【總結(jié)】限制性酶切、連接與轉(zhuǎn)化一、酶切1、核酸酶的分類:核酸酶:通過切割相鄰的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵,從而導(dǎo)致核酸分子多核核苷酸鏈發(fā)生水解斷裂的蛋白酶。核酸酶可分為兩類:核酸外切酶(exonuclease)是從核酸的一端開始,一個(gè)接一個(gè)把核苷酸水解下來;核酸內(nèi)切酶(endonu
2025-01-05 19:51
【總結(jié)】實(shí)驗(yàn)54感受態(tài)細(xì)胞的制備、質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化、提取與酶切鑒定制作人:劉如石一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?、通過本實(shí)驗(yàn)了解和掌握氯化鈣法制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞和質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化受體菌細(xì)胞的原理與技術(shù);2、了解質(zhì)粒DNA的特性,掌握堿裂解法從大腸桿菌細(xì)
2025-01-05 02:56
【總結(jié)】質(zhì)粒提取和酶切分析中心實(shí)驗(yàn)室質(zhì)粒DNA的限制性內(nèi)切酶酶切分析1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)和掌握限制性內(nèi)切酶的特性、掌握對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行限制性內(nèi)切酶酶切的原理和方法,并理解限制性內(nèi)切酶是DNA重組技術(shù)的關(guān)鍵工具。?感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化效率=轉(zhuǎn)化子總數(shù)/感受態(tài)細(xì)胞總數(shù)2.相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)
2025-05-26 18:28
【總結(jié)】限制性核酸內(nèi)切酶制作人:郜原日期:2022-3-31簡(jiǎn)介限制性核酸內(nèi)切酶(restrictionendonuclease):識(shí)別并切割
2025-01-05 20:31
【總結(jié)】實(shí)驗(yàn)一質(zhì)粒的提取(堿法)1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.實(shí)驗(yàn)原理3.實(shí)驗(yàn)儀器、材料與試劑4.實(shí)驗(yàn)步驟5.實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解堿法提取質(zhì)粒的原理;?掌握堿法提取質(zhì)粒的方法。實(shí)驗(yàn)原理?質(zhì)粒是一種細(xì)菌染色體外的、具有自主復(fù)制能力的、共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)的小型DNA分子。堿裂解
2025-05-03 18:24
【總結(jié)】第六章質(zhì)粒(plasmid)質(zhì)粒:是指存在于細(xì)菌、真菌等微生物細(xì)胞中、獨(dú)立于染色體外、能進(jìn)行自我復(fù)制的遺傳因子。a、可以整合到染色體上,又可以游離于染色體外(附加體)b、質(zhì)粒通常是共價(jià)、閉合、環(huán)狀雙鏈DNA(covalentclosedcircularDNA,簡(jiǎn)稱cccDNA),
2025-05-04 12:55
【總結(jié)】質(zhì)粒DNA的制備限制性內(nèi)切酶切割重組質(zhì)粒朱文博中山醫(yī)學(xué)院基因克隆?定義:經(jīng)無性繁殖獲得基因許多相同拷貝的過程。通常是將單個(gè)基因?qū)胨拗骷?xì)胞中復(fù)制而成?;蚬こ?定義:實(shí)現(xiàn)基因克隆所采用的方法及相關(guān)的工作統(tǒng)稱為基因工程,又稱重組DNA技術(shù)。?基因克隆示意圖
2025-01-14 11:10
【總結(jié)】質(zhì)粒DNA的提取、純化、酶切、電泳、紫外分光光度法定量測(cè)定朱文博中山醫(yī)學(xué)院?基因克隆示意圖載體DNA(限制性內(nèi)切酶切開)目的基因+宿主細(xì)胞+重組體已轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞陽性克隆株繁殖表達(dá)分、切接轉(zhuǎn)篩基因工程?定義:
2025-05-26 07:01
【總結(jié)】第四節(jié)DNA限制酶切反應(yīng)和限制酶譜繪制一.DNA的限制酶反應(yīng)1.酶單位定義:使1μg某種DNA在最適反應(yīng)條件下和1小時(shí)內(nèi)完全酶切所需的限制酶活性。2.酶切反應(yīng)類型1)完全酶切SV40(5243
2025-01-05 02:55
【總結(jié)】質(zhì)粒三種提取方法的比較基因工程原理與技術(shù)實(shí)驗(yàn)部分:質(zhì)粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,大小從1-200kb不等,為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞中。質(zhì)粒主要發(fā)現(xiàn)于細(xì)菌、放線菌和真菌細(xì)胞中,它具有自主復(fù)制和轉(zhuǎn)錄能力,能在子代細(xì)胞中保持恒定的拷貝數(shù),并表達(dá)所攜帶的遺傳信息。
【總結(jié)】克隆載體基因載體是一類能自我復(fù)制的DNA分子,其中的一段DNA被切除而不影響其復(fù)制,可用以置換或插入外源(目的)DNA而將目的DNA帶入宿主細(xì)胞。常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體、病毒等基因工程載體的構(gòu)建必需應(yīng)用表達(dá)調(diào)控的基本理論知識(shí),應(yīng)用已知的調(diào)控序列進(jìn)行重組、改造?;蜉d體應(yīng)具備的條件:
2025-01-17 19:20
【總結(jié)】質(zhì)粒DNA的小量提取及檢測(cè)把有用目的DNA片段通過重組DNA技術(shù),送進(jìn)受體細(xì)胞中去進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)的工具叫載體(Vector)。細(xì)菌質(zhì)粒是重組DNA技術(shù)中常用的載體。質(zhì)粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,大小從1-200kb不等,為雙鏈、閉合、環(huán)狀DNA分子,并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞中。
2025-04-29 00:10
【總結(jié)】第一章工具酶主要內(nèi)容?一.限制性核酸內(nèi)切酶?二.其它工具酶?1.DNA連接酶?2.聚合酶?3.DNA修飾酶?4.細(xì)胞裂解酶一.限制性核酸內(nèi)切酶?定義與特點(diǎn)?核酸內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)?3.限制和修飾作用的分子機(jī)制???6.II
2025-01-20 12:53
【總結(jié)】第十一章酶的應(yīng)用諾維信可使清潔燃料的夢(mèng)想變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)成功的飼料用酶。如植酸酶可減少向環(huán)境中排放磷紡織精煉用酶洗滌劑酶酶增強(qiáng)牙膏的潔凈能力使用酶生產(chǎn)沒有反式脂肪酸的食用油和奶油提高啤酒質(zhì)量酶替代面包中的乳化劑用于面條的酶將成為一個(gè)有趣的應(yīng)用領(lǐng)域烘焙工
2025-01-05 19:52
【總結(jié)】Q&A?關(guān)于質(zhì)粒提取結(jié)果的分析預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果載體()123PETBlue質(zhì)粒DNA的瓊脂糖電泳(1%)Lane1:sample1Lane2:sample2Lane3:sample3一條帶雜帶預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果PETBlue質(zhì)粒DNA的瓊脂糖電泳(1%)