中科院分子生物學(xué)試題庫(kù)題庫(kù)3(編輯修改稿)
2025-05-01 23:08 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 何差別?91．粘性末端連接法是最常用的連接方法，具有許多優(yōu)點(diǎn)，但是也有一些不足，請(qǐng)指出 這些不足之處，92．什么是同聚物加尾連接法(homopolymer tails joining)?用何種方法加尾?具有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?93．何謂接頭連接法(Iinker ligation)?94．什么是同裂酶?為什么說用同裂酶進(jìn)行體外重組效率最高?95．如何使用甲基化酶對(duì)克隆 DNA進(jìn)行保護(hù)?有什么意義?96．何謂稀有酶?(舉例說明)97．為了大量獲得許多用于生化鑒定的產(chǎn)物，你想將擬南芥中的一個(gè)序列已知、編碼單體酶蛋白的基因在單細(xì)胞微生物中表達(dá)，你如何確保最終能得到產(chǎn)物?98．若在進(jìn)行 DNA重疊群分析時(shí)，你發(fā)現(xiàn)在一個(gè)編碼有價(jià)值但不穩(wěn)定蛋白質(zhì)的可讀框 之后，緊接著另一個(gè)可讀框，它可在蛋白質(zhì)的 C末端加上一個(gè)穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。舉出至少兩種獲得被修飾蛋白產(chǎn)物的方法。99．某一質(zhì)粒載體具有 Tetr和 Kanr的表型，在 Kan抗性基因內(nèi)有一Bgl Ⅰ的切點(diǎn)。現(xiàn)用Bgl Ⅰ切割該載體進(jìn)行基因克隆，問：(1)轉(zhuǎn)化后涂皿時(shí)應(yīng)加什么樣的抗生素?(2)培養(yǎng)后長(zhǎng)出的菌落具有什么樣的抗性基因型?(3)如何利用抗性變化篩選到含有插人片段的重組體?100．限制性內(nèi)切核酸酶 Bam H Ⅰ和 Pst Ⅰ切割某一DNA序列。 BomH Ⅰ和Pst Ⅰ識(shí)別序列處的切割，只顯示識(shí)別位點(diǎn)的核苷酸序列 (1)指出被切割 DNA分子的5’端和3’端； (2)如果你將切割后的 DNA同 DNA聚合酶、4種 dNTP 在一起溫育，這些DNA末端會(huì)有什么樣的變化?(3)經(jīng)過 B中的反應(yīng)后，你還能夠用 T4 DNA連接酶將BamH Ⅰ末端連接起來嗎? Pst Ⅰ末端呢？（T4DNA連接酶能夠連接平末端和黏性末端）(4)(3)中的連接后，能夠重新形成BamH I位點(diǎn)嗎？Pst I位點(diǎn)呢？101．什么是遺傳學(xué)檢測(cè)法?102．以 pBR322 DNA作為載體，從四環(huán)素抗性基因區(qū)克隆外源 DNA時(shí)，可采用環(huán)絲氨酸富集法篩選重組體，說明其基本原理和基本操作過程。103．放射性抗體檢測(cè)法(radioactive antibody test)的基本原理是什么?104．何謂液相雜交?舉例說明在分子生物學(xué)中的應(yīng)用。105. 什么是活體標(biāo)記法(in vivo labeling)?106. 單鏈RNA作為探針，具有哪些單鏈 DNA探針?biāo)鶝]有的優(yōu)點(diǎn)?107. 什么是隨機(jī)引物(random primer)?如何標(biāo)記 DNA?108．良好的固相支持物必須具備哪些優(yōu)良特性?109．以硝酸纖維素濾膜(nitrocellulose filter membrane)作為雜交的固相支持物具有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?110．什么是印跡(blotting)雜交?111．什么是斑點(diǎn)雜交(dot hybridization)與狹縫雜交(slot hybridizatlon)?112．什么是原位菌落雜交(colony hybridization)?113．說明 Southern雜交的原理和方法。114．Northern印跡與 Southern印跡有什么不同?115．建立了一個(gè)基因文庫(kù)后，如何鑒定一個(gè)攜帶目的基因的克隆?116．說明原核生物基因表達(dá)的正控制誘導(dǎo)型（positive inducible control）和負(fù)控制阻遏型（Negativerepresible control）調(diào)控的遺傳機(jī)理。117．一個(gè)四核苷酸序列的DNA分子，經(jīng)羥胺處理后，再經(jīng)過兩次復(fù)制，會(huì)產(chǎn)生什么樣的DNA分子？（5分）118．有一段多肽鏈的C端氨基酸殘基的TyrProAsnValThrCysGlu,其對(duì)應(yīng)的DNA序列為（SS1） GATAAGCGTGCATGTAAGCCCCAT（SS2） CTATTCGCACGTACATTCGGGGTA119. 106bp，Cot/2為4。雞管狀細(xì)胞內(nèi)DNA含有7108，其復(fù)性動(dòng)力學(xué)曲線為：請(qǐng)求出雞細(xì)胞DNA中，中度重復(fù)序列組分每一重復(fù)單位的核苷酸？及重復(fù)頻率？120. 將一個(gè)重組質(zhì)粒PMR1分別感染三個(gè)被λphage溶原的E. coli菌株（ 或oR1—或oR2—），培養(yǎng)于含ONPG（鄰硝基苯—β—半乳糖苷）的培養(yǎng)皿中，在加入不同的IPTG（異丙基—β—D—硫代半乳糖苷，類似于乳糖，作為效應(yīng)物分子）的培養(yǎng)皿中，檢測(cè)被LacZ酶分解ONPG的黃色色度，并換算成Z酶酶活，請(qǐng)根據(jù)測(cè)定結(jié)果判斷這三條曲線分別代表哪一個(gè)測(cè)驗(yàn)菌株？為什么？121. 某一生物DNA的chemicai plexity=108bp，復(fù)性動(dòng)力學(xué)研究表明約有40%的DNA其Cot(1/2)=5, 請(qǐng)較詳細(xì)地說明這部分DNA的特點(diǎn)。（E. coli DNA kinetic plexity=chemical plexity=108bp，Cot(1/2)=4）122．分別說明λ phage以下突變型的表現(xiàn)型并簡(jiǎn)述其分子機(jī)理： λ[cⅠ]— , λ[cⅡ]—, λ[hfl]—, λ[cro]—123. 說明constitutive splicing與alternative splicing, cissplicing與transsplicing之間在概念及機(jī)制上的區(qū)別。124．E. Coli阿拉伯糖（Arabinos
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