堿性磷酸酶的分離純化-袁野-資料下載頁
2025-05-26 18:01本頁面
【正文】 次） 7. 按 MODE 鍵選擇吸光度測定模式（ ABS燈亮），數(shù)碼顯示自動轉(zhuǎn)換為吸光度值 。 8. 拉動比色杯架的拉桿，使測定杯進(jìn)入光路，從數(shù)碼顯示上即可讀出樣品的吸光度 9. 比色完畢后，關(guān)上電源開關(guān)，取出比色杯，將比色杯暗箱蓋好，清洗比色杯并晾干。 1. 分光光度計必須放置在固定而且不受振動的儀器臺上 ， 不能隨意搬動 ， 嚴(yán)防振動 ， 潮濕和強光直射 。 分光光度計內(nèi)放有硅膠干燥袋 ， 需定期更換 。 2. 開機(jī)預(yù)熱 15分鐘 ， 待儀器穩(wěn)定以后再開始進(jìn)行測定 。 每年需定期進(jìn)行波長校準(zhǔn) 。 3. 必須保證測試樣品為澄清的溶液 ， 肉眼看不出來的輕微濁度也能引起讀數(shù)的嚴(yán)重誤差 ， 必要時可通過離心來去除微粒 。 檢測細(xì)菌培養(yǎng)液的光吸收時例外 。 4. 從冰箱中取出的樣品一定要恢復(fù)到室溫后再進(jìn)行檢測，否則低溫會使水蒸汽在比色皿表面凝結(jié)，引起讀數(shù)持續(xù)漂移上升。 使用分光光度計的注意事項 5. 比色杯盛液量以達(dá)到杯容積 2/3左右為宜 。 比色杯的外表面 ， 則必須先用濾紙吸干 ， 再用擦鏡紙或綢布擦凈 ， 然后才能把比色杯放入比色杯槽內(nèi) 。 移動比色杯槽要輕 ， 以防溶液濺出 ， 腐蝕機(jī)件 。 6. 不可用手拿比色杯的光學(xué)面 ， 禁止用毛刷等物摩擦比色杯的光學(xué)面 。 用完比色杯后應(yīng)立即用自來水沖洗 ， 再用蒸餾水洗凈 ，也可用甲醇沖洗 。 洗滌后應(yīng)把比色杯倒置晾干或用濾紙條將水吸去 ， 再用擦鏡紙輕輕揩干 。 7. 一定要保證比色皿正確放入光路后再進(jìn)行測量 。 8. 一般應(yīng)把溶液濃度盡量控制在吸光度值 ～ 測定 。 這樣所測得的讀數(shù)誤差較小 。 如吸光度不在此范圍內(nèi) ，可調(diào)節(jié)樣品溶液濃度 ， 適當(dāng)稀釋或加濃 ， 使其在儀器準(zhǔn)確度較高的范圍內(nèi)進(jìn)行測定 。 A樣 A標(biāo) ╳ 標(biāo)準(zhǔn)管中酚含量 ╳ 稀釋倍數(shù) A樣 A標(biāo) ╳ 標(biāo)準(zhǔn)管中蛋白含量 ╳ 稀釋倍數(shù) 酶活性單位計算： 蛋白質(zhì)含量計算 : 比活性計算 AKP比活性 = 每毫升樣品的酶活性單位 每毫升樣品的蛋白毫克數(shù) 純化倍數(shù) = 每步比活性 初提液比活性（ A液體） 總活力 =酶活性單位 體積 得率 = 每步總活力 初提液總活力（ A液體） 分離 階段 蛋白質(zhì) mg/ml 酶活性 U/ml 比活性 U/mg 純化 倍數(shù) 得率 A B C D
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