質(zhì)粒dna的分離、純化-資料下載頁
2025-05-10 23:02本頁面
【正文】 A發(fā)生酸解 1. 菌體老化 2. 堿裂解不充分 3. 菌體中無質(zhì)粒 4. 溶液使用不當(dāng) 1. 請涂布平板培養(yǎng)后，重新挑選新菌落進行液體培養(yǎng) 2. 可減少菌體用量或增加溶液的用量 3. 不要頻繁轉(zhuǎn)接，每次接種時應(yīng)接種單菌落。檢查抗生素使用濃度是否正確。 4. 溶液 Ⅱ 在溫度較低時可能出現(xiàn)渾濁，臵于 37℃ 保溫片刻直至溶解為清亮的溶液 。 五、質(zhì)粒 DNA提取常見問題 ?問題一：未提出質(zhì)?；蛸|(zhì)粒得率較低，如何解決？ 原因 對 策 1. 混有蛋白 2. 混有 RNA 3. 混有基因組 DNA 1. 不要使用過多菌體。重新純化DNA，去除蛋白、多糖、多酚等雜質(zhì) 2. 加入 RNaseA室溫放臵一段時間 3. 加入溶液 II 和 III后 防止劇烈振蕩，可能把基因組 DNA剪切成碎片從而混雜在質(zhì)粒中。細菌培養(yǎng)時間過長會導(dǎo)致細胞和 DNA的降解，培養(yǎng)時間不要超過 16小時。 五、質(zhì)粒 DNA提取常見問題 ?問題二：質(zhì)粒純度不高，如何解決？ 原因 對 策 1. 簡要敘述溶液 Ⅰ 、溶液 Ⅱ 和溶液 Ⅲ 的作用，以及實驗中 分別加入上述溶液后，反應(yīng)體系出現(xiàn)的現(xiàn)象及其成因。 2. 染色體 DNA與質(zhì)粒 DNA分離的主要依據(jù)是什么？ 六、問題與討論
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