【正文】 數(shù)藥物為 18~24例，但對于高變異性藥物（個體內(nèi)變異＞ 30%），需要增加受試樣本量，具體數(shù)量需要根據(jù)變異程度按照統(tǒng)計學(xué)原理計算得到。 ? 取樣點(diǎn)設(shè)計不合理 ? 藥時曲線要能夠覆蓋吸收相、分布相和消除相。一般峰濃度之前不少于 3個取樣點(diǎn)，峰濃度附近有 3個取樣點(diǎn)，消除相不少于 4個取樣點(diǎn)，最后的取樣點(diǎn)血藥濃度應(yīng)下降到峰濃度的 1/10以下。 ? 需要根據(jù)藥物的特性設(shè)計，如吸收的快 /慢、腸溶 /緩釋、半衰期長 /短等。 異?，F(xiàn)象：聽風(fēng)就是雨，不分青紅皂白！ 聽聞有品種做到 48例，就以為中心政策有變， 一律按照翻倍 36~48例要求！ ? 多個規(guī)格藥物試驗(yàn)的合理設(shè)計 ? ? ? （ 1）豁免等效性的依據(jù)點(diǎn)：藥物的藥動學(xué)特點(diǎn) （線性動力學(xué)）、劑型特點(diǎn) （非特殊制劑）、各規(guī)格處方工藝的異同 （屬于變更研究指導(dǎo)原則中規(guī)定的 Ⅱ 類變更）、體外溶出特性的異同 （多條溶出曲線一致）等綜合分析來確定。如無充分依據(jù)，則需要對每一個規(guī)格均進(jìn)行等效性試驗(yàn)。 ? 符合要求可僅進(jìn)行高規(guī)格產(chǎn)品的等效性試驗(yàn)，可豁免較低規(guī)格產(chǎn)品等效性試驗(yàn)。如普通片劑 /膠囊 原輔料等比例改變，緩釋膠囊（內(nèi)裝小丸）僅裝量變化。 ? （ 2）資料要求：申報資料中應(yīng)明確寫出是否對每一個規(guī)格均進(jìn)行了等效性試驗(yàn)，如不是，則要提供充分理由進(jìn)行說明。 實(shí)際資料中未按此要求提供。 多規(guī)格藥品，根據(jù)各規(guī)格之間存在生物利用度差異的可能性大小， 確定是否需要對所有規(guī)格進(jìn)行生物等效性試驗(yàn)！ ? 參比制劑選擇 ? 例：國內(nèi)大量注冊的埃索美拉唑鎂膠囊，可以與耐信腸溶片對比！ ? 國內(nèi)無原研制劑或等同品上市 ? 可能會采用容許、簡化一次性進(jìn)口的方式解決。 ? ? 與原研品的劑型對比。如原研為片劑，國內(nèi)改為膠囊上市，要仿制膠囊，仍然與原研的片劑比，而不是與國內(nèi)的膠囊比。否則會由于誤差的傳遞和放大，導(dǎo)致結(jié)果的把握度降低 結(jié)果不會被認(rèn)可而退審！ ? 上市后的變更研究注冊 ? 選擇原研藥而不是變更前的產(chǎn)品，包括藥學(xué)方面也必須與原研藥對比研究。 ? 大量研發(fā)者沒有以近年技術(shù)要求不斷變化的發(fā)展眼光看問題，仍然依據(jù)上市產(chǎn)品變更的指導(dǎo)原則要求，錯誤認(rèn)為與變更前的產(chǎn)品進(jìn)行對比。 ? 原則上選擇原研廠產(chǎn)品，結(jié)果才能支持試驗(yàn)制劑與 原研產(chǎn)品治療學(xué)是否達(dá)到等效的判斷 ? 試驗(yàn)樣品的要求 ? 常見問題： ? （ 1）批量過低，很多采用實(shí)驗(yàn)室小試樣品進(jìn)行！放大后不符合生產(chǎn)的要求必須改變處方或工藝，導(dǎo)致需要重新再進(jìn)行等效性研究。 ? 中試規(guī)模通常是指 10萬片 /粒、袋以上。 ? （ 2）未在今后擬定的商業(yè)化大生產(chǎn)的車間、生產(chǎn)設(shè)備上制備，導(dǎo)致與今后上市銷售的產(chǎn)品存在一致性方面出現(xiàn)差異的可能性，且需要對在商業(yè)化生產(chǎn)線制備的樣品與等效性試驗(yàn)樣品的一致性進(jìn)行充分的研究對比，并在注冊資料中提交。 ? （ 3）生物等效性試驗(yàn)的產(chǎn)品未進(jìn)行充分的質(zhì)量研究，特別是溶出度曲線的一致性研究，且未進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)。 ? （ 4）試驗(yàn)制劑與參比制劑的含量差異過大，又未進(jìn)行測定，導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)較大偏差而誤判。 通常含量差異不應(yīng)超過 5%。 技術(shù)要求： （ 1） 應(yīng)在符合 GMP條件下制備（但不一定必須要有 GMP證）；（ 2）采用的處方工藝、生產(chǎn)設(shè)備應(yīng)與今后擬上市產(chǎn)品一致；（ 3）規(guī)模應(yīng)達(dá)到中試以上 是真正用于人體的產(chǎn)品，審評人員對其質(zhì)量的關(guān)注度高于注冊生產(chǎn)三批 ? 生物樣本測定方法 ? 方法的專屬性或靈敏度不能滿足測試要求 ? 生物樣品測定及方法學(xué)驗(yàn)證與通常的藥學(xué)研究的有關(guān)物質(zhì)、含量測定等是完全不同的概念，因藥物濃度低，干擾因素多難度要遠(yuǎn)高于體外檢測。 ? 靈敏度通常應(yīng)高于最低取樣點(diǎn)的藥物濃度；不能有干擾物。 ? 測試樣品的穩(wěn)定性考察不完善 ? 被測試樣本從采樣到檢測周期一般需要幾周至幾個月完成，必須考察貯存和測試期間目標(biāo)物的穩(wěn)定性，并在申報資料中提供詳細(xì)的研究資料以及文獻(xiàn)資料，且不能僅以文獻(xiàn)資料代替。 ? 包括：樣本室溫放置的穩(wěn)定性，短期、長期貯存穩(wěn)定性，凍融穩(wěn)定性，制備后測試期間穩(wěn)定性，對照液和內(nèi)標(biāo)液的穩(wěn)定性等。 ? 資料中研究設(shè)計不合理，如穩(wěn)定性的考察時間不夠，樣品濃度不夠 僅考察一個濃度等。 ? 未進(jìn)行基質(zhì)效應(yīng)的研究 ? 是生物樣本測定中常見現(xiàn)象，目前資料中很少提供相應(yīng)的研究資料，必須引起關(guān)注。 免疫法， LCMS(LCMS/MS)方法時較明顯。 ? 隨行質(zhì)控不完善 ? 隨行質(zhì)控原因：生物樣本中藥物濃度低，干擾因素多，隨行質(zhì)控是保證測定結(jié)果可靠性的重要手段。 ? 技術(shù)要求：相關(guān)指導(dǎo)原則中對隨行質(zhì)控樣本的數(shù)目、分布有明確的要求。申報資料中應(yīng)說明質(zhì)控樣品濃度、制備日期和在進(jìn)行分析前的儲存條件；說明每個分析批的操作中質(zhì)控樣品測定的數(shù)量、分布、測定結(jié)果及是否符合可接受標(biāo)準(zhǔn)。 ? 存在的問題：申報資料中隨行質(zhì)控不完善，如質(zhì)控樣品數(shù)不夠，達(dá)不到未知樣品總數(shù)的 5％ ；有的品種不是將質(zhì)控樣品合理分布于分析批的測定過程，而是集中在分析批的開始或結(jié)束前測定質(zhì)控樣品，導(dǎo)致了試驗(yàn)結(jié)果的可靠性不能得到保證。 ? 內(nèi)源性物質(zhì)的干擾影響 ? 某些藥物屬于人體內(nèi)存在的化合物，如某些氨基酸、維生素、微量元素、氨基葡萄糖等，需要在試驗(yàn)設(shè)計中增加空白對照血樣，根據(jù)不同的情況設(shè)計不同的基底扣除方法：①內(nèi)源性物質(zhì)體內(nèi)濃度較為穩(wěn)定不隨時間變化，則扣除個體的內(nèi)源性物質(zhì)給藥前濃度的均值；②濃度隨時間變化，則個體整個取樣過程點(diǎn)都要取對應(yīng)的空白血樣，進(jìn)行點(diǎn)對點(diǎn)的本底扣除，即扣除個體內(nèi)源性物質(zhì)給藥前的 AUC，不能只取 1個空白血樣點(diǎn)來作為整個試驗(yàn)樣品的空白基底。③如果給藥后的藥物濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于基底，則不需要扣除。 ? 