附有特制的血沉架。本實驗為驗證性實驗。四、作業(yè)繪出你所觀察到的植物細(xì)胞有絲分裂各期的圖象。在兩新核之間赤道面上,出現(xiàn)細(xì)胞板,并逐漸形成細(xì)胞壁,最后分成兩個子細(xì)胞。全部染色體分為兩組,分別向細(xì)胞的兩極移動。此時染色體變短變粗,其形態(tài)和數(shù)目都較清楚。(3)中期紡錘體形成。染色體形態(tài)逐漸清楚,著絲點逐漸明顯。核仁核膜較清楚,核內(nèi)染色質(zhì)呈細(xì)網(wǎng)狀。 先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū),再轉(zhuǎn)高倍鏡,選擇較典型的有絲分裂各期圖象,仔細(xì)觀察。然后在酒精燈上緩慢往復(fù)3~4次,微微加熱(不可煮沸),隨即用解剖針將材料撥碎,蓋上蓋玻片,覆以吸水紙,對準(zhǔn)蓋玻片下的材料,用鉛筆的橡皮頭在蓋玻片上輕輕敲擊,再用拇指適當(dāng)用力下壓,但注意勿使蓋片滑動。(4)解離將固定后的根尖用清水漂洗數(shù)次,用1摩爾/升鹽酸在60℃恒溫箱內(nèi)處理6~20分鐘后,清水漂洗。如固定的材料當(dāng)時不用,可以先在90%酒精中泡半小時,然后在70%酒精泡半個小時,再換入70%酒精中,置0~4℃冰箱內(nèi)可保存半年。(2)前處理將材料浸入蒸餾水內(nèi),放置冰箱(0~4℃)中24小時。第二篇:《實驗四 細(xì)胞的有絲分裂》教案《實驗四 細(xì)胞的有絲分裂》教案一、實驗?zāi)康?,掌握有絲分裂各期的主要特征二、材料與用品洋蔥頭、洋蔥根尖縱切片標(biāo)本、蛙胚細(xì)胞有絲分裂切片標(biāo)本;普通光學(xué)顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、恒溫培養(yǎng)箱、小刀、小試劑瓶、培養(yǎng)皿、酒精燈、火柴、FAA固定液、1摩爾/升鹽酸或濃鹽酸、醋酸洋紅染液、蒸餾水三、實驗過程(1)取材將洋蔥頭置于盛水的小燒杯上,使其鱗莖浸入水中,放在25℃恒溫箱中培養(yǎng)?!咀饔谩慨嫵鲇^察到的融合細(xì)胞,并計算融合率。PEG和二甲基亞砜(DMSO)并用,可以提高細(xì)胞的融合率。有些抗凝劑中含有和Ca2+結(jié)合的化合物,比如Alsver液中檸檬酸鈉的酸根與血液中的Ca2+形成難解離的可溶性絡(luò)合物,導(dǎo)致血液中的Ca2+濃度降低,故起抗凝血作用,同時會造成細(xì)胞的融合率較低。實驗證實,用Alsver液保存的紅細(xì)胞時間較短,而改用生理鹽水則明顯延長紅細(xì)胞的保存時間且不影響細(xì)胞融合率。計算細(xì)胞融合率細(xì)胞融合率是指在顯微鏡的視野內(nèi),已發(fā)生融合的細(xì)胞其細(xì)胞核總數(shù)與視野內(nèi)所有細(xì)胞(包括已融合細(xì)胞)的細(xì)胞核總數(shù)之比,通常以百分比表示,而且要進(jìn)行多個視野測定;進(jìn)行統(tǒng)計分析。將晾干的玻片放在潔凈的玻板上,用Giemsa染液[Giemsa原液用10倍體積的1/15mol/L磷酸緩沖液()稀釋]染色30min,自來水沖洗,空氣干燥。棄去上清液,加Hanks液,再離心一次,棄多數(shù)上清,留少許溶液,混勻。終止PEG作用緩慢加入1mlHanks液,輕輕吹打混勻,于37℃水浴中靜置5min。棄去上清液,用手指輕彈離心管底部,使沉淀的血細(xì)胞團(tuán)塊松散。若細(xì)胞濃度過大,用GKN溶液稀釋至177107個/ml 左右。最后,棄去上清液,加入2000μl的GKN溶液制成雞血細(xì)胞懸液。