【導(dǎo)讀】健康檢查，對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行綜合分析和判斷，做出是否適合獻(xiàn)血的結(jié)論，保障獻(xiàn)血者健康和安全。將獻(xiàn)血者本人相貌與其有效身份證件原件核對(duì)。有效身份證件包括居民身份證、居民社會(huì)保障卡、駕駛。1）用身份證識(shí)讀器讀取身份信息并存入BMIS；2）在《獻(xiàn)血登記表》手寫登記，隨后手工錄入BMIS，注。意核對(duì)信息填寫和輸入的正確性。詢問獻(xiàn)血者和查詢BMIS有無既往獻(xiàn)血史。如獻(xiàn)血者曾獻(xiàn)血，獻(xiàn)血間隔期應(yīng)符合要求，不處于被暫時(shí)或永。請(qǐng)獻(xiàn)血者仔細(xì)閱讀、理解獻(xiàn)血前須知內(nèi)容。按照《要求》規(guī)定，對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行一般檢查，常規(guī)項(xiàng)目包括體重、血壓、脈搏等，必要時(shí)測量體溫。ALT采用干化學(xué)法/速率法記錄檢測結(jié)果和結(jié)論并簽名。宜獻(xiàn)血的，告知不適宜獻(xiàn)血的情形解除后，經(jīng)體檢合格可以獻(xiàn)血。ALT和血型檢測的標(biāo)本管。的國家標(biāo)準(zhǔn)要求；3）處于有效期內(nèi)；4）標(biāo)明啟用日期。熱合機(jī)開啟并檢查熱合機(jī)，證實(shí)處于正常狀態(tài)。應(yīng)當(dāng)印制獻(xiàn)血后注意事項(xiàng)，并將其發(fā)給每位獻(xiàn)血者。

　　

【正文】 用于 女 性獻(xiàn)血者（ Hb≥115g/L）檢測的 硫酸銅溶液比重為 。 不同用途試劑瓶標(biāo)識(shí)應(yīng)便于區(qū)分 采用商品化 硫酸銅 試劑的，按試劑說明書規(guī)定的條件儲(chǔ)存，在有效期內(nèi)使用。 硫酸銅 溶液也可自行 配制，配制方法見 ，應(yīng)保存配制記錄。 硫酸銅溶液比重隨溫度變化而變化的，溫度 每上升 2℃， 比重 下降 。在配制和使用時(shí)應(yīng)注意這一特性。 每瓶（ 50 ml） 硫酸銅溶液 的可用于檢測 25 人次。 標(biāo)本 要求 6 新鮮采集的末梢血或靜脈血 ， 抗凝或不抗凝血液均可使用。 陳舊、溶血和嚴(yán)重 乳糜的 血 液 不可用 來試驗(yàn) 。 操作步驟和結(jié)果判斷 常規(guī)采集手指末梢血或靜脈血。 在 距硫酸銅液面 上方 1cm 處 垂直 將 1 滴血液輕輕滴入， 血 滴 應(yīng) 不含氣泡 。 在 15 秒內(nèi) 肉眼 觀察 ，判斷結(jié)果： 1） 血滴很快下沉于瓶底 ，表明血液 比重大于硫酸銅溶液比重 ，血紅蛋白 含量 符合獻(xiàn)血 標(biāo)準(zhǔn)； 2） 血滴在硫酸銅溶液中 部 懸浮 10 15秒后下沉于瓶底 ，表明血液 比重等于硫酸銅溶液比重 ， 血紅蛋白 含量 符合獻(xiàn)血 標(biāo)準(zhǔn)； 3） 血滴 懸 浮 在 硫酸銅溶液 上部 ， 15 秒 時(shí) 不下沉， 表明血液 比重 小 于硫酸銅溶液比重 ， 血紅蛋白 含量不 符合獻(xiàn)血 標(biāo)準(zhǔn) 。 記錄檢測結(jié)果。 硫酸銅 溶液配制方法 貯存液（比重為 ）配制 稱取硫酸銅結(jié)晶 (CuSO4?5H2O，分 析純 ) 置于大試劑瓶中，在 1000ml 容量瓶中加入蒸鎦水至刻度，測量此蒸鎦水的溫度，根據(jù)表 A1 查出與溫度相應(yīng)的蒸鎦水毫升數(shù)，不足的容量用滴定管補(bǔ)加入容量瓶中。將容量瓶中蒸鎦水全部傾入盛硫酸銅結(jié)晶的大試劑瓶中，再將容量瓶倒置 2 分鐘，使蒸鎦水全部滴入大試劑瓶中。此時(shí)，容量瓶內(nèi)尚附著蒸鎦水約 ，在計(jì)算時(shí)此容量已加在表內(nèi)數(shù)字中。搖動(dòng)試劑瓶使硫酸銅完全溶解，即得比重為 的貯存液。如欲知所配制的貯存液比重是否準(zhǔn)確，可用液體比重天平進(jìn)行測定。如配得的貯存液比重并非 ，比重每超過，則在 1000ml溶液中加入蒸鎦水 1ml。例如，所配成的貯存液的比重 ，則在此溶液 1000ml中加入蒸鎦水 50ml，即可校正其比重為 。反之，如所配溶液的比重小于 ，則每少 ，應(yīng)在 1000ml 硫酸銅溶液中加入飽和硫酸銅溶液 1ml。在盛貯存液的試劑瓶上貼好標(biāo)簽，做好配制記錄。 