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質(zhì)粒的酶切ppt課件-閱讀頁(yè)

2025-06-10 00:15本頁(yè)面

　　

【正文】、純化 DNA片段 1. 在紫外燈下仔細(xì)切下含所需 DNA片段的膠條（小于）搗碎，置于。關(guān)于連接酶定義： ATP存在下，在 3’OH和 5’ P之間形成磷酸二酯鍵。策略：，載體脫磷，提高酶量不匹配粘端連接圖示匹配粘端連接圖示平端連接圖示 DNA片段的連接反應(yīng) 連接反應(yīng)一般在滅菌的 1. 10μl 體積反應(yīng)體系中：取載體 50100ng，加入一定比例的外源 DNA 分子（一般線性載體 DNA分子與外源 DNA分子摩爾數(shù)為 1∶ 11∶ 5），補(bǔ) ddH2O 至 8μl 。 4. 加入含 ATP的 10 Buffer 1μl 。 6. 稍加離心 ,1416℃ 連接 814hr

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