質(zhì)粒提取及酶切鑒定-資料下載頁
2025-05-26 18:28本頁面
【正文】 勻。冰上放置 5 min。 ? （ 4） 加 150 μL 預(yù)冷的溶液 Ⅲ ，加蓋后顛倒 5次混勻，冰上放置 15 min。 13 000 r/min離心 5 min， 取 400 μL 上清液移入另一離心管中。 ? （ 5） 向上清液中加入等體積苯酚 /氯仿，震蕩混勻， 13 000 r/min離心 2 min， 300 μL 上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。 ? （ 6） 向上清液中加入等體積無水乙醇，混勻，室溫放置 2 min。離心 5 min，倒去上清乙醇溶液，將離心管倒扣在吸水紙上，吸干液體。 ? （ 7） 加入 1 mL 70 %乙醇，震蕩并離心， 13 000 r/min離心 2 min，倒去上清液，晾干，加入 20 μL 的 TE緩沖液，使 DNA完全溶解，待用。 DNA的酶切鑒定 ? 取一只 EP管加入以下試劑： 酶切混合液： 15 μL 質(zhì)粒 DNA： 5 μL 混勻后，置 37 ℃ 過夜保溫，反應(yīng)結(jié)束后 4 ℃ 放置備用。
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