試驗(yàn)圖譜 ? 技術(shù)要求：生物樣本測定圖譜是數(shù)據(jù)溯源的重要依據(jù)，因此申報資料中要求提供全部的試驗(yàn)圖譜。 ? 存在的問題：未提供完整的試驗(yàn)圖譜，如僅提供了受試者樣品的測定圖譜，缺少方法學(xué)驗(yàn)證圖譜，缺少隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線、質(zhì)控樣品的測定圖譜等；或圖譜缺少重要的溯源信息，如未標(biāo)示分析日期和進(jìn)樣時問，未標(biāo)示受試者編碼、樣品編號等信息，未提供積分參數(shù)；有的采用不合理方式積分；有的采用了手動積分，但未提供合理的原因。 ? 8 、試驗(yàn)樣品的提供和保存 ? 技術(shù)要求：試驗(yàn)樣品的真實(shí)可靠是生物等效性評價的前提。申報資料中應(yīng)詳細(xì)說明試驗(yàn)樣品及其保存條件，包括提交試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的樣品量、批號、含量，生物等效性試驗(yàn)中已使用的樣品量、剩余量，剩余樣品的保管單位、保管方式及相關(guān)責(zé)任人（可參考美國 FDA的相關(guān)指導(dǎo)原則）。 建議列表說明。 ? 藥品注冊申報單位在獲得生物等效性試驗(yàn)批件后，應(yīng)向試驗(yàn)機(jī)構(gòu) (臨床藥理基地 )提供試驗(yàn)樣品 (試驗(yàn)制劑及參比制劑 )，試驗(yàn)樣品的量應(yīng)不低于全檢需要量的 5倍。用于生物等效性試驗(yàn)的樣品應(yīng)由試驗(yàn)機(jī)構(gòu)從注冊申請人提交的樣品中隨機(jī)抽取，剩余樣品由試驗(yàn)機(jī)構(gòu)封存。監(jiān)管機(jī)構(gòu)必要時可對樣品的真實(shí)性進(jìn)行核查。 ? 存在的問題：提交的樣品缺乏檢驗(yàn)的數(shù)據(jù)，特別是對照藥；數(shù)量僅可滿足等效性試驗(yàn)的用量，即使有剩余量，也常常退還申請人，這種情況下，試驗(yàn)樣品的真實(shí)性及其核查就無從保障。 ? 餐后生物等效性 ? 原因：食物可改變藥物的生物利用度，不同制劑之間由于處方工藝的不同，食物對其釋藥及吸收的影響可能不同，有時雖然空腹服藥生物等效，但也可能餐后服藥的情況下出現(xiàn)不等效。因此，餐后生物等效性研究也不應(yīng)被忽視。 ? 國內(nèi)現(xiàn)狀：食物對生物利用度影響的研究在國內(nèi)尚未引起足夠的重視。隨著國內(nèi)研發(fā)水平及審評技術(shù)要求的提高，審評中提出對餐后生物等效性的要求是必然的趨勢，這一點(diǎn)應(yīng)引起研發(fā)者及早予以重視。 免除餐后等效性試驗(yàn)的條件：對于仿制普通口服固體制劑，以下幾種情況可不進(jìn)行餐后生物等效性試驗(yàn)。 ① 所含原料藥為高溶解和高滲透性藥物 (即生物藥劑學(xué) BCS分類 I的藥物 )，且試驗(yàn)制劑與參比制劑均能快速溶出。這種情況下若受試制劑與參比制劑空腹給藥生物等效，則餐后給藥不等效的可能性很小。 ②參比制劑說明書中已明確規(guī)定臨床只能在空腹?fàn)顟B(tài)下服用。 ③ 參比制劑說明書中未陳述食物對吸收或者給藥方式的影響。 除上述幾種情況外，一般均應(yīng)在空腹生物等效性研究 的基礎(chǔ)上與原研藥進(jìn)行餐后生物等效性試驗(yàn)。 ? 對于仿制緩釋制劑，均應(yīng)當(dāng)在空腹給藥生物等效的基礎(chǔ)上，進(jìn)行餐后給藥的生物等效性試驗(yàn)，證實(shí)在進(jìn)食狀態(tài)下與被仿品亦具有生物等效性。 ? 餐后生物等效性試驗(yàn)設(shè)計的具體方法和要求可參考國外的相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則。 