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蛋白質分離純化及鑒定-資料下載頁

2025-05-13 06:26本頁面
  

【正文】 l 5 ml AP 60 ul 25 ul 聚丙烯酰胺凝膠配制 操作步聚 樣品處理 適量濃度蛋白溶液加入 1 上樣緩沖液混勻, 95℃ 水浴中處理 5分鐘。 加樣 用微量進樣器取 1015 ?l上述混合液,通過電極緩沖液,小心地將樣品加到凝膠凹形樣品槽底部。 電泳 將電泳儀的正極與下槽連接,負極與上槽連接,打開電泳儀開關,開始時電流為 10 mA,待樣品進入分離膠后,將電流調至 2030 mA,當溴酚藍染料距硅膠框 1 cm時,停止電泳,關閉電源。 染色與脫色 電泳結束后,取下凝膠模,卸下膠框,用凝膠鏟小心撬開短玻璃板, 從凝膠板上切下一角作為加樣標記 ,在兩側溴酚藍染料區(qū)帶中心,加入染色液染色 12 h,再用脫色液脫色,直至蛋白質區(qū)帶清晰,即可計算相對遷移率 結果處理 各蛋白質樣品區(qū)帶中心與加樣端的距離 (cm),按下式計算相對遷移率 mR: 蛋白質樣品距加樣端遷移距離 (cm) 溴酚藍區(qū)帶中心距加樣端距離 (cm) 相對遷移率 mR=
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