分子生物學(xué)復(fù)習(xí)資料(編輯修改稿)
2025-07-04 15:52 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 在結(jié)構(gòu)上，分子信標(biāo)大體上可以分為三部分：（1）、環(huán)狀區(qū)：一般由15～30個(gè)核苷酸組成，可以與靶分子特異結(jié)合；（2）、莖干區(qū)：一般由5～8個(gè)堿基對(duì)組成，在分子信標(biāo)與靶分子結(jié)合過(guò)程中可發(fā)生可逆性解離。（3）、熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)：熒光基團(tuán)一般連接在5ˊ端；淬滅基團(tuán)一般連接在3ˊ端，常用4（4二甲基氨基偶氮苯基）苯甲酸（DABCYL）作為淬滅基團(tuán)。根據(jù)Foerste理論，中心熒光能量轉(zhuǎn)移效率與兩者距離的6次方成反比。所以只有熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)之間達(dá)到一定的距離時(shí)才會(huì)產(chǎn)生熒光。 自由狀態(tài)時(shí)，分子信標(biāo)呈發(fā)卡式結(jié)構(gòu)，從而熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)相距較近（約7～10nm）。此時(shí)發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移，使熒光基團(tuán)發(fā)出的熒光被淬滅基團(tuán)吸收并以熱的形式散發(fā)，熒光幾乎完全被淬滅，熒光本底極低。當(dāng)分子信標(biāo)與靶分子結(jié)合時(shí)，熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)之間的距離加大，從而，分子信標(biāo)的熒光幾乎100%恢復(fù)。而且所檢測(cè)到的熒光強(qiáng)度與溶液中靶標(biāo)量成正比。 順?lè)礈y(cè)定實(shí)驗(yàn)：即順?lè)椿パa(bǔ)測(cè)驗(yàn)，比較順式和反式構(gòu)型個(gè)體的表型來(lái)判斷兩個(gè)突變是否發(fā)生在一個(gè)基因（順?lè)醋樱﹥?nèi)的測(cè)驗(yàn)，從而間接判定某個(gè)片段是否為獨(dú)立功能的編碼區(qū)。檢測(cè)時(shí)，兩突變發(fā)生在同一基因上，雜合體就不存在野生型的基因，因而為突變體表型；如果兩突變?cè)趦蓚€(gè)不同的基因上，后代雜合體中將有一個(gè)基因是野生型的，另外一個(gè)基因是突變型，雜合體的表型成了野生型。當(dāng)順式有功能而反式無(wú)功能時(shí)，突變位點(diǎn)在同一順?lè)醋觾?nèi)；如果順式、反式都有功能，那么突變位點(diǎn)在不同的順?lè)醋觾?nèi)。六、 名詞解釋： 同工tRNA：由于一種氨基酸可能有多個(gè)密碼子，因此有多個(gè)tRNA來(lái)識(shí)別這些密碼子，即多個(gè)tRNA代表一種氨基酸，我們將幾個(gè)代表相同氨基酸的tRNA稱為同工tRNA。 單倍體：真核生物性細(xì)胞染色體數(shù)目是體細(xì)胞的一半，故稱為單倍體。 表觀遺傳學(xué)：是基于種種意外的非孟德?tīng)栠z傳現(xiàn)象的困惑發(fā)展而來(lái)，研究在有絲分裂及減數(shù)分裂過(guò)程中無(wú)法用DNA序列改變來(lái)解釋的基因功能的可繼承性改變。 限制性內(nèi)切酶：是一類能識(shí)別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列（一般48bp）并在此處切割DNA雙鏈的核酸內(nèi)切酶 轉(zhuǎn)錄單位：轉(zhuǎn)錄單位是一段從啟動(dòng)子開(kāi)始至終止子結(jié)束的DNA序列，RNA聚合酶從轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)開(kāi)始沿著模板前進(jìn)，知道終止子為止，轉(zhuǎn)錄出一條RNA鏈。 HGP：人類基因組計(jì)劃，致力于測(cè)定人類單倍體染色體組中約30億堿基對(duì)序列，解析人類基因組中攜帶的有關(guān)人類個(gè)體生長(zhǎng)發(fā)育、生老病死的全部遺傳信息。 RNA編輯：是某些RNA，特別是mRNA的一種加工方式，它導(dǎo)致DNA所編碼的遺傳信息的改變，因?yàn)榻?jīng)過(guò)編輯的mRNA序列發(fā)生了不同于模板DNA的變化。 信號(hào)肽：在起始密碼子后，有一段編碼疏水性氨基酸序列的RNA區(qū)域，這個(gè)氨基酸序列就被稱為信號(hào)肽。 前導(dǎo)鏈：在DNA復(fù)制過(guò)程中，與復(fù)制叉運(yùn)動(dòng)方向相同，以5’ →3’方向連續(xù)合成的鏈被稱為前導(dǎo)鏈。 Pribnow box：在啟動(dòng)子區(qū)有一個(gè)由5個(gè)核苷酸組成的共同序列，是RNA聚合酶的共同聚合點(diǎn)，稱為pribnow 區(qū)（pribnow box）。1 原位雜交：是用標(biāo)記的核酸探針，經(jīng)放射至顯影或非放射檢測(cè)體系，在組織、細(xì)胞及染色體水平上對(duì)核酸進(jìn)行定位和相對(duì)定量研究的一種手段，通常分為RNA原位雜交和染色體原位雜交兩大類。1 中心法則：由克連克首次提出的遺傳信息傳遞規(guī)律，該法則闡明了DNA復(fù)制，RNA轉(zhuǎn)錄以及翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì)在生命過(guò)程中的核心地位。1 切口平移：切口產(chǎn)生3‘羥基和5’磷酸基團(tuán)，DNA延伸合成3‘端，5’端被小片段降解，缺口位點(diǎn)沿著雙鏈向3’端移動(dòng)，是在體外向DNA分子引入放射性標(biāo)記核苷酸的技術(shù)。1 安慰性誘導(dǎo)物：指的是與轉(zhuǎn)錄調(diào)控中實(shí)際誘導(dǎo)物相似的一類高效誘導(dǎo)物，但不是該誘導(dǎo)酶的底物。1 基因組：一個(gè)細(xì)胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息或整套基因，包括每一條染色體和所有亞細(xì)胞器的DNA序列信息。1 RFLP（限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性）：使用限制性內(nèi)切酶消除某個(gè)DNA分子后出現(xiàn)的長(zhǎng)度多樣性，因其具有種質(zhì)特性而常用作遺傳學(xué)的分子標(biāo)記。DNA序列上的微小變化，甚至一個(gè)核苷酸的變化也能引起限制性內(nèi)切核酸酶切點(diǎn)的丟失或產(chǎn)生，導(dǎo)致酶切片段長(zhǎng)度的變化。1 復(fù)制叉：DNA復(fù)制時(shí)，雙鏈DNA要解開(kāi)成雙股鏈分別進(jìn)行，所以這個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)呈現(xiàn)叉子的形式，被稱為復(fù)制
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