分子生物學(xué)復(fù)習(xí)資料-文庫吧資料
2025-06-13 15:52本頁面
【正文】 同工tRNA：由于一種氨基酸可能有多個密碼子，因此有多個tRNA來識別這些密碼子，即多個tRNA代表一種氨基酸，我們將幾個代表相同氨基酸的tRNA稱為同工tRNA。檢測時，兩突變發(fā)生在同一基因上，雜合體就不存在野生型的基因，因而為突變體表型；如果兩突變在兩個不同的基因上，后代雜合體中將有一個基因是野生型的，另外一個基因是突變型，雜合體的表型成了野生型。而且所檢測到的熒光強度與溶液中靶標(biāo)量成正比。此時發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移，使熒光基團發(fā)出的熒光被淬滅基團吸收并以熱的形式散發(fā)，熒光幾乎完全被淬滅，熒光本底極低。所以只有熒光基團與淬滅基團之間達到一定的距離時才會產(chǎn)生熒光。（3）、熒光基團和淬滅基團：熒光基團一般連接在5ˊ端；淬滅基團一般連接在3ˊ端，常用4（4二甲基氨基偶氮苯基）苯甲酸（DABCYL）作為淬滅基團。 分子信標(biāo)技術(shù)分子信標(biāo)是一種熒光標(biāo)記的寡核苷酸鏈，一般含有25～35個核苷酸。也可以直接在玻璃板或金屬表面進行化學(xué)合成，從而得到寡核苷酸芯片，將芯片與待研究的cDNA或其他樣品雜交，經(jīng)過計算機掃描和數(shù)據(jù)處理，便可以觀察到成千上萬個基因在不同組織或同一組織不同發(fā)育時期或 不同生理條件下的表達情況。 基因芯片技術(shù)原理？原理：基因芯片是一種小型分析裝置，能夠快速和精確的研究生物體、組織、器官或細(xì)胞內(nèi)基因組的遺傳信息。⑤ 分別以第一鏈cDNA為模板進行RACE反應(yīng)。③ 去掉mRNA5’的帽子結(jié)構(gòu)，加特異性RNA寡聚頭并用RNA連接酶連接。主要操作步驟如下：① 獲得高質(zhì)量總RNA：含有大量完整mRNA，tRNA和部分不完整mRNA。σ因子還能使RNA聚合酶與模板DNA上非特異性位點的結(jié)合常數(shù)降低104倍，讓非特異性位點酶底復(fù)合物的半衰期小于1s。 聚合酶中的σ因子？σ因子作用是負(fù)責(zé)模板鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始，它是酶的結(jié)構(gòu)效應(yīng)物，使酶專一性識別模板上的啟動子。滾環(huán)形：是單向瀆職的一種特殊方式，在噬菌體中很常見。 環(huán)狀DNA有哪些復(fù)制方式？環(huán)狀DNA雙鏈復(fù)制可分為θ型、滾環(huán)形和D環(huán)形幾種類型。用脈沖標(biāo)記2s后，通過氯化銫密度梯度離心后，能夠檢測到一些標(biāo)記的DNA，在極限檢測范圍內(nèi)，所有標(biāo)記DNA都是很小的片段，長度為10002000nt (核苷酸)，這些片段位于離心管的上部。 G—CA—U；T—A；G—C引物RNA引物無 脈沖標(biāo)記實驗：一個實驗中，細(xì)胞在放射性介質(zhì)中生長的一個短暫的時期（脈沖），這是對細(xì)胞中某些正在合成的物質(zhì)進行標(biāo)記，分離提取要檢測的物質(zhì)，變性后進行氯化銫密度梯度離心，以檢測所測物質(zhì)的大小。 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄異同點？（1） 相同點：①都已DNA鏈為模板；②合成的方向為5’→3’；③聚合反應(yīng)均是通過核苷酸之間形成的3’，5’磷酸二酯鍵，使核苷酸鏈延長。常見的插入序列都是很小的DNA片段，末端具有反向重復(fù)序列，轉(zhuǎn)座時往往復(fù)制宿主靶位點一小段DNA，形成位于IS兩端的正向重復(fù)序列。四、 簡答： 什么是AP位點？所有細(xì)胞中都帶有不同類型、能識別受損核酸位點的糖苷水解酶，他能特異性切除受損核苷酸上的Nβ糖苷鍵，在DNA鏈上形成去嘌呤或去嘧啶位點，統(tǒng)稱為AP位點。 生命中的兩個關(guān)鍵工作：遺傳和基因表達，圍繞中心法則盡心解說，基因表達的產(chǎn)物進行復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)維持生命的活動，對基因進行測序構(gòu)建生命的藍圖。 DNA指紋指具有完全個體特異的DNA多態(tài)性，其個體識別能力足以與手指指紋相媲美，因而得名。真核生物mRNA兩端最末端基團：5’甲基化鳥嘌呤或者甲基化腺嘌呤，3’腺嘌呤1轉(zhuǎn)錄方向：5’ →3’三、 選擇題： DNA中的堿基（ATCG），RNA中的堿基（AUCG）。 真核生物轉(zhuǎn)錄翻譯空間變化：細(xì)胞核→細(xì)胞質(zhì)。 信號肽的特點：⑴整體上是一段疏水的肽段； ⑵信號肽一般位于N端，進入ER膜后被信號肽酶水解； ⑶信號肽的中部常常由1015個殘基構(gòu)成疏水性核，前端常常有幾個帶正電荷的堿性氨基酸，后端為為含丙氨酸的區(qū)域； ⑷信號肽酶的水解位點通常是“AlaXAla”； ⑸信號肽可以位于蛋白質(zhì)分子的各個部位； ⑹普遍適用性。 大腸桿菌RNA聚合酶首先由兩個α亞基、一個β亞
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