表 A1 配制比重 硫酸銅溶液需用蒸鎦水的容量 蒸鎦水溫度℃ 蒸鎦水量（ ml） 蒸鎦水溫度℃ 蒸鎦水量（ ml） 10 26 12 28 14 30 16 32 18 34 20 36 22 38 24 40 工作液配制 配制 100 ml 不同比重工作液所需貯存液容量見表 A2。 確定工作液配制總量，量取所需量貯存液，加入容器內(nèi)，慢慢加入蒸鎦水至工作液總量，邊加邊搖勻，以消除硫酸銅溶液加水后容量縮 減的影響。配制時(shí)貯存液和蒸鎦水的溫度應(yīng)相同，但不一定為25℃， 10～ 40℃之間影響不大。 表 A2 硫酸銅應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液配制 比重 貯存液用量（ ml） 比重 貯存液用量（ ml） 比重 貯存液用量（ ml） 7 工作液配制后應(yīng)檢測其是否符合質(zhì)量要求： 1）測定比重是否準(zhǔn)確，可用液體比重天平測定，必要時(shí)采用相對(duì)密度測定法； 2）采用已知低于和高于獻(xiàn)血者血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)的全血進(jìn)行檢測，應(yīng)符合預(yù)期要求。 將配置完畢的工作液分裝至小試劑瓶，粘貼標(biāo)簽。 記錄配制過程。 附錄 B 血液檢測方法的確認(rèn) 總則 本附錄討論了血站血液檢測實(shí)驗(yàn)室采用一項(xiàng)新的檢測方法，或更換現(xiàn)有檢測方法時(shí)需要考慮的因素。通常血液檢測方法包括完成檢測必需的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、實(shí)驗(yàn)程序組合。檢測方法必須由 實(shí)驗(yàn)室選擇。必須按照生產(chǎn)商的說明書進(jìn)行操作，確保檢測結(jié)果符合實(shí)驗(yàn)室的要求。 血站對(duì)獻(xiàn)血者及其捐獻(xiàn)的血液進(jìn)行強(qiáng)制性血液篩查，包括輸血相關(guān)感染病原學(xué)標(biāo)志物檢測、血型血清學(xué)檢測和酶學(xué)檢測。方法學(xué)包括 ELISA 法、凝集法、速率法等，以及用于獻(xiàn)血者采血前檢查的快速診斷實(shí)驗(yàn)。 由于以上方法學(xué)原理的不同，方法確認(rèn)的原則也不同。依據(jù)當(dāng)今國際公認(rèn)的一些法規(guī)和指南，本附錄提供了血站血液檢測實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用的檢測方法確認(rèn)的原則和步驟，詣在提高血液檢測實(shí)驗(yàn)室對(duì)檢測方法確認(rèn)的一致性和效率，確保檢測方法變化的過程得到有效控制。幫助用戶滿 足文件和法規(guī)的要求。 范圍 為血站血液檢測實(shí)驗(yàn)室檢測方法確認(rèn)提供方案。實(shí)驗(yàn)室需選擇國家批準(zhǔn)的符合國家要求的儀器、試劑盒或檢測方法。在新方法投入常規(guī)使用報(bào)告檢測結(jié)果之前，需要就檢測方法在實(shí)驗(yàn)室的使用性能進(jìn)行確認(rèn)。不建議實(shí)驗(yàn)室對(duì)生產(chǎn)商提供的檢測方法進(jìn)行自行改動(dòng)，如果確實(shí)需要修改，應(yīng)與生產(chǎn)商合作進(jìn)行新檢測方法性能的評(píng)價(jià)測試，以確認(rèn)修改后的系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)室的適用性和可靠性。 需確認(rèn)的對(duì)象包括： 實(shí)驗(yàn)室首次引入的檢測方法，如實(shí)驗(yàn)室從未使用過的試劑、儀器等。 實(shí)驗(yàn)室首次將某項(xiàng)目引入現(xiàn)用檢測方法，如 HBsAg 項(xiàng)目由 A 儀器檢測改為由 B 儀器檢測。 若多臺(tái)儀器（相同品牌和型號(hào)）檢測同一個(gè)項(xiàng)目，應(yīng)對(duì)每一臺(tái)儀器的性能進(jìn)行確認(rèn)比較。 輸血相關(guān)感染標(biāo)志物檢測方法的確認(rèn) 以下內(nèi)容適用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的確認(rèn)?？