核酸的分離純化ppt課件-資料下載頁(yè)
2024-11-03 23:11本頁(yè)面
【正文】 μg/μl) = OD 260 核酸稀釋倍數(shù) 40/1000。 e．分析純度。 A：測(cè) DNA： 純的 DNA樣品 OD260/OD280應(yīng)為 ， OD260m／OD230應(yīng)大于 。 1) OD260/OD280大于 ，表明有 RNA污染。 2) 小于 ，表明樣品中存在蛋白質(zhì)或酚污染； 3) OD260/OD230小于 ，表明溶液中有殘存的鹽和小分子雜質(zhì)，如核苷酸、氨基酸、酚等。 注： 可能 出現(xiàn)既含蛋白質(zhì)又含 RNA的 DNA溶液比值為。 測(cè)定結(jié)果分析 B：測(cè) RNA 純的 RNA樣品其 OD260／ OD280應(yīng)介于 間， OD260/OD230比值應(yīng)大于 。 1）若 RNA樣品 OD260/OD280比值太小，說(shuō)明有蛋白質(zhì)或酚的污染； 2）比值大于 ，可能被異硫氰酸胍等污染； 3） OD260/OD230比值小于 鹽存在。 溴乙錠熒光法測(cè)定核酸的含量 原理： DNA、 RNA在熒光染料溴乙錠 (EB)嵌入堿基平面之間后， DNA、 RNA樣品在紫外光激發(fā)下，可發(fā)出紅色熒光，熒光強(qiáng)度與核酸含量成正比。使用一系列已知的不同濃度 DNA溶液作標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，可比較出被測(cè) DNA溶液濃度。 注意： 此法的比較主要基于目測(cè)，是估計(jì)水平。 Home 核酸的保存 (1) 對(duì) DNA ① DNA樣品溶于 TE， 4 ℃ 或 20 ℃ 保存； ② 長(zhǎng)期保存樣品中可加入 1滴氯仿。 (2) 對(duì) RNA ① RNA樣品溶于 mol/L NaAc ()或雙蒸滅菌水中， 70 ℃ 保存 。 ② 長(zhǎng)期保存可以沉淀形式貯于乙醇中 。 ③ 在 RNA溶液中，加 1滴 mol/L VRC(氧釩核糖核苷復(fù)合物 )凍貯于 70℃, 可保存數(shù)年。 Home
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