分子生物學復習題(編輯修改稿)
2024-09-01 02:39 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 板鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的開始，是酶的別構(gòu)效應物，使酶專一性識別模板上的啟動子。(2) 極大地提高RNA聚合酶對啟動子區(qū)DNA序列的親和力，酶底結(jié)合常數(shù)提高103倍，酶底復合物的半衰期可達數(shù)小時甚至數(shù)十小時。(3) 使RNA聚合酶與模板DNA上非特異性位點的結(jié)合常數(shù)降低104倍，使非特異性位點酶底復合物的半衰期小于1s.(4) 在某些細菌細胞內(nèi)含有能識別不同啟動子的σ因子，以適應不同生長發(fā)育階段的要求，調(diào)控不同基因轉(zhuǎn)錄的起始。什么是Pribnow box？它的保守序列是什么？ Pribnow box 指在被RNA聚合酶保護的DNA片段中有一個 由5個核苷酸組成的共同序列，是RNA聚合酶緊密結(jié)合位點。 保守序列為TATAAT。1簡述原核生物和真核生物mRNA的區(qū)別。單順反子mRNA：只編碼一個蛋白質(zhì)的mRNA。多順反子mRNA：編碼多個蛋白質(zhì)的mRNA。(1) 原核生物mRNA的特征 半衰期短；多以多順反子的形式存在 (2) 真核生物mRNA的特征 5’端存在“帽子”結(jié)構(gòu) ； 多數(shù)mRNA 3’ 端具有poly（A ）尾巴（組蛋白除外）；以單順反子的形式存在。 1真核生物的初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物必須經(jīng)過哪些加工才能成為成熟mRNA，以用作蛋白質(zhì)的合成模板。(1) 5’端加帽：5’端的一個核苷酸總是7甲基鳥核苷三磷酸(m7Gppp)(2) 3’端加尾：多聚腺苷酸尾巴(3) RNA的剪接(4) RNA的編輯1什么是RNA編輯？其生物學意義？ RNA編輯指轉(zhuǎn)錄后的RNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基的突變、加入或丟失等現(xiàn)象。生物學意義:(1) 校正作用:有些基因在突變過程中丟失的遺傳信息可能通過RNA編輯修復。(2) 調(diào)控翻譯:通過編輯可以構(gòu)建和去除起始或終止密碼子，是基因表達調(diào)控的一種方式。(3) 擴充遺傳信息:能是基因產(chǎn)物獲得新的結(jié)構(gòu)和功能，有利于生物進化。簡述PCR的基本原理。 聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)首先將雙鏈DNA分子加熱分離成兩條單鏈，DNA聚合酶以單鏈DNA為模板并利用反應混合物中的四種dNTP合成新生的DNA互補鏈。PCR的基本原理：變性、復性、半保留復制PCR三步曲：變性 90～97℃、退火 45～55℃、延伸 72℃左右。簡述實時定量PCR的原理和過程。 實時定量PCR是基于PCR技術(shù)的利用不同的熒光檢測來給核酸定量的技術(shù)。實時熒光定量PCR技術(shù)原理是在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。簡述基因組 DNA 文庫的構(gòu)建流程。(1) 載體的制備；(2) 高純度大分子量基因組DNA的提??；(3) 高分子量HMW DNA的部分酶切與脈沖電泳分級分離（PFGE size selection）；(4) 載體與外源片段的連接與轉(zhuǎn)化或侵染宿主細胞；(5) 重組克隆的挑取和保存。 蛋白質(zhì)組學的研究對象和目的是什么？主要有哪些技術(shù)和方法？ 研究對象和目的：在大規(guī)模水平上研究蛋白質(zhì)的特征，包括蛋白質(zhì)的表達水平，翻譯后的修飾，蛋白與蛋白相互作用等，由此獲得蛋白質(zhì)水平上的關于疾病發(fā)生，細胞代謝等過程的整體而全面的認識。 技術(shù)和方法：Western印跡法、蛋白質(zhì)的質(zhì)譜分析技術(shù)、雙向電泳技術(shù)、熒光差異顯示雙向電泳技術(shù)。雙向電泳技術(shù)（twodimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDSPAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳，然后再進行SDSPAGE（按照分子大?。?，經(jīng)染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質(zhì)圖。真核細胞mRNA的哪一結(jié)構(gòu)特征可用來分離純化mRNA？請設計實驗分離純化真核細胞mRNA。 mRNA分子最顯著的結(jié)構(gòu)特征：5’m7G帽子，3’poly尾巴。設計實驗分離純化真核細胞mRNA：異硫氰酸胍苯酚抽提法抽提總RNA，寡聚(dT)纖維素柱色譜法純化mRNA：(1) 利用mRNA 含有3ˊpoly尾巴，當RNA流經(jīng)寡聚(dT)纖維素柱時，mRNA被特異性的結(jié)合在柱上；(2) 然后用低鹽溶液或蒸餾水洗脫mRNA。名詞解釋 克?。簜€體水平：表示由具有相同基因型的同一物種的兩個或數(shù)個個體組成的 群體。如：單卵雙生。 細胞水平：指由同一個祖細胞分裂而來的一群帶有完全相同遺傳物質(zhì)的子細胞。 分子水平：將外源DNA插入具有復制能力的載體DNA中，使之得以永久保存和復制的過程。 cDNA文庫：以mRNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當?shù)妮d體（常用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后，通過受體菌轉(zhuǎn)化，則每個受體菌含有一段cDNA，并能繁殖擴增，這樣包含著細胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細胞的cDNA文庫。 SNP ：指單核苷酸多態(tài)位點，指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的一種DNA序列多態(tài)性。單個核苷酸的變異，包括置換、顛換、缺失和插入。一、選擇題：一個操縱子（元）通常含有 （ B ） (A) 數(shù)個啟動序列和一個編碼基因 (B) 一個啟動序列和數(shù)個編碼基因 (C) 一個啟動序列和一個編碼基因 (D) 兩個啟動序列和數(shù)個編碼基因 (E) 數(shù)個啟動序列和數(shù)個編碼基因乳糖操縱子（元）的直接誘導劑是（ E ） (A) 葡萄糖 (B) 乳糖 (C) β一半乳糖苷酶 (D) 透過酶 (E) 異構(gòu)乳糖 Lac阻遏蛋白結(jié)合乳糖操縱子（元）的（ B ） (A) CAP結(jié)合位點
外語相關推薦
鄂ICP備17016276號-1