雞血細(xì)胞儲存液的制備在抗凝全血的試管中,%NaCl溶液,制成紅細(xì)胞儲備液,置于4℃冰箱內(nèi)可供一周內(nèi)使用。6)詹納斯綠染液。必須在前一藥品完全溶解后,方可加入下一藥品,直到葡萄糖完全溶解后,再將已溶解的CaCl2溶液加入,最后加水至1000ml。7H2O 葡萄糖 CaCl2 ,溶于30~50ml的重蒸水中。4)Hanks原液(10):NaCl Na2HPO4②讓PEG冷卻至50~60℃,勿讓其凝固。H2O, 葡萄糖, 酚紅,溶于1000ml重蒸水中。2)GKN液: NaCl, KCl, Na2HPO4材料:成年家雞。融合的頻率和活力與所用PEG的相對分子質(zhì)量、濃度、作用時間、細(xì)胞的生理狀態(tài)與密度等有關(guān)。PEG可改變各類細(xì)胞的膜結(jié)構(gòu),是兩細(xì)胞接觸點處脂類分子發(fā)生疏散和重組,引發(fā)細(xì)胞融合。③電場誘導(dǎo)的細(xì)胞融合;④激光誘導(dǎo)的細(xì)胞融合。依據(jù)融合過程采用的助融劑不同,細(xì)胞融合可分為:①病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞融合,如仙臺病毒(hemagglutinating virus of Japan,HVJ)?!緦嶒炘怼?細(xì)胞融合(cell fusion)又稱體細(xì)胞雜交,是指用人工方法使兩個或兩個以上的體細(xì)胞融合成異核體細(xì)胞,隨后,異核體同步進(jìn)入有絲分裂,核膜崩潰,來自兩個親本細(xì)胞的基因組合在一起形成只含有一個細(xì)胞核的雜種細(xì)胞(hybrid cell)。實驗 雞血細(xì)胞的體外融合 【實驗?zāi)康摹苛私庖叶迹≒EG)誘導(dǎo)體外細(xì)胞融合的基本原理。隨著染色體不斷螺旋縮短變粗,可見每條線狀的染色體是由兩條姐妹染色單體組成。間期:間期細(xì)胞較小,可清晰看到染色均勻的細(xì)胞核,核內(nèi)有一個染色較深的圓形小體為核仁。選擇生長區(qū)的細(xì)胞觀察,可見這一部位的細(xì)胞染色較深,緊密排列成一行行的四方形。:在蓋玻片上面覆蓋一張吸水紙,用拇指垂直壓下,再用鉛筆橡皮頭輕輕敲打,使細(xì)胞壓成均勻的薄層(敲打時,勿使蓋玻片移動)。(此項實驗前準(zhǔn)備):取出根尖放在載玻片上,滴加1mol/L HCl(60℃)于根尖上,水解8 min,蒸餾水水洗3次(將酒精洗去,以利于染色)。然后斷開形成兩個細(xì)胞核,同時胞體也隨之延伸,中部出現(xiàn)分裂溝,最后完全分裂成兩個子細(xì)胞。在無性生殖時,可在顯微鏡下看到草履蟲胞體被染成粉紅色,細(xì)胞核染成紫紅色。蒸餾水、改良苯酚品紅染液。:每組配備:眼科鑷和眼科剪各2把,皮頭吸管1支,5ml燒杯2個,載玻片(每人一片),蓋玻片,擦鏡紙,吸水紙,擦鏡液。,比較植物細(xì)胞和動物細(xì)胞有絲分裂過程的不同點。實驗三 細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與幾種細(xì)胞器的觀察一,實驗?zāi)康脑谄胀ü鈱W(xué)顯微鏡下識別細(xì)胞和細(xì)胞器的形態(tài)結(jié)構(gòu),實驗原理細(xì)胞在形態(tài)上是多種多樣的,有球形,橢圓形,扁平形,立方形,梭形,但是它們卻有共同的基本結(jié)構(gòu)特點,都由細(xì)胞膜(動物),細(xì)胞壁(植物),如線粒體,高爾
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