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酶的提取與分離純化(1)-資料下載頁

2025-05-26 22:01本頁面
  

【正文】 陽離子交換劑 : 電荷基團(-) , 反離子(+) 電荷基團 陰離子交換劑 : 電荷基團(+) , 反離子(-) 如: DEAE纖維素, CMSepharose ★ 5疏水層析 ( Hydrophobic Interaction Chromatography, HIC) 自學(xué) 從分離純化的機制看,屬吸附層析類。利用疏水層析介質(zhì)和蛋白質(zhì)分子都具有一定的疏水性質(zhì) ,根據(jù)被分離成分與固定相之間疏水力大小的不同而進行分離。 6 親和層析 (Affinity Chromatography) 自學(xué) 6 親和層析 (Affinity Chromatography) 自學(xué) 由吸附層析發(fā)展起來的 ,是從復(fù)雜混和物中純化蛋白質(zhì)的最好方法。 又稱: 功能層析 ( function chromatography) 生物專一吸附 ( biospecific adsorption) 選擇層析 ( selective chromatography) 7 高效(壓)液相層析 ( HPLC: High Performance( pressure) Liquid Chromatography ) 特點: 使用的固相支持劑顆粒很細,表面積很大 ,因而分辨率很高 。溶劑系統(tǒng)采用高壓,因此洗脫速度增大。 固定相 (柱填料) : 常用堅硬、耐高壓,粒度小的硅膠。 ★ ① 基本原理 HPLC是利用樣品中的溶質(zhì)在 固定相和流動相之間分配系數(shù) 的不同,進行連續(xù)的無數(shù)次的交換和分配而達到分離的過程。 許多類型的柱層析都可用 HPLC來代替,如離子交換層析、吸附層析、凝膠過濾等。 ★ ② 分類 按溶質(zhì) (樣品) 在兩相分離過程的物理化學(xué)性質(zhì)分類: 親和色譜:親和力 吸附色譜:吸附力 離子交換色譜: 離子交換能力 凝膠色譜:分子大小而引起的體積排阻 分配色譜:分配系數(shù) ★ ③ 色譜儀組成 1)進樣系統(tǒng) 2)輸液系統(tǒng) 3)分離系統(tǒng) 4)檢測系統(tǒng) 5)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) ★ 作業(yè) :1膜分離的原理 ﹑ 有哪些類型 2層析法的原理 ﹑ 有哪些類型
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