質(zhì)粒dna的提取和鑒定-資料下載頁(yè)
2024-10-17 10:27本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】掌握堿裂解法提取質(zhì)粒的方法。了解質(zhì)粒酶切鑒定原理。法，質(zhì)粒DNA釋放法；酸酚法等。所有分離質(zhì)粒DNA的方法都包括3個(gè)基本步驟：培。選擇哪一種方法主要取決于以下幾個(gè)因素：。遷移速度與相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)值成反比關(guān)系。此，凝膠電泳不僅可分離不同相對(duì)分子質(zhì)量的DNA，Eppendorf管，快速顛倒5次，混勻內(nèi)容物，1ml70%乙醇洗滌質(zhì)粒DNA沉淀，振蕩并離心，加2μL的反應(yīng)中止液。EB是誘變劑，配制和使用EB染色液時(shí)，應(yīng)
【正文】 加 2μL 的反應(yīng)中止液。 電泳： 1. 1％ Agrose gel的制備 2. 上樣 3. 電泳 4. 紫外燈下觀(guān)察和拍照 思考題 染色體 DNA與質(zhì)粒 DNA分離的主要依據(jù)是什么？ 參考答案 純化 DNA的方法主要依據(jù)染色體 DNA比質(zhì)粒DNA分子大得多，而且染色體 DNA被斷裂成線(xiàn)狀分子，但質(zhì)粒 DNA為共價(jià)閉環(huán)結(jié)構(gòu)，當(dāng)加熱或用酸、堿處理 DNA溶液時(shí)，線(xiàn)狀染色體 DNA容易發(fā)生變性，共價(jià)閉環(huán)的質(zhì)粒 DNA在冷卻和回到中性 pH時(shí)即恢復(fù)其天然構(gòu)象 注意 ? EB是誘變劑，配制和使用 EB染色液時(shí)，應(yīng)帶乳膠手套或一次性手套，并且不要將該染色液灑在桌面或地面上，凡是沾污 EB的器皿或物品，必須進(jìn)行清洗或棄去
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