體內(nèi)藥物釋放和吸收時間長， 通常會“跨越就餐時間”！ ? 預(yù)試驗(yàn) ? 建議：進(jìn)行正式的生物等效性試驗(yàn)之前，可先進(jìn)行較小樣本的預(yù)試驗(yàn) 通常為 6人。 ? 目的：通過預(yù)試驗(yàn)，可以進(jìn)一步驗(yàn)證建立的生物樣本測定方法的可行性，考察藥物個體內(nèi)的變異性，驗(yàn)證取樣點(diǎn)設(shè)計的合理性，并提供其他有益的信息。 ? 舉例：比如對于普通制劑，通過預(yù)試驗(yàn)，可以避免第一取樣點(diǎn)已經(jīng)錯過了峰濃度的問題；對于緩釋制劑，可以發(fā)現(xiàn)是否存在時滯、突釋等現(xiàn)象。 ? 預(yù)試驗(yàn)中若發(fā)現(xiàn)問題，可以及時糾正，改進(jìn)完善方法及試驗(yàn)方案，以免正式試驗(yàn)后才發(fā)現(xiàn)問題而造成更大的損失。 ? 1生物等效性的判定標(biāo)準(zhǔn) ? 生物等效性試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計分析，主要是用藥動學(xué)參數(shù) AUC和Cmax經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后以多因素方差分析 (ANOVA)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，然后用其幾何均值進(jìn)行雙側(cè)和單側(cè) t檢驗(yàn)以及計算 90％ 置信區(qū)間的方法來評價和判斷制劑問的生物等效性。 ? 根據(jù)臨床經(jīng)驗(yàn)，對于大多數(shù)藥品，不大于 20％的吸收差異被認(rèn)為不會產(chǎn)生顯著的臨床影響。 ? 國外判斷標(biāo)準(zhǔn)： FDA采用的等效性范圍是受試制劑與參比制劑 AUC和Cmax幾何均值比的 90％ 置信區(qū)間均應(yīng)在 80％～ 125％ 范圍內(nèi)。該允許范圍是根據(jù)受試制劑和參比制劑的藥動學(xué)參數(shù) AUC， Cmax的幾何均值比 “區(qū)別 20％ ”來設(shè)定的。 ? 國內(nèi)判斷標(biāo)準(zhǔn)：我國 2023年頒布的指導(dǎo)原則中采用的等效性判定標(biāo)準(zhǔn)，要求受試制劑與參比制劑 AUC幾何均值比的 90％ 置信區(qū)間在 80％ ～125％， Cmax幾何均值比的 90％ 置信區(qū)間在 70％ ～ 143％范圍內(nèi) 。對Cmax 的要求比 FDA明顯偏低。 ? 中國藥典 2023版附錄生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則中，也已將 Cmax等效判定標(biāo)準(zhǔn)提高至幾何均值比的 90％ 置信區(qū)間應(yīng)在 75％ ～ 133％ 范圍 。 ? 中國藥典 2023版附錄生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則中，又進(jìn)行了修改，已要求受試制劑與參比制劑 AUC和 Cmax幾何均值比的 90％ 置信區(qū)間均在％ ～ ％范圍內(nèi)。 2023年 12月 1日新版藥典實(shí)行前完成并注冊申報的生物等效性試驗(yàn)，結(jié)果按照 2023版藥典的規(guī)定判定；之后的按照新版藥典規(guī)定判定。 2023年版藥典的生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則有“顯著性”地修改和提高！ 孫亞洲 電話： 13810652665 郵箱： 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. 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