蛋白質(zhì)化學(xué)最終版ppt課件(參考版)
2025-05-15 13:55本頁面
【正文】 第一次作業(yè)： ?氨基酸通式 ?氨基酸兩性解離定義 ?蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)定義 ?蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)類型 ?分子病 ?構(gòu)象病 ?蛋白質(zhì)的變性定義 第二次作業(yè)： 。 （三）蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定技術(shù) * 二級結(jié)構(gòu)測定 通常采用 圓二色光譜 （ CD)測定溶液狀態(tài)下的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)含量 。這種生物大分子和配基之間形成專一的可解離的絡(luò)合物的能力稱為親和力。 視頻 等電聚焦 雙向電泳， 2DE 2. 離子交換層析： *親和層析法： ? 生物體內(nèi)有許多高分子化合物，具有和某些對應(yīng)的專一分子可逆結(jié)合的特性。 *等電聚焦電泳 ，通過蛋白質(zhì)等電點的差異而分離蛋白質(zhì)的電泳方法。 這種通過蛋白質(zhì)在電場中泳動而達(dá)到分離各種蛋白質(zhì)的技術(shù) , 稱為 電泳 。 （一）根據(jù)溶解度不同的分離純化方法 視頻：血紅蛋白的提取 是將硫酸銨 、硫 酸 鈉 或 氯化 鈉 等 加 入蛋白質(zhì)溶液 ，使 蛋 白 質(zhì) 表面 電 荷 被 中和 以 及 水 化膜被破壞 ，導(dǎo) 致 蛋 白 質(zhì)沉淀 。 六、蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng) （一）茚三酮反應(yīng)：氨基 （二）雙縮脲反應(yīng)：肽鍵 （三）酚試劑反應(yīng) P93 圖 411 七、蛋白質(zhì)的免疫學(xué)性質(zhì) ?，抗原性 ? ? 單克隆抗體 ? 多克隆抗體 ? ? 免疫預(yù)防：疫苗 ? 免疫、診斷治療 骨髓瘤細(xì)胞 致敏的 B淋巴細(xì)胞 雜交瘤 一、蛋白質(zhì)的提取 第六節(jié) 蛋白質(zhì)的分離和純化基本原理 二、蛋白質(zhì)的分離純化 等電點沉淀： 蛋白質(zhì)在等電點時溶解度最小。 五 、 蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng) 3. 加熱沉淀反應(yīng) 4. 重金屬鹽沉淀法 蛋白質(zhì)在溶液 PH稍大于其等電點時 ， 蛋白質(zhì)解離成負(fù)離子 ， 易與重金屬離子結(jié)合 ，生成不溶性的蛋白質(zhì)鹽沉淀 。 * 蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定的因素 顆粒表面電荷 水化層 + + + + + + + 帶正電荷的蛋白質(zhì) － － － － － － － － 帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì) 水化膜 水化膜 2. 低溫 有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)： 0～ 4℃ 低溫操作 ，丙酮用量一般 10倍于蛋白質(zhì)溶液體積 ， 沉淀后 ， 應(yīng)立即分離 ， 以防蛋白質(zhì)會變性 ， 也可用乙醇沉淀 。 P91表 410 蛋白質(zhì)在其等電點時溶解度最低 。 ? 酒精、紫外線消毒； ? 高溫滅； ? 除去雜蛋白； ? 避免活性成分變性。 ?生物活性的喪失 ?理化性質(zhì)的改變 如：黏度增加，失去結(jié)晶能力，易被蛋白酶水解等。 PrPc α螺旋 PrPsc β折疊 正常 瘋牛病 不同生物與人的 Cytc的 AA差異數(shù)目 生物 AA差異數(shù)目 黑猩猩 0 恒河猴 1 兔 9 牛、豬、羊、狗 10 響尾蛇 14 海龜 15 金槍魚 21 蛾 31 小麥 35 酵母 44 三、蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)與生物進(jìn)化 第五節(jié) 蛋白質(zhì)的性質(zhì) 一 、蛋白質(zhì)分子的大小、形狀及分子量測定 分子篩層析 P87 表 49 SDSPAGE SDS十二烷基硫酸鈉 （ MS）測定蛋白質(zhì)分子量大小 二、蛋白質(zhì)的變性 在某些物理和化學(xué)因素作用下，其特定的空間構(gòu)象發(fā)生改變或破壞，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變和生物活性的喪失。 2. 蛋白質(zhì)的變構(gòu)現(xiàn)象 因蛋白質(zhì)折疊錯誤或折疊導(dǎo)致構(gòu)象異常變化引起的疾病，稱為蛋白質(zhì)構(gòu)象病。C(146) 4. 一級結(jié)構(gòu)的變化與疾病的關(guān)系 這種由遺傳物質(zhì) DNA突變引起的、在分子水平上僅存在微觀差異而導(dǎo)致的疾病，稱為 “ 分子病 ” 。 val
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