20xx年醫(yī)學(xué)專題—流式細胞儀概述-資料下載頁
2024-11-15 05:38本頁面
【正文】 頁，共七十二頁。,白血病免疫分型 白血病是白細胞在分化到某個階段(jiēdu224。n)受阻后呈克隆性異常增殖的結(jié)果，它的發(fā)病是多階段(jiēdu224。n)的，不同病因引起的白血病的發(fā)病機制不同，在治療和預(yù)防上也不同，所以，利用白細胞分化不同階段(jiēdu224。n)出現(xiàn)的細胞表面標志，可以對白血病進行免疫分型，對其進行導(dǎo)向治療。 應(yīng)用流式細胞儀四色熒光標記技術(shù)， CD45/SSC雙參數(shù)散點圖設(shè)門方法，能清楚地區(qū)分各種免疫細胞，可準確、客觀地進行白血病免疫分型。,第六十三頁，共七十二頁。,血小板膜表面受體檢測 血小板膜上有豐富的糖蛋白受體，是血小板發(fā)揮其功能的物質(zhì)基礎(chǔ)，靜止期和活化期的血小板膜糖蛋白受體的種類、含量、結(jié)構(gòu)和功能顯著不同。應(yīng)用流式細胞儀檢測血小板膜上受體，主要是對血小板特異性膜糖蛋白和活化標志物進行免疫熒光標記，結(jié)合(ji233。h233。)單克隆抗體和免疫熒光技術(shù)，用不同的抗血小板單克隆抗體，可以從分子水平上診斷血小板功能和數(shù)量的異常。,第六十四頁，共七十二頁。,細胞因子的檢測(jiǎn c232。) 細胞因子(cytokine)是由免疫細胞或非免疫細胞合成和分泌的小分子多肽，在調(diào)節(jié)機體多種細胞的生長、分化和功能，調(diào)節(jié)正常與病理狀態(tài)下的免疫應(yīng)答過程中起著十分重要的作用。 應(yīng)用流式細胞儀結(jié)合間接免疫熒光法，可在單細胞水平上客觀、正確地檢測細胞內(nèi)多個細胞因子，并可區(qū)分表達特定細胞因子的細胞亞群，進行多參數(shù)相關(guān)分析，是一種有效地在單細胞水平研究細胞因子的方法。,第六十五頁，共七十二頁。,二、流式細胞儀在血液學(xué)中的應(yīng)用 血液病多為腫瘤性、免疫性和遺傳性疾病，惡性血液病約占其總數(shù)一半以上。 FCM在血液細胞的分類、分型，造血細胞分化的研究，血細胞中各種酶的定量分析(d236。ngli224。ngfēnxī)，如過氧化物酶、非特異性酯酶等方面應(yīng)用廣泛。,第六十六頁，共七十二頁。,用于血液/腫瘤細胞增殖動力學(xué)研究 細胞經(jīng)DNA熒光染料標記后，F(xiàn)CM可測定單個細胞DNA的含量，并描繪出DNA圖形，經(jīng)軟件處理可計算出G0/GS、G2/M各細胞周期細胞所占的百分比。依據(jù)增殖指數(shù)可了解群體細胞的增殖活力。 通過染色，不僅(b249。jǐn)可了解血/腫瘤細胞的增殖狀況，更可用于化療藥物作用機制的探討，從而將其區(qū)分為增殖周期特異性、非特異性藥物，以及周期時相特異性、非特異性藥物，以便更合理的配伍聯(lián)合化療方案，預(yù)測腫瘤細胞對藥物的敏感性等。,第六十七頁，共七十二頁。,三、流式細胞儀在細胞生物學(xué)中的應(yīng)用 細胞生物學(xué)研究中，應(yīng)用最頻繁也最普通的是細胞周期分析，研究細胞周期或DNA倍體與細胞表面受體及抗原表達的關(guān)系，包括(bāoku242。)細胞周期各時相的百分比和細胞周期動力學(xué)參數(shù)的測定等內(nèi)容。對同一細胞的參數(shù)測定技術(shù)則導(dǎo)致了對細胞周期的一些新發(fā)現(xiàn)，典型的方法是吖啶橙雙染色技術(shù)。,第六十八頁，共七十二頁。,四、流式細胞儀在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用 近年來熒光(y237。ngguāng)細胞化學(xué)技術(shù)的發(fā)展，以及熒光(y237。ngguāng)探針標記的單克隆抗體，為流式細胞技術(shù)研究各種腫瘤抗原、腫瘤蛋白、致癌基因開辟了新途徑，極大地提高了腫瘤學(xué)的研究水平，并為流式細胞技術(shù)在腫瘤學(xué)的研究中開辟了更廣闊的應(yīng)用前景。,第六十九頁，共七十二頁。,五、FCM對自身(z236。shēn)免疫性疾病HLA抗原的分析 利用FCM可以進行HLAB27／HLAB7雙標記抗體檢測HLAB27陽性細胞，同時又可排出交叉反應(yīng)。通常58％～97％的強直性脊柱炎患者可檢出這種抗原，而正常人僅2％～7％可檢出這種抗原。FCM檢測HLAB27快速、特異、敏感，為強制性脊柱炎的臨床診斷提供了有力的幫助。,第七十頁，共七十二頁。,六、流式細胞儀在藥物學(xué)方面的應(yīng)用 流式細胞儀在檢測藥物在細胞中的分布，研究藥物的作用機制方面應(yīng)用廣泛。 亦可用于篩選新藥，如化療(hu224。 li225。o)藥物對腫瘤細胞的凋亡機制，可通過測DNA凋亡峰，Bcl2凋亡調(diào)節(jié)蛋白等進行觀察。,第七十一頁，共七十二頁。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),第十五章。在壓電晶體上加上頻率為30kHz的信號，使液柱斷裂成一連串均勻的液滴。噴嘴的振動頻率即每秒鐘產(chǎn)生水滴的數(shù)目。靈敏度的高低是衡量儀器(y237。q236。)檢測微弱熒光信號的重要指標。流式細胞分析儀器(y237。q236。)是一項集多學(xué)科知識綜合應(yīng)用的復(fù)雜儀器(y237。q236。)，除了對儀器(y237。q236。)各方面性能指標有嚴格的要求以外，在實驗設(shè)計與樣品處理方面也需要有豐富的基礎(chǔ)理論及操作經(jīng)驗。4.安裝單獨的可靠的地線,第七十二頁，共七十二頁。,
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