中科院分子生物學試題庫題庫3(編輯修改稿)
2025-05-01 23:08 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 何差別?91．粘性末端連接法是最常用的連接方法，具有許多優(yōu)點，但是也有一些不足，請指出 這些不足之處，92．什么是同聚物加尾連接法(homopolymer tails joining)?用何種方法加尾?具有哪些優(yōu)缺點?93．何謂接頭連接法(Iinker ligation)?94．什么是同裂酶?為什么說用同裂酶進行體外重組效率最高?95．如何使用甲基化酶對克隆 DNA進行保護?有什么意義?96．何謂稀有酶?(舉例說明)97．為了大量獲得許多用于生化鑒定的產(chǎn)物，你想將擬南芥中的一個序列已知、編碼單體酶蛋白的基因在單細胞微生物中表達，你如何確保最終能得到產(chǎn)物?98．若在進行 DNA重疊群分析時，你發(fā)現(xiàn)在一個編碼有價值但不穩(wěn)定蛋白質(zhì)的可讀框 之后，緊接著另一個可讀框，它可在蛋白質(zhì)的 C末端加上一個穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。舉出至少兩種獲得被修飾蛋白產(chǎn)物的方法。99．某一質(zhì)粒載體具有 Tetr和 Kanr的表型，在 Kan抗性基因內(nèi)有一Bgl Ⅰ的切點?，F(xiàn)用Bgl Ⅰ切割該載體進行基因克隆，問：(1)轉(zhuǎn)化后涂皿時應加什么樣的抗生素?(2)培養(yǎng)后長出的菌落具有什么樣的抗性基因型?(3)如何利用抗性變化篩選到含有插人片段的重組體?100．限制性內(nèi)切核酸酶 Bam H Ⅰ和 Pst Ⅰ切割某一DNA序列。 BomH Ⅰ和Pst Ⅰ識別序列處的切割，只顯示識別位點的核苷酸序列 (1)指出被切割 DNA分子的5’端和3’端； (2)如果你將切割后的 DNA同 DNA聚合酶、4種 dNTP 在一起溫育，這些DNA末端會有什么樣的變化?(3)經(jīng)過 B中的反應后，你還能夠用 T4 DNA連接酶將BamH Ⅰ末端連接起來嗎? Pst Ⅰ末端呢？（T4DNA連接酶能夠連接平末端和黏性末端）(4)(3)中的連接后，能夠重新形成BamH I位點嗎？Pst I位點呢？101．什么是遺傳學檢測法?102．以 pBR322 DNA作為載體，從四環(huán)素抗性基因區(qū)克隆外源 DNA時，可采用環(huán)絲氨酸富集法篩選重組體，說明其基本原理和基本操作過程。103．放射性抗體檢測法(radioactive antibody test)的基本原理是什么?104．何謂液相雜交?舉例說明在分子生物學中的應用。105. 什么是活體標記法(in vivo labeling)?106. 單鏈RNA作為探針，具有哪些單鏈 DNA探針所沒有的優(yōu)點?107. 什么是隨機引物(random primer)?如何標記 DNA?108．良好的固相支持物必須具備哪些優(yōu)良特性?109．以硝酸纖維素濾膜(nitrocellulose filter membrane)作為雜交的固相支持物具有哪些優(yōu)缺點?110．什么是印跡(blotting)雜交?111．什么是斑點雜交(dot hybridization)與狹縫雜交(slot hybridizatlon)?112．什么是原位菌落雜交(colony hybridization)?113．說明 Southern雜交的原理和方法。114．Northern印跡與 Southern印跡有什么不同?115．建立了一個基因文庫后，如何鑒定一個攜帶目的基因的克隆?116．說明原核生物基因表達的正控制誘導型（positive inducible control）和負控制阻遏型（Negativerepresible control）調(diào)控的遺傳機理。117．一個四核苷酸序列的DNA分子，經(jīng)羥胺處理后，再經(jīng)過兩次復制，會產(chǎn)生什么樣的DNA分子？（5分）118．有一段多肽鏈的C端氨基酸殘基的TyrProAsnValThrCysGlu,其對應的DNA序列為（SS1） GATAAGCGTGCATGTAAGCCCCAT（SS2） CTATTCGCACGTACATTCGGGGTA119. 106bp，Cot/2為4。雞管狀細胞內(nèi)DNA含有7108，其復性動力學曲線為：請求出雞細胞DNA中，中度重復序列組分每一重復單位的核苷酸？及重復頻率？120. 將一個重組質(zhì)粒PMR1分別感染三個被λphage溶原的E. coli菌株（ 或oR1—或oR2—），培養(yǎng)于含ONPG（鄰硝基苯—β—半乳糖苷）的培養(yǎng)皿中，在加入不同的IPTG（異丙基—β—D—硫代半乳糖苷，類似于乳糖，作為效應物分子）的培養(yǎng)皿中，檢測被LacZ酶分解ONPG的黃色色度，并換算成Z酶酶活，請根據(jù)測定結(jié)果判斷這三條曲線分別代表哪一個測驗菌株？為什么？121. 某一生物DNA的chemicai plexity=108bp，復性動力學研究表明約有40%的DNA其Cot(1/2)=5, 請較詳細地說明這部分DNA的特點。（E. coli DNA kinetic plexity=chemical plexity=108bp，Cot(1/2)=4）122．分別說明λ phage以下突變型的表現(xiàn)型并簡述其分子機理： λ[cⅠ]— , λ[cⅡ]—, λ[hfl]—, λ[cro]—123. 說明constitutive splicing與alternative splicing, cissplicing與transsplicing之間在概念及機制上的區(qū)別。124．E. Coli阿拉伯糖（Arabinos
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