焖僭\斷試驗(yàn)和確證試驗(yàn)等定性方法的確認(rèn)可參照本章節(jié)內(nèi)容。 確認(rèn)的一般要求 實(shí)驗(yàn)操作的培訓(xùn) 開始確認(rèn)新的檢測方法之前，操作人員應(yīng)當(dāng)有充分的時(shí)間熟悉新系統(tǒng)，確定關(guān)鍵的操作步驟。生產(chǎn)商應(yīng)提供試劑或儀器的操作說明，實(shí)驗(yàn)原理，規(guī)格，實(shí)驗(yàn)步驟，局限性，質(zhì)量控制和健康安全信息。生產(chǎn)商應(yīng)對(duì)操作者進(jìn)行培訓(xùn)，確保操作人員正確操作。 試劑的準(zhǔn)備 應(yīng)選擇經(jīng)國家檢定合格的病原學(xué)標(biāo)志物診斷試劑。嚴(yán)格遵從生產(chǎn)商的說明書進(jìn)行操作。對(duì)于正在進(jìn)行確認(rèn)的試劑，所有組份應(yīng)來源于同一批試劑，不能由其他試劑所替代或?qū)嶒?yàn)室自己配制。 8 儀器的準(zhǔn)備 應(yīng)選擇國家批準(zhǔn)使用的檢測儀器。實(shí)驗(yàn)開始前，按要求對(duì)儀器進(jìn)行維 護(hù)校準(zhǔn)。對(duì)于開放試劑的儀器設(shè)備，特別注意試劑說明書要求的操作條件與儀器性能是否相適應(yīng)。如果儀器性能與試劑盒說明書的要求有差異，可以征得試劑生產(chǎn)商協(xié)助和同意，對(duì)本實(shí)驗(yàn)室儀器的實(shí)驗(yàn)操作參數(shù)進(jìn)行修正，以達(dá)到試劑盒要求的實(shí)驗(yàn)狀態(tài)。 質(zhì)量控制 應(yīng)建立有效的質(zhì)量控制程序。除直接采用生產(chǎn)商提供的質(zhì)控品外，還應(yīng)選擇質(zhì)量、來源穩(wěn)定，無基質(zhì)效應(yīng)的質(zhì)控品作為另外的室內(nèi)質(zhì)控物。如可能，多實(shí)驗(yàn)方法比較過程中，應(yīng)采用相同質(zhì)控物。一些定性實(shí)驗(yàn)每天只需要使用陰性和陽性質(zhì)控物，而另一些定性實(shí)驗(yàn)可以產(chǎn)生量化的質(zhì)控結(jié)果。對(duì)此可 以采用統(tǒng)計(jì)過程控制方法（ SPC），用量化數(shù)據(jù)監(jiān)控實(shí)驗(yàn)過程。確認(rèn)實(shí)驗(yàn)采用的標(biāo)本不能等同于質(zhì)控品使用。實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)確保過程處于受控狀態(tài)，否則必須重新實(shí)驗(yàn)。 保持記錄 應(yīng)記錄和監(jiān)控操作人員在實(shí)驗(yàn)過程中的健康安全，確保符合法律要求。保留檢測全過程的數(shù)據(jù)和結(jié)果，包括檢測的速度和使用的適宜性等。 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 生產(chǎn)商提供的陰性陽性對(duì)照實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)程序：采用生產(chǎn)商提供的陰性、陽性對(duì)照，在不低于 10 天實(shí)驗(yàn)運(yùn)行的前提下，進(jìn)行至少20 次檢測。 可接受標(biāo)準(zhǔn) ： 20次檢測結(jié)果不能出現(xiàn)大于 1次陰性陽性對(duì)照不符合生產(chǎn)商要求。否則實(shí)驗(yàn)室必須終止實(shí)驗(yàn)，咨詢試劑生產(chǎn)商，查找原因，采取糾正措施。 方法精密性實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)程序：在定性實(shí)驗(yàn)中，如果能夠產(chǎn)生量化實(shí)驗(yàn)結(jié)果（如 ELISA 實(shí)驗(yàn)），應(yīng)采用接近臨界值的標(biāo)本，對(duì)精密度進(jìn)行估計(jì)。建議采用 S/CO 為 2～ 4 的標(biāo)本，不適宜采用低值的陰性標(biāo)本和高值陽性標(biāo)本，因?yàn)榇祟悩?biāo)本距決定水平點(diǎn)即臨界值（ cutoff）的分析濃度相距較遠(yuǎn)。 可接受標(biāo)準(zhǔn)：批內(nèi)變異系數(shù)在 15%以內(nèi)，批間變異系數(shù)在 20%以內(nèi)。 