檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程(參考版)
2025-07-17 00:10本頁(yè)面
【正文】 第 19 頁(yè) 共 19 頁(yè)。14．各供血者間需進(jìn)行交叉配血；已經(jīng)輸注的血液不足24 小時(shí)的，供血者間也需進(jìn)行交叉配血。13．兩人值班時(shí)，交叉配血試驗(yàn)由兩人互相核對(duì)；一人值班時(shí)，操作完畢后自己復(fù)核，并填寫配血試驗(yàn)結(jié)果。12．交叉配血試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)有不配合時(shí)，首先應(yīng)考慮受血者和供血者的ABO血型和Rh(D)血型定型是否錯(cuò)誤，必要時(shí)進(jìn)行抗體篩檢。11．結(jié)果判斷必須先肉眼觀察，再進(jìn)行顯微鏡觀察。9．進(jìn)行交叉配血前逐項(xiàng)核對(duì)輸血申請(qǐng)單、受血者和供血者血樣，復(fù)查受血者和供血者ABO血型（正、反定型），并常規(guī)檢查患者Rh（D）血型，正確無誤時(shí)可進(jìn)行交叉配血。8．受血者標(biāo)本有效期為三天；若受血者抽取標(biāo)本后，輸用過血液或血液制品，且輸用時(shí)間超過12 小時(shí)的，必須重新采集標(biāo)本。7．% 氯化鈉溶液?jiǎn)⒂脮r(shí)，及時(shí)貼上啟用時(shí)間；超期的溶液要及時(shí)更換。，可能是標(biāo)本中含有肝素。5．在冬天氣溫極低的情況下，操作交叉配血試驗(yàn)，某些病人血清（漿）中可能含有寒冷凝集素等因子而導(dǎo)致假陽性的結(jié)果出現(xiàn)。4．加做輔助性抗球蛋白試驗(yàn)是為了增加檢測(cè)AntiK抗體的敏感度，對(duì)檢測(cè)其他的抗體無幫助。2．檢驗(yàn)人員必須熟悉操作步驟，尤其是凝聚胺所引起的凝集反應(yīng)，更要特別注意。2．如急需輸血但一時(shí)無同型血液，作異型配血時(shí)（指O型血輸給A，B或AB型，或A，B型血輸給AB型時(shí)），主側(cè)無溶血及凝集，但次側(cè)必然有凝集或溶血。如果沒有凝集反應(yīng)，可能是假陰性，輔助性抗球蛋白試驗(yàn)必須重做。如果沒有凝集反應(yīng)，為了確保輸血的安全性，須再各添加1滴已知致敏性紅細(xì)胞至所有沒有凝集的試管中，混勻，3400rpm離心1分鐘。11．3400rpm離心1分鐘。9．用生理鹽水洗紅細(xì)胞3—5次，并把最后一次上清液完全倒干。如有凝集反應(yīng)，表示不合，此供血者的血液不適合病人使用；如無凝集反應(yīng)，表示供血者的血液適合病人輸注。7．各滴入2滴*3復(fù)懸液，并輕輕混勻，觀察結(jié)果。重做后仍然沒有凝集現(xiàn)象出現(xiàn)，可能試劑失效。5．4．3．(16)[操作步驟]1． 取出3支試管分別標(biāo)記主，次及對(duì)照測(cè)試：主測(cè)管：加入病人血清（漿）2滴，再加入供血者35%紅細(xì)胞懸液1滴，次測(cè)管：加入供血者血清（漿）2滴，再加入病人35%紅細(xì)胞懸液1滴，對(duì)照管：加入2滴*4陽性對(duì)照血清，再加入供血者35%紅細(xì)胞懸液1滴。152ml(40)12 鹽水（滴） 壓積紅細(xì)胞（滴）懸液濃度（%）2．2% 紅細(xì)胞懸液：用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞3次。[標(biāo)本收集和準(zhǔn)備]1．抽取受血者靜脈血34ml（操作中小心防止紅細(xì)胞破損），放入一已貼標(biāo)簽干燥潔凈的試管中為血清管(也可用EDTAK2抗凝血液)，并將注射器中余下的少量血液配成2%紅細(xì)胞生理鹽水懸液，放入另一已貼標(biāo)簽干燥潔凈的試管中為紅細(xì)胞懸液管。3．抗人IgG血清低溫冰箱保存。[試劑保存和穩(wěn)定性]1．凝聚胺試劑須保存在225℃。4 （3）復(fù)懸液：含檸檬酸鈉，葡萄糖及穩(wěn)定劑。3 聚胺試劑（1）質(zhì)溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸2鈉及穩(wěn)定劑。2 % 氯化鈉溶液：準(zhǔn)確稱取氯化鈉（AR） g，用蒸餾水溶解并定容至 1000 ml。交叉配血試驗(yàn)是在鹽水介質(zhì)的基礎(chǔ)上加入凝聚胺，檢測(cè)供患之間是否相合，患者血清（漿）中是否含有具臨床意義的紅細(xì)胞異體抗體。而由凝聚胺所引起的非免疫性紅細(xì)胞凝集反應(yīng)可被后來加入的復(fù)懸液所中和而散開，如有免疫反應(yīng)，凝集就不會(huì)散開，為陽性反應(yīng)。