【正文】 稱取1g（g）試樣于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入40mL水，超聲提取15min，8000r/min離心5min，上清液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，用5mL水洗滌殘?jiān)礈煲翰⑷胪蝗萘科?，加?mL三氯乙酸溶液（），用水定容至50mL，待凈化。g（g）試樣于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入10mL%甲醇溶液（），渦旋30s，超聲提取30min，8000r/min離心5min。取上清液1mL于5mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，過PTFE微孔濾膜，待測(cè)?？筛鶕?jù)實(shí)際濃度用水適當(dāng)稀釋至線性范圍內(nèi)，供液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀分析。稱取1g（g）試樣于小燒杯中，加入40mL水，80℃水浴至樣品溶解（膠基糖果水浴15min，水浴過程中注意搖散），轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，用5mL水洗滌燒杯，洗滌液并入同一容量瓶，加入5mL三氯乙酸溶液（），用水定容至50mL，待凈化。若提取液渾濁，可取適量8000r/min離心5min，上清液待凈化。固體飲料稱取1g（g）試樣于50mL離心管中，加入25mL水，80℃水浴10min，8000r/min離心5min，收集提取液，加入20mL水洗滌殘?jiān)瑴u旋30s，8000r/min離心5min，合并兩次提取液，于提取液中加入5mL三氯乙酸溶液（），用水定容至50mL。若提取液渾濁，可取適量8000r/min離心5min，上清液待凈化。液體飲料稱取1g（g）試樣于25mL具塞比色管中，加入20mL水，80℃水浴10min，（），用水定容至25mL。若提取液渾濁，可取適量8000r/min離心5min，上清液待凈化。片劑、硬膠囊劑同“”。試樣凈化、液體飲料取10mL待凈化液至已活化的聚酰胺固相萃取柱（）內(nèi)，待溶液流盡后，依次用10mL水、15mL%甲醇溶液（）洗滌，20mL無(wú)水乙醇氨水水溶液（）洗脫，收集洗脫液于80℃水浴上蒸發(fā)至近干，用水定容至10mL，μmPES或PTFE濾膜，待測(cè)?？筛鶕?jù)實(shí)際濃度用水適當(dāng)稀釋至線性范圍內(nèi)，供液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀分析。、其他糖果、固體飲料凈化操作同“、蜜餞、液體飲料”，洗脫液于80℃水浴上蒸發(fā)至近干，用水定容至5mL，μmPES或PTFE濾膜，待測(cè)?？筛鶕?jù)實(shí)際濃度用水適當(dāng)稀釋至線性范圍內(nèi)，供液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀分析?？瞻自嚇臃Q取空白試樣適量，與試樣同法處理，制得空白基質(zhì)溶液。儀器參考條件色譜條件：C18柱，mm100mm，μm，或同等性能的色譜柱。流動(dòng)相：10mmol/L乙酸銨溶液+乙腈（85+15）流速：mL/min柱溫：35℃：5μL：電噴霧離子源（ESI）。掃描方式：正離子掃描。：多反應(yīng)模式（MRM）。、霧化氣、鞘氣、碰撞氣等均為高純氮?dú)饣蚱渌线m氣體，使用前應(yīng)調(diào)節(jié)相應(yīng)參數(shù)使質(zhì)譜靈敏度達(dá)到檢測(cè)要求，噴霧電壓、離子源溫度、干燥氣溫度、鞘氣溫度、鞘氣流量等參數(shù)應(yīng)優(yōu)化至最佳靈敏度。表1匹可硫酸鈉定性、定量離子和質(zhì)譜分析參數(shù)參考值名稱母離子子離子去簇電壓（V）碰撞能（V）匹可硫酸鈉*120120*定量離子對(duì)試樣測(cè)定將標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液和試樣溶液分別注入高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀中測(cè)定。根據(jù)保留時(shí)間和相對(duì)離子對(duì)豐度比定性，外標(biāo)峰面積定量。表2定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差相對(duì)離子豐度（%）5020—5010—20≤10允許的相對(duì)偏差（%）177。20177。25177。30177。50空白試驗(yàn)除不加試樣外，均按試樣同法處理。結(jié)果計(jì)算試樣中匹可硫酸鈉的含量按下式計(jì)算：式中：X—食品中匹可硫酸鈉（以C18H13NNa2O8S2?H2O計(jì)）的含量，mg/kg；c—試品溶液中匹可硫酸鈉（以C18H13NNa2O8S2?H2O計(jì)）的濃度，ng/mL；V—試品稀釋液體積，mL；1000—單位換算；m—試品質(zhì)量，g。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。檢測(cè)方法的靈敏度、精密度、專屬性靈敏度果凍、蜜餞、其他糖果、飲料取樣量為1g，稀釋倍數(shù)為25時(shí)，mg/kg，mg/kg；壓片糖果、片劑、g，稀釋倍數(shù)為50時(shí)，mg/kg，mg/kg。