【正文】 蛋白質一級結構與其功能有何關系？ 維持蛋白質親水膠體溶液穩(wěn)定的條件有哪些？ 什么是蛋白質變性？在醫(yī)學上有何應用？ 課后思考題 。可用來進行蛋白質定量分析。 變性的蛋白質不一定沉淀，沉淀的蛋白質不一定變性，凝固的蛋白質一定變性 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 應用 ①利用變性： ?酒精消毒 ?高壓滅菌 ?血濾液制備 ②防止變性：低溫保存生物制品 ③取代變性：乳品解毒（用于急救重金屬中毒） 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 思考題 ?高溫、高壓、紫外線和乙醇等滅菌消毒的生化原理是什么？ ?熟肉比生肉易消化的生化原理是什么？ 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 四、紫外吸收性質 ?酪氨酸和色氨酸在 280nm波長附近具有最大吸收峰，其中色氨酸的最大吸收最接近 280nm 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 五、蛋白質的呈色反應 蛋白質和多肽分子中 肽鍵 在稀堿溶液中與硫酸銅共熱，呈現(xiàn) 紫色或紅色 ，此反應稱為 雙縮脲反應 ，雙縮脲反應可用來檢測蛋白質水解程度。 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 復性 ：若蛋白質變性程度較輕，去除變性因素后，仍可恢復其原有的構象和功能，這種現(xiàn)象稱為復性 (renaturation) 。 ?理化性質的變化：溶解度下降，粘度增加，結晶能力喪失，易被蛋白酶水解。 ? 例 3—— 超速離心 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 變性 (denaturation) ： 在某些理化因素作用下，蛋白質的空間結構被破壞，導致理化性質改變和生物活性喪失的現(xiàn)象。 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 【 應用舉例 】 ? 例 2—— 營養(yǎng)不良性水腫 人體毛細血管壁也具有半透膜特性，形成 膠體滲透壓 ，對維持血容量具有十分重要的意義。利用半透膜特性分離小分子物質，純化蛋白質的方法稱為 透析 。 Ａ + 清蛋白 ?1 ?2 ? ? 清蛋白 ?1 ?2 ? ? B 血 清 蛋 白 電 泳 圖 A: 染色后的圖譜 B: 光密度掃描后的電泳峰 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 ? 電泳技術是生化檢驗和實驗研究常用 技術，如利用該技術可作 血清蛋白電泳 、 尿 蛋白 電泳 及 同工酶的鑒定 ，以幫助 診斷疾病?？山璐藢r進行分離、純化和鑒定。 PrPc α螺旋 PrPsc β折疊 正常 瘋牛病 ? 瘋牛病的蛋白質構象改變 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 第三節(jié) 蛋白質的理化性質 ?兩性解離和等電點 ?膠體性質 ?變性、沉淀和凝固 ?紫外吸收性質 ?呈色反應 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 一、 【 概念 】 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 Pr COOH NH3+ Pr COO NH3+ Pr COO NH2 +OH +H+ +OH +H+ pH=pI pHpI pHpI Pr COOH NH2 pI是 蛋白質 特征性常數(shù) 各種 蛋白質 有各自的 pI 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 ?血漿中絕大部分蛋白質的 pI在 pH5左右，故在血漿，血漿蛋白質呈負電。 正常的 PrP富含 α螺旋，稱為 PrPc。 瘋牛病是對牛海綿狀腦病 (BSE)的俗稱 ，它是一種慢性、具有傳染性的致死性 中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病 。 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 瘋牛病知識 1985年 在 英國 發(fā)現(xiàn)后， 90年代初發(fā) 展成為一個高潮，又逐漸擴展到西歐 目前已經(jīng)變成世界性問題。 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 蛋白質構象改變導致疾病的機理 ：有些蛋白質錯誤折疊后相互聚集，常形成抗蛋白水解酶的淀粉樣纖維沉淀，產(chǎn)生毒性而致病，表現(xiàn)為蛋白質淀粉樣纖維沉淀的病理改變。 【 經(jīng)典舉例 】 鐮形細胞貧血癥：編碼珠蛋白 β鏈的結構基因第六個密碼子由 CTT→CAT ，相應的多肽序列中 N端的第六個氨基酸由 Glu→Val ；其空間結構發(fā)生相應改變，在表面形成互補區(qū)，使蛋白質分子之間彼此聚合，促使紅細胞在低氧壓下變形成鐮形，喪失運輸氧的生物活性。C(146) 這種由蛋白質分子發(fā)生變異所導致的疾病，稱為“分子病”。 val thr his glu pro leu ?多種空間構象，多種活性狀態(tài) 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 Hb未結合 O2時， 4個亞基結構緊密 ,稱 緊密型 (T型 ) 隨著 O2 的結合 ,空間結構發(fā)生變化，使 結構相對松弛，稱 松弛型 (R型 ) T型 對氧親和力低 , 不易與 O2 結合 R型 對氧親合力高，是 Hb結合 O2 的形式 [肺部 ] O2 分壓 高 , 促使 T型 轉變成 R型 [組織 ] O2 分壓 低 , 促使 R型 轉變成 T型 Hb的這種 變構效應 有利于它在肺部與 O2結合、在周圍組織釋放 O2 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 補充 —— 蛋白質結構改變與疾病 ?結構決定功能 ?功能改變產(chǎn)生疾病 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 （一）蛋白質的氨基酸序列改變可引起疾病 ?例：鐮刀形紅細胞貧血 Nval 韶關學院醫(yī)學院生化檢驗教研室 劉毅 2022年 10月 氨基酸序列提供重要的生物化學信息 一些廣泛存在于生物界的蛋白質如細胞色素 (cytoch