靈敏度及特異性實(shí)驗(yàn) 本實(shí)驗(yàn)采用已知真實(shí)血清學(xué)狀態(tài)的標(biāo)本，經(jīng)檢測獲得方法靈敏度和特異性方面的信息。也可以將不同方法的靈敏性和特異性進(jìn)行比較，得到量化的差異結(jié)果，判斷是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 標(biāo)本的選擇 靈敏度和特異性實(shí)驗(yàn)通常對(duì)已知真實(shí)血清學(xué)狀態(tài)的標(biāo)本進(jìn)行檢測。確定標(biāo)本真實(shí)血清學(xué)狀態(tài)可以采用金標(biāo)準(zhǔn)方法或臨床診斷方法。參考血清盤或能力驗(yàn)證（ PT）的標(biāo)本可用于本實(shí)驗(yàn)。參考血清盤是指經(jīng)過檢測或經(jīng)過與公認(rèn)方法比較，或具有臨床診斷意義的標(biāo)本。這些標(biāo)本已經(jīng)確立了真實(shí)的血清學(xué)狀態(tài)，可 追溯至經(jīng)典方法或臨床診斷結(jié)果?？梢詮臋?quán)威機(jī)構(gòu)、專業(yè)研究機(jī)構(gòu)和文獻(xiàn)中獲得參考血清盤的來源。參考血清盤應(yīng)包含具有不同分析物濃度的臨床標(biāo)本。如可能，血清盤應(yīng)包含對(duì)檢測具有干擾的標(biāo)本。如可造成假陰性和假陽性結(jié)果的自身免疫性疾病、螺旋體疾病、白細(xì)胞抗體、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性骨髓瘤患者的標(biāo)本。盡管商品化參考血清盤在方法確認(rèn)過程中，具有很好的時(shí)間和資源效率，但其局限性在于可能忽視了實(shí)驗(yàn)室目的檢測人群中疾病的流行率和病原學(xué)因子抗原譜的分布。因此，使用參考血清盤、能力驗(yàn)證標(biāo)本結(jié)合常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測標(biāo)本，可以提供更有意義、更可靠的 確認(rèn)結(jié)果。 PT 材料可能存在基質(zhì)干擾，對(duì)方法性能產(chǎn)生錯(cuò)誤判斷。當(dāng) PT 材料為臨界標(biāo)本，或分子結(jié)構(gòu)不同于天然血清，導(dǎo)致抗原決定簇不能被正常識(shí)別時(shí)，這種干擾尤其明顯。 標(biāo)本的數(shù)量 標(biāo)本數(shù)量的估算，統(tǒng)計(jì)學(xué)中稱為標(biāo)本含量的估算依據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的類型、結(jié)果變量的性質(zhì)、研究目的和采用的統(tǒng)計(jì)分析方法而不同。對(duì)于檢測結(jié)果為計(jì)數(shù)資料的實(shí)驗(yàn)（如定性實(shí)驗(yàn)），一般而言，在實(shí)驗(yàn)誤差控制較好的情況下，不同血清學(xué)狀態(tài)的標(biāo)本數(shù)量至少為 30 份。否則可能影響實(shí)驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)功效。 9 標(biāo)本的保存 應(yīng)確保標(biāo)本可用于常規(guī)檢測 并處于穩(wěn)定狀態(tài)，盡可能保持實(shí)驗(yàn)標(biāo)本新鮮。如需凍存，血清或血漿應(yīng)保存在 20℃的條件下。實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的保存狀態(tài)、凍融次數(shù)、使用次數(shù)和時(shí)間應(yīng)盡量一致，避免標(biāo)本產(chǎn)生偏差。如需要方法比較實(shí)驗(yàn)，應(yīng)在相同時(shí)間進(jìn)行，最大限度減小由于標(biāo)本放置時(shí)間不同產(chǎn)生的結(jié)果差異。 數(shù)據(jù)的收集和整理 及時(shí)記錄和檢查所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，盡早發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)和人為的誤差。