中科院分子生物學(xué)試題庫(kù)題庫(kù)3-在線(xiàn)瀏覽
2025-05-22 23:08本頁(yè)面
【正文】 lac23gal14(gal、lac、mal、man不能發(fā)酵半乳糖、乳糖、麥芽糖和甘露糖；arg、his、met、trp 生長(zhǎng)需要精氨酸、組氨酸、賴(lài)氨酸、甲硫氨酸、嘌呤和色氨酸；uvr：紫外線(xiàn)敏感)。上述數(shù)據(jù)能夠說(shuō)明大腸桿菌的染色體是環(huán)狀的嗎?以分鐘表示圖距構(gòu)建一個(gè)大腸桿菌染色體的連鎖圖。60．YAC克隆載體常出現(xiàn)哪些問(wèn)題?61．為什么野生型的λ噬菌體 DNA不宜作為基因工程載體?62．什么是藍(lán)白斑篩選法?63．藍(lán)白斑篩選法為什么也會(huì)有假陽(yáng)性?64．什么是cⅠ篩選法?65．λ噬菌體載體具有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?66．什么是 M13的IG序列區(qū)?有何特點(diǎn)和功能?67．將野生型的 M13改造成基因工程載體，首先是進(jìn)行酶切位點(diǎn)的改造，請(qǐng)問(wèn) M13中的EcoR Ⅰ最初是如何引入的?68．以置換型λ噬菌體作為載體進(jìn)行克隆時(shí)，為什么說(shuō)能夠形成噬菌斑的就一定是重組體?69． M13系列載體具有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?70．粘粒載體具有哪些特點(diǎn)與不足?71．輔助噬菌體 DNA和相應(yīng)的噬菌粒是如何協(xié)同工作的?72. 克隆的 DNA在質(zhì)量上有什么要求?73．為什么從細(xì)胞中分離 DNA時(shí)往往會(huì)斷裂?74．為什么苯酚要重蒸飽和后才能用于 DNA的分離?75．為什么氧化變色的酚不能直接用于DNA的分離?應(yīng)如何處置?76. 在DNA分離過(guò)程中，酚通常與氯仿聯(lián)合使用，即使不聯(lián)合使用也要在苯酚抽提后用氯仿再抽提一次，為什么?77. 說(shuō)明溴化乙錠—氯化鉤密度梯度離心(ethidium bromidecaesium chloride gradient centrifugation)純化DNA的原理。 假如你得到一些恐龍的 DNA，你如何通過(guò) PCR和基因克隆來(lái)檢測(cè)恐龍是否是溫血 爬行動(dòng)物?83．如果知道某一基因的功能及其相應(yīng)的蛋白質(zhì)的氨基酸序列組成，可以通過(guò)何種方法 克隆該基因?84．何謂定位克隆(positional cloning)?85．何謂染色體步移(chromosome walking)?86．在染色體步移中，用哪些方法獲得克隆的末端?87．何謂表型克隆(phenotype cloning)?88．什么是基因文庫(kù)?89．什么是基因組文庫(kù)(genomic librarY)?構(gòu)建基因組文庫(kù)，涉及哪些基本過(guò)程?它同遺傳學(xué)上的基因庫(kù)有什么不同?90．什么是 cDNA文庫(kù)(plement DNA libraly)?同基因組文庫(kù)有何差別?91．粘性末端連接法是最常用的連接方法，具有許多優(yōu)點(diǎn)，但是也有一些不足，請(qǐng)指出 這些不足之處，92．什么是同聚物加尾連接法(homopolymer tails joining)?用何種方法加尾?具有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?93．何謂接頭連接法(Iinker ligation)?94．什么是同裂酶?為什么說(shuō)用同裂酶進(jìn)行體外重組效率最高?95．如何使用甲基化酶對(duì)克隆 DNA進(jìn)行保護(hù)?有什么意義?96．何謂稀有酶?(舉例說(shuō)明)97．為了大量獲得許多用于生化鑒定的產(chǎn)物，你想將擬南芥中的一個(gè)序列已知、編碼單體酶蛋白的基因在單細(xì)胞微生物中表達(dá)，你如何確保最終能得到產(chǎn)物?98．若在進(jìn)行 DNA重疊群分析時(shí)，你發(fā)現(xiàn)在一個(gè)編碼有價(jià)值但不穩(wěn)定蛋白質(zhì)的可讀框 之后，緊接著另一個(gè)可讀框，它可在蛋白質(zhì)的 C末端加上一個(gè)穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。99．某一質(zhì)粒載體具有 Tetr和 Kanr的表型，在 Kan抗性基因內(nèi)有一Bgl Ⅰ的切點(diǎn)。 BomH Ⅰ和Pst Ⅰ識(shí)別序列處的切割，只顯示識(shí)別位點(diǎn)的核苷酸序列 (1)指出被切割 DNA分子的5’端和3’端； (2)如果你將切割后的 DNA同 DNA聚合酶、4種 dNTP 在一起溫育，這些DNA末端會(huì)有什么樣的變化?(3)經(jīng)過(guò) B中的反應(yīng)后，你還能夠用 T4 DNA連接酶將BamH Ⅰ末端連接起來(lái)嗎? Pst Ⅰ末端呢？（T4DNA連接酶能夠連接平末端和黏性末端）(4)(3)中的連接后，能夠重新形成BamH I位點(diǎn)嗎？Pst I位點(diǎn)呢？101．什么是遺傳學(xué)檢測(cè)法?102．以 pBR322 DNA作為載體，從四環(huán)素抗性基因區(qū)克隆外源 DNA時(shí)，可采用環(huán)絲氨酸富集法篩選重組體，說(shuō)明其基本原理和基本操作過(guò)程。105. 什么是活體標(biāo)記法(in vivo labeling)?106. 單鏈RNA作為探針，具有哪些單鏈 DNA探針?biāo)鶝](méi)有的優(yōu)點(diǎn)?107. 什么是隨機(jī)引物(random primer)?如何標(biāo)記 DNA?108．良好的固相支持物必須具備哪些優(yōu)良特性?109．以硝酸纖維素濾膜(nitrocellulose filter membrane)作為雜交的固相支持物具有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?110．什么是印跡(blotting)雜交?111．什么是斑點(diǎn)雜交(dot hybridization)與狹縫雜交(slot hybridizatlon)?112．什么是原位菌落雜交(colony hybridization)?113．說(shuō)明 Southern雜交的原理和方法。117．一個(gè)四核苷酸序列的DNA分子，經(jīng)羥胺處理后，再經(jīng)過(guò)兩次復(fù)制，會(huì)產(chǎn)生什么樣的DNA分子？（5分）118．有一段多肽鏈的C端氨基酸殘基的TyrProAsnValThrCysGlu,其對(duì)
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