第十三節(jié) 交叉配血操作規(guī)程交叉配血試驗(yàn) （凝聚胺法）[原理]凝聚胺試驗(yàn)是利用低離子溶液促進(jìn)紅細(xì)胞抗原與血清（漿）中的抗體反應(yīng)，再利用凝聚胺引起紅細(xì)胞間非免疫性的凝集，讓已有抗體（IgG）反應(yīng)的紅細(xì)胞間的距離縮短。 分型血清效價(jià)太低、親和力不強(qiáng)； 受檢者紅細(xì)胞上抗原位點(diǎn)過少或抗原性減弱； 受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗A/抗B抗體； 各種原因引起的紅細(xì)胞溶解，誤判為不凝集。 按理IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以6℃為最強(qiáng)，但為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍在室溫內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，36℃可反應(yīng)減弱。 分型血清質(zhì)量性能符合要求，用畢后應(yīng)放置冰箱保存，以免細(xì)菌污染。陰性指視野中紅細(xì)胞程均勻散布，無凝集顆粒，顯微鏡下紅細(xì)胞分散存在，無聚集靠攏現(xiàn)象。用玻棒將紅細(xì)胞與抗體充分混勻，室溫下放置18～30min（為防止天氣干燥造成玻片干涸，可把試驗(yàn)玻片放在有濕紗布的蓋盤中）。 抗血清：在玻片蠟筆圈內(nèi)按標(biāo)記所示分別滴加抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)抗血清各一滴。標(biāo)準(zhǔn)抗A、抗B血清。（正定型法）根據(jù)IgM類特異性血型抗體與紅細(xì)胞上特異性抗原結(jié)合能夠出現(xiàn)凝集反應(yīng)的原理，用已知IgM類特異性標(biāo)準(zhǔn)抗血清與被檢紅細(xì)胞在室溫條件下反應(yīng)，若被檢紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，表明被檢紅細(xì)胞上有與血型抗體對(duì)應(yīng)的抗原。簡(jiǎn)易凝血活酶生成試驗(yàn)（STGT） 【 標(biāo) 本 】 ，混勻，即成溶血液，備用。 2. 水溫箱控制在37℃177。 【 試 劑 】 1. 組織凝血活酶浸出液； 2. ； 【 方法與操作 】 見《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第二版）。 3. 本試驗(yàn)較試管法全血凝血時(shí)間敏感，能檢出因子Ⅷ：C＜25％輕型血友病。 【 附 注 】 1. 標(biāo)本應(yīng)及時(shí)檢測(cè)，最遲不超過2h。 【 試 劑 】 市售成套試劑。 2. 水浴箱溫度要恒定，過高或過低，可影響結(jié)果。 【 方法與操作 】 試管法、硅管法操作參見《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第二版）。及時(shí)與臨床聯(lián)絡(luò)。樣品GLU含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。：參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評(píng)。：即開即用的，無需特殊準(zhǔn)備。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請(qǐng)立即用清水徹底沖洗，必要時(shí)到醫(yī)院就診。：試劑混濁變色或空白吸光度值，不能繼續(xù)使用。：：奧林巴斯AU600生化分析儀：四川邁克公司試劑參與反應(yīng)成份：R1：酚（）R2：GOD（≥35KU/L）、POD（≥5KU/L）、4AAP（）： 2～8℃密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。：血清或NaF抗凝的血漿。 第十節(jié) 血液葡萄糖測(cè)定技術(shù)操作規(guī)程：檢測(cè)血清或血漿中葡萄糖的含量，為臨床對(duì)相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對(duì)健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)提供重要的參考價(jià)值。 【 操 作 】 參看apoA1測(cè)定。波長(zhǎng)340nm，本法批間CV＜5%。 【 標(biāo) 本 】 血清。 【 試 劑 】 市售試劑盒，試劑2~8℃保存，不同批號(hào)試劑不能混合使用，抗血清效價(jià)不應(yīng)低於
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