酶的提取與分離純化(1)-資料下載頁(yè)
2025-05-26 22:01本頁(yè)面
【正文】 陽(yáng)離子交換劑 : 電荷基團(tuán)（－） , 反離子（＋） 電荷基團(tuán) 陰離子交換劑 : 電荷基團(tuán)（＋） , 反離子（－） 如： DEAE纖維素， CMSepharose ★ 5疏水層析 （ Hydrophobic Interaction Chromatography, HIC） 自學(xué) 從分離純化的機(jī)制看，屬吸附層析類(lèi)。利用疏水層析介質(zhì)和蛋白質(zhì)分子都具有一定的疏水性質(zhì) ，根據(jù)被分離成分與固定相之間疏水力大小的不同而進(jìn)行分離。 6 親和層析 (Affinity Chromatography) 自學(xué) 6 親和層析 (Affinity Chromatography) 自學(xué) 由吸附層析發(fā)展起來(lái)的 ，是從復(fù)雜混和物中純化蛋白質(zhì)的最好方法。 又稱(chēng)： 功能層析 （ function chromatography） 生物專(zhuān)一吸附 （ biospecific adsorption） 選擇層析 （ selective chromatography） 7 高效（壓）液相層析 （ HPLC： High Performance（ pressure） Liquid Chromatography ） 特點(diǎn)： 使用的固相支持劑顆粒很細(xì)，表面積很大 ,因而分辨率很高 。溶劑系統(tǒng)采用高壓，因此洗脫速度增大。 固定相 （柱填料） ： 常用堅(jiān)硬、耐高壓，粒度小的硅膠。 ★ ① 基本原理 HPLC是利用樣品中的溶質(zhì)在 固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù) 的不同，進(jìn)行連續(xù)的無(wú)數(shù)次的交換和分配而達(dá)到分離的過(guò)程。 許多類(lèi)型的柱層析都可用 HPLC來(lái)代替，如離子交換層析、吸附層析、凝膠過(guò)濾等。 ★ ② 分類(lèi) 按溶質(zhì) （樣品） 在兩相分離過(guò)程的物理化學(xué)性質(zhì)分類(lèi)： 親和色譜：親和力 吸附色譜：吸附力 離子交換色譜： 離子交換能力 凝膠色譜：分子大小而引起的體積排阻 分配色譜：分配系數(shù) ★ ③ 色譜儀組成 1）進(jìn)樣系統(tǒng) 2）輸液系統(tǒng) 3）分離系統(tǒng) 4）檢測(cè)系統(tǒng) 5）數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) ★ 作業(yè) :1膜分離的原理 ﹑ 有哪些類(lèi)型 2層析法的原理 ﹑ 有哪些類(lèi)型
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