蛋白質(zhì)的分離純化-資料下載頁(yè)
2024-11-04 05:30本頁(yè)面
【正文】 葉酸,四氫葉酸(y232。 suān),嘌呤(pi224。ol236。ng)核苷酸,二氫葉酸復(fù)原酶,一碳單位,磺胺類藥物,磺胺類藥物的抗菌機(jī)理：,TMP,第五十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。,★抑制劑與藥物(y224。ow249。)開(kāi)發(fā) Kcat型不可逆抑制劑的專一性程度很強(qiáng)，前景廣闊 底物類似物型的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑最易開(kāi)發(fā) 過(guò)渡態(tài)底物類似物型藥物最具價(jià)值(高效\特異),第五十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。,研究抑制劑對(duì)酶的作用有重大的意義： 〔1〕藥物作用機(jī)理和抑制劑型藥物的設(shè)計(jì)與開(kāi)發(fā)； 〔2〕了解生物體的代謝途徑(tj236。ng)，進(jìn)行人為調(diào)控或代謝控制發(fā)酵； 〔3〕通過(guò)抑制劑試驗(yàn)研究酶活性中心的構(gòu)象及其化學(xué)功能基團(tuán)，不僅可以設(shè)計(jì)藥物，而且也是酶工程和化學(xué)修飾酶、酶工業(yè)的根底。,第五十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。,1．最適溫度及影響(yǐngxiǎng)因素 ①提高溫度，加快反響速度。 ②提高溫度，酶變性失活。 溫度系數(shù)Q10：溫度升高10℃，反響速度與原來(lái)的反響速度之比，大多數(shù)酶的Q10一般為1~2。 溫血?jiǎng)游锏拿福钸m溫度35℃—40℃， 植物酶最適溫度40℃—50℃， 細(xì)菌Taq DNA聚合酶70℃。 最適溫度不是酶的特征常數(shù)，它與底物種類、作用時(shí)間、pH、離子強(qiáng)度 等因素有關(guān)。,四、 溫度對(duì)酶反響(fǎny236。ng)的影響,第五十八頁(yè)，共六十七頁(yè)。,第五十九頁(yè)，共六十七頁(yè)。,酶的穩(wěn)定性溫度 在某一時(shí)間范圍(f224。nw233。i)內(nèi)，酶活性不降低的最高溫度稱該酶的穩(wěn)定性溫度。 酶濃度高、不純、有底物、抑制劑和保護(hù)劑會(huì)使穩(wěn)定性溫度增高。 酶的保存： ①液體酶制劑可以利用上述5種因素中的幾種，低溫短暫保存。 ②凍干粉可在在低溫冰箱中較長(zhǎng)期保存。,第六十頁(yè)，共六十七頁(yè)。,1. pH影響酶活力的因素 ①影響酶蛋白構(gòu)象，過(guò)酸或過(guò)堿會(huì)使酶變性。 ②影響酶和底物分子解離狀態(tài)(zhu224。ngt224。i)，尤其是酶活性中心的解離狀態(tài)(zhu224。ngt224。i)，最終影響ES形成。 ③影響酶和底物分子中另外一些基團(tuán)解離，這些基團(tuán)的離子化狀態(tài)影響酶的專一性及活性中心構(gòu)象。,五、 pH對(duì)酶促反響速度(fǎn y236。ng s249。 d249。)的影響,第六十一頁(yè)，共六十七頁(yè)。,2．酶的最適pH和穩(wěn)定性pH 最適pH：使酶促反響速度(fǎn y236。ng s249。 d249。)到達(dá)最大時(shí)的介質(zhì)pH。,第六十二頁(yè)，共六十七頁(yè)。,最適pH與底物種類、濃度及緩沖液成分有關(guān)。 幾種酶的最適pH，見(jiàn)P379表97。 ★雖然大局部酶的pH—酶活曲線是鐘形，但也有半鐘形甚至(sh232。nzh236。)直線形。,第六十三頁(yè)，共六十七頁(yè)。, 無(wú)機(jī)離子的激活作用 〔1〕金屬(jīnshǔ)離子：K+ 、Na+、Mg2+ 、Zn2+、Fe 2+ 、Ca2+ 〔2〕陰離子：Cl、Br 、PO43 〔3〕氫離子 ★不同的離子激活不同的酶。 ★不同離子之間有拮抗作用和可替代作用，如Na+與K+、Mg2+與Ca2+之間常常拮抗，但Mg2+與Mn2+?？商娲?★ 激活劑的濃度要適中，過(guò)高往往有抑制作用，1~50mM,六、 激活劑對(duì)酶反響(fǎny236。ng)的影響,第六十四頁(yè)，共六十七頁(yè)。, 簡(jiǎn)單有機(jī)分子的激活作用 ①?gòu)?fù)原劑〔如Cys、復(fù)原型谷胱甘肽〕能激活某些活性中心含有—SH的酶。 ②金屬螯合劑〔EDTA〕能去除酶中重金屬離子(l237。zǐ)，解除抑制作用。 蛋白酶對(duì)酶原的激活,第六十五頁(yè)，共六十七頁(yè)。,THANK YOU,第六十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),第9章 酶促反響動(dòng)力學(xué)。 酶的活力單位〔U〕。當(dāng)[S]Km時(shí)。[S]Km 時(shí)：。 LineweaverBurk 雙倒數(shù)作圖法?！趯?shí)踐上，可以為治療人類和畜禽傳染病而設(shè)計(jì)療效更高的抗菌抗病毒藥物。P374 反響式：磷?；瘎┡c膽堿酯酶形成磷酰化膽堿酯酶。〔2〕了解生物體的代謝途徑，進(jìn)行人為調(diào)控或代謝控制發(fā)酵。 簡(jiǎn)單(jiǎndān)有機(jī)分子的激活作用。THANK YOU,第六十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。,
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