檢驗技術操作規(guī)程-資料下載頁
2025-07-14 00:10本頁面
【正文】 抗體和別的紅細胞產(chǎn)生反應形成免疫性的凝集。而由凝聚胺所引起的非免疫性紅細胞凝集反應可被后來加入的復懸液所中和而散開，如有免疫反應，凝集就不會散開，為陽性反應。如沒有免疫反應，凝集就會散開，為陰性反應。交叉配血試驗是在鹽水介質(zhì)的基礎上加入凝聚胺，檢測供患之間是否相合，患者血清（漿）中是否含有具臨床意義的紅細胞異體抗體。[試劑組成]1 潔凈試管，離心機，顯微鏡。2 % 氯化鈉溶液：準確稱取氯化鈉（AR） g，用蒸餾水溶解并定容至 1000 ml。試劑啟用后，有效期為：二周。3 聚胺試劑（1）質(zhì)溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸2鈉及穩(wěn)定劑。（2） 凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化鈉及穩(wěn)定劑。（3）復懸液：含檸檬酸鈉，葡萄糖及穩(wěn)定劑。（4）陽性對照血清：含抗D血清，氯化鈉及穩(wěn)定劑。4 抗人IgG 血清。[試劑保存和穩(wěn)定性]1．凝聚胺試劑須保存在225℃。2．有效期內(nèi)可使用。3．抗人IgG血清低溫冰箱保存。復溶后放2—4℃冰箱保存。[標本收集和準備]1．抽取受血者靜脈血34ml（操作中小心防止紅細胞破損），放入一已貼標簽干燥潔凈的試管中為血清管(也可用EDTAK2抗凝血液)，并將注射器中余下的少量血液配成2%紅細胞生理鹽水懸液，放入另一已貼標簽干燥潔凈的試管中為紅細胞懸液管。以上標本有效期為三天；若受血者抽取標本后，輸用過血液或血液制品，且輸用時間超過12 小時的，必須重新采集標本。2．2% 紅細胞懸液：用生理鹽水洗滌紅細胞3次。根據(jù)下表進行紅細胞懸液的配制。懸液濃度（%） 壓積紅細胞（滴） 鹽水（滴） 2 1 2ml(40) 5 1 (16)[操作步驟]1． 取出3支試管分別標記主，次及對照測試：主測管：加入病人血清（漿）2滴，再加入供血者35%紅細胞懸液1滴，次測管：加入供血者血清（漿）2滴，再加入病人35%紅細胞懸液1滴，對照管：加入2滴*4陽性對照血清，再加入供血者35%紅細胞懸液1滴。2．各加入*，輕輕混勻，于室溫下靜置1分鐘。3．再滴入2滴*2凝聚胺溶液，輕輕混勻，于室溫下靜置15秒。4．3400rpm離心1分鐘，然后把上清液倒掉。5．目測紅細胞有無變成凝塊，如果沒有凝塊，則必須重做，（請看注意事項6）。重做后仍然沒有凝集現(xiàn)象出現(xiàn)，可能試劑失效。6．各滴入2滴*3復懸液，并輕輕混勻，觀察結(jié)果。若為凝聚胺引起的非免疫性凝集，應該在1分鐘內(nèi)散開；若是異體抗體所引起的免疫性凝集，則不會散開。7．倒在玻片上用顯微鏡觀察有無凝集。如有凝集反應，表示不合，此供血者的血液不適合病人使用；如無凝集反應，表示供血者的血液適合病人輸注。如果想進一步檢測AntiK抗體，則必須繼續(xù)做輔助性的抗球蛋白試驗，步驟如下：8．再滴入1滴*3復懸液。9．用生理鹽水洗紅細胞3—5次，并把最后一次上清液完全倒干。10．滴入2滴Antihuman IgG血清，并混勻。11．3400rpm離心1分鐘。12．觀察有無凝集反應，如果有凝集反應，表示有AntiK抗體，則必須進一步做抗體沖出試驗，供血者的血液不適合病人使用。如果沒有凝集反應，為了確保輸血的安全性，須再各添加1滴已知致敏性紅細胞至所有沒有凝集的試管中，混勻，3400rpm離心1分鐘。正常應有2+反應。如果沒有凝集反應，可能是假陰性，輔助性抗球蛋白試驗必須重做。[結(jié)果判斷]1．ABO同型配血，主側(cè)和次側(cè)均無溶血及凝集表示無輸血禁忌，可以輸血。2．如急需輸血但一時無同型血液，作異型配血時（指O型血輸給A，B或AB型，或A，B型血輸給AB型時），主側(cè)無溶血及凝集，但次側(cè)必然有凝集或溶血。[質(zhì)量控制與附注]1．試劑超過有效期或有污染現(xiàn)象出現(xiàn)，即不可使用，必須更換。2．檢驗人員必須熟悉操作步驟，尤其是凝聚胺所引起的凝集反應，更要特別注意。3．中國人極少有AntiK抗體，但其他人種比例較高，尤其是白種人，所以，當病人是其他人種時，為求安全起見，加做輔助性抗球蛋白試驗。4．加做輔助性抗球蛋白試驗是為了增加檢測AntiK抗體的敏感度，對檢測其他的抗體無幫助。所以，除非想進一步檢測AntiK抗體，否則不須做到輔助性抗球蛋白試驗。5．在冬天氣溫極低的情況下，操作交叉配血試驗，某些病人血清（漿）中可能含有寒冷凝集素等因子而導致假陽性的結(jié)果出現(xiàn)。若有此懷疑，請再滴入2滴*3復懸液，將試管立即置入37 C水浴中輕輕混勻，并在一分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。，可能是標本中含有肝素。如洗腎病人的標本或其他干擾存在，此時需多加24滴*2凝聚胺溶液以中和肝素或干擾因子。7．% 氯化鈉溶液啟用時，及時貼上啟用時間；超期的溶液要及時更換。使用過程中，懷疑污染到溶液時或配血結(jié)果可疑時，必須更新該溶液。8．受血者標本有效期為三天；若受血者抽取標本后，輸用過血液或血液制品，且輸用時間超過12 小時的，必須重新采集標本。2%紅細胞懸液要求準確，必要時用生理鹽水洗滌紅細胞后重新配制。9．進行交叉配血前逐項核對輸血申請單、受血者和供血者血樣，復查受血者和供血者ABO血型（正、反定型），并常規(guī)檢查患者Rh（D）血型，正確無誤時可進行交叉配血。10．操作過程中，①必須先排好試管，并做好標記；②每進行一步操作，必須進行一次核對。11．結(jié)果判斷必須先肉眼觀察，再進行顯微鏡觀察。注意觀察弱凝集和排除非特異性凝集。12．交叉配血試驗中發(fā)現(xiàn)有不配合時，首先應考慮受血者和供血者的ABO血型和Rh(D)血型定型是否錯誤，必要時進行抗體篩檢。其次，應注意有無特異性同種抗體，特異性未知的同種抗體存在，或者患者的血清在室溫37℃或抗球蛋白血清中凝集所有的其他紅細胞，造成交叉配血的困難，應進一步作有關試驗進行鑒定。13．兩人值班時，交叉配血試驗由兩人互相核對；一人值班時，操作完畢后自己復核，并填寫配血試驗結(jié)果。（按“交叉配血核對制度”進行）。14．各供血者間需進行交叉配血；已經(jīng)輸注的血液不足24 小時的，供血者間也需進行交叉配血。15．交叉配血后的所標本加蓋后，冰箱保存不少于7 天。第 19 頁 共 19 頁
環(huán)評公示相關推薦
鄂ICP備17016276號-1