質(zhì)粒提取、定量與酶切鑒定-資料下載頁(yè)
2025-05-26 18:28本頁(yè)面
【正文】 ： 電壓 100v； 30min ? 結(jié)果觀察： 凝膠成像儀 瓊脂糖凝膠電泳操作 瓊脂糖凝膠電泳上樣 1： DNA Marker（ 5 ?l ） 2：提取的質(zhì)粒 DNA （ 5 ?l ） 3：質(zhì)粒 DNA酶切產(chǎn)物 （ 10 ?l ） + 1 2 3 4 每組上 2個(gè)樣品 DNA Marker (ladder) Loading Buffer 上樣緩沖液 ? EDTA ? 甘油 …………… 增大溶液密度 ? 溴酚藍(lán) ………… 指示劑 ? 二甲苯胺藍(lán) …… 指示劑 組成 , %濃度的膠中， 遷移率 溴酚藍(lán) =300bp 二甲苯胺藍(lán) =4kbp ?染色 ?溴化乙錠 (Ethidium Bromide， EB) :3,8二氨基 5乙基 6苯基菲啶溴鹽，能插入 DNA分子堿基對(duì)之間并與之結(jié)合 ,在紫外光照射下呈現(xiàn)紅橙熒光 , ?優(yōu)點(diǎn)： 染色操作簡(jiǎn)便，快速 ； 靈敏度高 ?缺點(diǎn)： 有致癌性 (使用時(shí)一定要戴手套 ) 1 2 M 3 4 5 6 7 5000 3000 2022 1000 … bp M: DNA Marker DL5000 1. PCR 產(chǎn)物 。 2. PCR 產(chǎn)物 3. 質(zhì)粒 DNA。 4. 質(zhì)粒 DNA 5. 酶切產(chǎn)物 。 6. 酶切產(chǎn)物 結(jié)果分析
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