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的15%。專屬性空白試驗(yàn)應(yīng)無(wú)干擾。附錄A匹可硫酸鈉相關(guān)信息匹可硫酸鈉名稱、CAS號(hào)、分子式、分子量、結(jié)構(gòu)式名稱CAS號(hào)分子式分子量結(jié)構(gòu)式匹可硫酸鈉Sodiumpicosulfate10040456C18H13NNa2O8S2附錄B標(biāo)準(zhǔn)色譜圖標(biāo)準(zhǔn)品總離子流色譜圖（250ng/mL）（定量）色譜圖（250ng/mL）（定性）色譜圖（250ng/mL）本方法負(fù)責(zé)起草單位：廣東省藥品檢驗(yàn)所驗(yàn)證單位：廣東省食品檢驗(yàn)所（廣東省酒類檢測(cè)中心）、廣東省食品工業(yè)研究所有限公司（廣東省質(zhì)量監(jiān)督食品檢驗(yàn)站）、國(guó)家糖業(yè)質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心、上海食品藥品檢驗(yàn)所、中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)院、中國(guó)食品藥品檢定研究院主要起草人：何嘉雯、溫家欣、賴宇紅、劉亞雄、羅卓雅、方繼輝第五篇：實(shí)習(xí)六 食品中人工合成色素的測(cè)定實(shí)習(xí)六食品中人工合成色素的測(cè)定（一）原理聚酰胺是一種高分子化合物，又稱“尼龍6”，在酸性條件下可與水容性酸性染料牢固結(jié)合；在堿性條件下則可解吸色素，用紙層析法或薄層層析法進(jìn)行分離鑒別后，再與標(biāo)準(zhǔn)比較予以定性、定量。（二）試劑1． 聚酰胺粉（尼龍6）200目 2． 正丁醇 3． 無(wú)水乙醇 4． 1%氨溶液5． 乙醇氨液（9：1）6． 20%檸檬酸7． %色素標(biāo)準(zhǔn)貯備液(1mg/ml):精確稱取商品色素胭脂紅、稀釋至100毫升。8． 展開劑（臨用現(xiàn)配）正丁醇：無(wú)水乙醇：1%氨水（6：2：3）（三）儀器 9． 沙氏漏斗G3 10．抽濾瓶：500ml 11．100 ml，500 ml 12．血紅蛋白吸管 13．展開缸14．玻璃水泵15．帶塞刻度比色管：10 ml 16．恒溫水浴17．量筒：25 ml，50 ml 18．天平19．吹風(fēng)機(jī)20．吸管：1 ml 21．白瓷蒸發(fā)皿 22．中速層吸濾紙 23．溫度計(jì) 24．PH試紙 25．玻璃棒 26．滴管(四)操作方法（汽水類樣品）：將樣品用兩個(gè)杯子反復(fù)傾倒100次除去CO2，精確吸取樣品50 ml放入100 ml燒杯中，加熱到70℃，備用。2．吸附去雜質(zhì)：稱取聚酰氨粉1g，加少量水調(diào)成糊狀后倒入前處理的70℃的樣品中，充分?jǐn)嚢枋箻右荷厝勘晃?，將樣液全部移入沙氏G3漏斗抽濾，用300ml 70℃ PH=4的蒸餾水分多次洗滌沉淀物，至洗液與原蒸餾水PH相同為止（洗滌過程必須充分?jǐn)嚢?，使所用的洗滌液與聚酰氨粉充分接觸）。: 用乙醇氨溶液15mlf分三次洗滌色素，解吸過程時(shí)時(shí)攪拌直至濾出液無(wú)色為止并收集全部解吸液。4．濃縮: 將色素解吸液置于蒸發(fā)皿中在80℃，轉(zhuǎn)入10ml刻度試管中，用少量50%乙醇洗滌蒸發(fā)皿，洗液并入并入刻度試管中。5紙層析定性:為了判斷樣品中存在有幾種色素以及是什么色素，必須進(jìn)行紙層析進(jìn)行鑒定。經(jīng)上述濃縮后樣品色素溶液于新華中速層析濾紙（8cm*16cm）距底邊2cm的基線上點(diǎn)樣點(diǎn)樣點(diǎn)的直徑應(yīng)不超過2毫米為宜，樣點(diǎn)間距離以及左右紙邊各距2厘米。點(diǎn)樣量20微升，同時(shí)根據(jù)樣品顏色點(diǎn)上色素標(biāo)準(zhǔn)溶液點(diǎn)作對(duì)照。用展開劑在展開槽展開（展開前層析缸及濾紙先用相應(yīng)的溶劑系統(tǒng)平衡10分鐘后再展開）。待溶劑前沿到達(dá)離起始線12cm處，將濾紙取出于空氣中晾干，測(cè)量各色素點(diǎn)的Rf值，于標(biāo)準(zhǔn)色素Rf值對(duì)照確定何種色素（以標(biāo)準(zhǔn)色素斑點(diǎn)Rf值衡量樣品各色素斑點(diǎn)的Rf值是否于標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)在同一條直線上，色素的顏色是否完全一致，就可確定樣品色素屬于何種色素）。Rf（比移值）=斑點(diǎn)移動(dòng)距離/溶劑前沿距離 所使用的展開劑有：1)正丁醇︰無(wú)水乙醇︰1%氨水 = 6︰2︰3 2)正丁醇︰吡啶︰1%氨水 = 6︰3︰4 3)異丁醇︰無(wú)水乙醇︰水 = 3︰2︰2 6．紙層析定量：將紙色譜的條狀色斑剪下，用少量熱水洗滌數(shù)次，洗液移入10ml比色管中，并加水稀釋至刻度，作比色測(cè)定用。 ，各加水稀釋至刻度。目視比色。（五）結(jié)果計(jì)算X（g/kg，g/L）=A/（m*V2/V1）式中 A：測(cè)定樣液中色素的含量（mg）m：樣品質(zhì)量或體積（g，ml）V1：樣品解吸后總體積（ml）V2：樣液點(diǎn)紙?bào)w積（ml）