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緒論和蛋白質(zhì)化學(xué)ppt課件(參考版)

2025-01-18 08:34本頁面
  

【正文】 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)與其功能有何關(guān)系? 維持蛋白質(zhì)親水膠體溶液穩(wěn)定的條件有哪些? 什么是蛋白質(zhì)變性?在醫(yī)學(xué)上有何應(yīng)用? 課后思考題 ??捎脕磉M(jìn)行蛋白質(zhì)定量分析。 變性的蛋白質(zhì)不一定沉淀,沉淀的蛋白質(zhì)不一定變性,凝固的蛋白質(zhì)一定變性 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 應(yīng)用 ①利用變性: ?酒精消毒 ?高壓滅菌 ?血濾液制備 ②防止變性:低溫保存生物制品 ③取代變性:乳品解毒(用于急救重金屬中毒) 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 思考題 ?高溫、高壓、紫外線和乙醇等滅菌消毒的生化原理是什么? ?熟肉比生肉易消化的生化原理是什么? 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 四、紫外吸收性質(zhì) ?酪氨酸和色氨酸在 280nm波長(zhǎng)附近具有最大吸收峰,其中色氨酸的最大吸收最接近 280nm 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 五、蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng) 蛋白質(zhì)和多肽分子中 肽鍵 在稀堿溶液中與硫酸銅共熱,呈現(xiàn) 紫色或紅色 ,此反應(yīng)稱為 雙縮脲反應(yīng) ,雙縮脲反應(yīng)可用來檢測(cè)蛋白質(zhì)水解程度。 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 復(fù)性 :若蛋白質(zhì)變性程度較輕,去除變性因素后,仍可恢復(fù)其原有的構(gòu)象和功能,這種現(xiàn)象稱為復(fù)性 (renaturation) 。 ?理化性質(zhì)的變化:溶解度下降,粘度增加,結(jié)晶能力喪失,易被蛋白酶水解。 ? 例 3—— 超速離心 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 變性 (denaturation) : 在某些理化因素作用下,蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)被破壞,導(dǎo)致理化性質(zhì)改變和生物活性喪失的現(xiàn)象。 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 【 應(yīng)用舉例 】 ? 例 2—— 營(yíng)養(yǎng)不良性水腫 人體毛細(xì)血管壁也具有半透膜特性,形成 膠體滲透壓 ,對(duì)維持血容量具有十分重要的意義。利用半透膜特性分離小分子物質(zhì),純化蛋白質(zhì)的方法稱為 透析 。 A + 清蛋白 ?1 ?2 ? ? 清蛋白 ?1 ?2 ? ? B 血 清 蛋 白 電 泳 圖 A: 染色后的圖譜 B: 光密度掃描后的電泳峰 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 ? 電泳技術(shù)是生化檢驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)研究常用 技術(shù),如利用該技術(shù)可作 血清蛋白電泳 、 尿 蛋白 電泳 及 同工酶的鑒定 ,以幫助 診斷疾病??山璐藢?duì)pr進(jìn)行分離、純化和鑒定。 PrPc α螺旋 PrPsc β折疊 正常 瘋牛病 ? 瘋牛病的蛋白質(zhì)構(gòu)象改變 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 第三節(jié) 蛋白質(zhì)的理化性質(zhì) ?兩性解離和等電點(diǎn) ?膠體性質(zhì) ?變性、沉淀和凝固 ?紫外吸收性質(zhì) ?呈色反應(yīng) 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 一、 【 概念 】 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 Pr COOH NH3+ Pr COO NH3+ Pr COO NH2 +OH +H+ +OH +H+ pH=pI pHpI pHpI Pr COOH NH2 pI是 蛋白質(zhì) 特征性常數(shù) 各種 蛋白質(zhì) 有各自的 pI 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 ?血漿中絕大部分蛋白質(zhì)的 pI在 pH5左右,故在血漿,血漿蛋白質(zhì)呈負(fù)電。 正常的 PrP富含 α螺旋,稱為 PrPc。 瘋牛病是對(duì)牛海綿狀腦病 (BSE)的俗稱 ,它是一種慢性、具有傳染性的致死性 中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病 。 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 瘋牛病知識(shí) 1985年 在 英國 發(fā)現(xiàn)后, 90年代初發(fā) 展成為一個(gè)高潮,又逐漸擴(kuò)展到西歐 目前已經(jīng)變成世界性問題。 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 蛋白質(zhì)構(gòu)象改變導(dǎo)致疾病的機(jī)理 :有些蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊后相互聚集,常形成抗蛋白水解酶的淀粉樣纖維沉淀,產(chǎn)生毒性而致病,表現(xiàn)為蛋白質(zhì)淀粉樣纖維沉淀的病理改變。 【 經(jīng)典舉例 】 鐮形細(xì)胞貧血癥:編碼珠蛋白 β鏈的結(jié)構(gòu)基因第六個(gè)密碼子由 CTT→CAT ,相應(yīng)的多肽序列中 N端的第六個(gè)氨基酸由 Glu→Val ;其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生相應(yīng)改變,在表面形成互補(bǔ)區(qū),使蛋白質(zhì)分子之間彼此聚合,促使紅細(xì)胞在低氧壓下變形成鐮形,喪失運(yùn)輸氧的生物活性。C(146) 這種由蛋白質(zhì)分子發(fā)生變異所導(dǎo)致的疾病,稱為“分子病”。 val thr his glu pro leu ?多種空間構(gòu)象,多種活性狀態(tài) 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 Hb未結(jié)合 O2時(shí), 4個(gè)亞基結(jié)構(gòu)緊密 ,稱 緊密型 (T型 ) 隨著 O2 的結(jié)合 ,空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,使 結(jié)構(gòu)相對(duì)松弛,稱 松弛型 (R型 ) T型 對(duì)氧親和力低 , 不易與 O2 結(jié)合 R型 對(duì)氧親合力高,是 Hb結(jié)合 O2 的形式 [肺部 ] O2 分壓 高 , 促使 T型 轉(zhuǎn)變成 R型 [組織 ] O2 分壓 低 , 促使 R型 轉(zhuǎn)變成 T型 Hb的這種 變構(gòu)效應(yīng) 有利于它在肺部與 O2結(jié)合、在周圍組織釋放 O2 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 補(bǔ)充 —— 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變與疾病 ?結(jié)構(gòu)決定功能 ?功能改變產(chǎn)生疾病 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 (一)蛋白質(zhì)的氨基酸序列改變可引起疾病 ?例:鐮刀形紅細(xì)胞貧血 Nval 韶關(guān)學(xué)院醫(yī)學(xué)院生化檢驗(yàn)教研室 劉毅 2022年 10月 氨基酸序列提供重要的生物化學(xué)信息 一些廣泛存在于生物界的蛋白質(zhì)如細(xì)胞色素 (cytoch
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