如果能夠確定一些結(jié)果是由于可知的差錯(cuò)造成，應(yīng)詳細(xì)記錄差錯(cuò)原因，數(shù)據(jù)不能用于后續(xù)分析過程。如果不能夠確定產(chǎn)生異常結(jié)果的原因，在數(shù)據(jù)組中保留原始結(jié)果。 數(shù)據(jù)的分 析 單一檢測方法靈敏性和特異性估計(jì) 如果明確了每份檢測標(biāo)本真實(shí)的血清學(xué)狀態(tài)，檢測方法的靈敏度和特異性很容易計(jì)算。表Ｂ－ 1 為反映一個(gè)定性實(shí)驗(yàn)檢測已知真實(shí)血清學(xué)狀態(tài)標(biāo)本的結(jié)果的 2 2四格表資料。通過這組數(shù)據(jù)可以計(jì)算被估計(jì)的靈敏度、特異性。 表 B－ 1 試驗(yàn)方法結(jié)果與診斷結(jié)果的 2 2 四格表 診斷結(jié)果 方法結(jié)果 陽性 陰性 總計(jì) 陽性 A B A+B 陰性 C D C+D 總計(jì) A+C B+D N 靈敏度和特異性 估計(jì)靈敏度＝ 100%〔 A/(A+C)〕 估計(jì)特異性＝ 100%〔 D/(B+D)〕 靈敏度和特異性 95%置信區(qū)間可通過二項(xiàng)分布計(jì)算。 兩方法靈敏度和特異性的比較 可采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)和配對(duì)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，比較兩檢測方法的靈敏度和特異性。完全隨機(jī)設(shè)計(jì)時(shí)，可采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì) x2 檢驗(yàn)。兩方法采用不同的標(biāo)本，標(biāo)本相對(duì)獨(dú)立。這種情況下兩方法靈敏度和特異性的比較實(shí)際是兩樣本率的比較。配對(duì)設(shè)計(jì)時(shí)，可采用配對(duì)設(shè)計(jì)的 McNemar x2 檢驗(yàn)。兩方法采用相同的標(biāo)本，得到兩個(gè)相關(guān)的靈敏度和特異性，這時(shí)注意當(dāng)標(biāo)本數(shù)較少時(shí)，需要計(jì)算校正 x2 或采用精確概率法檢驗(yàn)。 詳細(xì)計(jì)算見 。 注意如果需要判斷檢測方法的準(zhǔn)確性，單憑比較靈敏度和特異性是不夠的。除非一個(gè)方法的靈敏度和特異性均大于或小于另一方法，否則只能比較相同靈敏度時(shí)的特異性，或相同特異性時(shí)的靈敏度。當(dāng)靈敏性和特異性均不相同時(shí)，很難比較兩方法準(zhǔn)確性。這時(shí)可采用受試者工作特征曲線法（ ROC 曲線法）進(jìn)行比較。該法是近年來公認(rèn)的評(píng)價(jià)和比較檢測方法準(zhǔn)確度的較好方式。該方法可以考慮檢測方法在所有臨界值時(shí)的靈敏度和特異性。通過比較不同方法 ROC 曲線下的面積，確定和參考方法的特性。鑒于此項(xiàng)內(nèi)容不在本規(guī)程要求的范圍， 實(shí)驗(yàn)室人員如需要了解更多信息，可以查找相關(guān)資料。 如果需要量化兩方法靈敏度和特異性之間差異，可以對(duì)靈敏度或特異性的差異進(jìn)行估計(jì)。以配對(duì)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)為例，兩方法采用相同的標(biāo)本進(jìn)行檢測的結(jié)果可以匯集成表 B－ 2。如果兩方法采用的標(biāo)本不同，則不能采用表 2 的方式整理數(shù)據(jù)。 表 B－ 2 兩方法結(jié)果和診斷結(jié)果的三項(xiàng)比較 方法結(jié)果 總標(biāo)本數(shù) 真實(shí)診斷結(jié)果 方法 1 方法 2 陽性 陰性 陽性 陽性 a=a1+a2 a1 a2 陽性 陰性 b=b1+b2 b1 b2 10 陰性 陽性 c=c1+c2 c1 c2 陰性 陰性 d=d1+d2 d1 d2 總標(biāo)本數(shù) N n1 n2 兩方法靈敏度差異估計(jì) 兩方法靈敏度估計(jì) 靈敏度 1=100%[(a1+b1)/n1] 靈敏度 2=100%[(a1+c1)/n1] 兩方法靈敏度差異估計(jì) 靈敏度 1－靈敏度 2=100%[(b1－ b1)/n1] 兩方法特異性差異估計(jì)