20xx年醫(yī)學專題—流式細胞儀概述-wenkub
2024-11-15 05 本頁面
【正文】 了鞘液,鞘液的作用是將樣品流環(huán)包。tǒng)；信號檢測與存貯、顯示、分析系統(tǒng)(x236。,第二十二頁，共七十二頁。,第二十一頁，共七十二頁。 t243。 臨床型只有分析(fēnxī)功能，沒有分選功能，操作簡便，易學易掌握。ng)液滴時給含有這類細胞的液滴充以特定的電荷，帶有電荷的液滴向下落入偏轉板間的靜電場時，依所帶電荷的符號分別向左偏轉或向右偏轉，落入指定的收集器內。bāo)儀細胞(x236。當某類細胞的特性與要分選的細胞相同時，流式細胞儀就會在這類細胞形成液滴時給含有這類細胞的液滴充以特定的電荷，帶有電荷的液滴向下落入偏轉板間的靜電場時，依所帶電荷的符號(fnh224。,3. 信號(x236。,第十四頁，共七十二頁。,第十三頁，共七十二頁。,第十二頁，共七十二頁。,第十一頁，共七十二頁。ng)流式細胞儀對于處在快速直線流動狀態(tài)中的細胞或生物顆粒進行快速的、多參數(shù)的定量分析和分選的技術稱為流式細胞技術。)原理,一、生物學顆粒(kēl236。,進入90年代，標本制備儀和自動進樣器的問世，以及適合臨床應用的單克隆抗體的增加，使流式細胞儀不僅出現(xiàn)(chūxi224。,第七頁，共七十二頁。i)目前各種流式細胞測量儀的基礎。bāo)測量的基礎。,1965年Kamentsky用紫外吸收和可見光散射兩個參數(shù)同時測量未染色的細胞(x236。,1934年Moldavan 使懸浮(xu225。,流式細胞術的定義:應用流式細胞儀對于處在快速直線流動狀態(tài)(zhu224。),流式細胞儀的定義(d236。sh249。)與流式細胞儀,第一頁，共七十二頁。ngy236。ngt224。nfbāo)，給出了細胞(x236。,第五頁，共七十二頁。,第六頁，共七十二頁。,80年代以來，流式細胞儀的數(shù)據采集(cǎij237。n)在大專院校和科研單位，它也逐漸進入醫(yī)院的中心實驗室和檢驗科。)分析原理,流式細胞技術是在單細胞水平上，對于處在快速直線流動狀態(tài)中的大量細胞或生物顆粒進行多參數(shù)、快速的定量分析和分選的技術，現(xiàn)已成為現(xiàn)代醫(yī)學研究最先進的分析技術之一。,第十頁，共七十二頁。,將懸浮分散(fēns224。,鞘液和樣品流在噴嘴附近(f249。,1. 樣品的進入流動室：將懸浮分散的單細胞懸液，經特異熒光染料染色后，放人樣品管。,2. 鞘液的作用：流動室軸心至外壁的鞘液也向下流動，形成包繞細胞(x236。nh224。o)分別被光電倍增管和光電二極管接收，經過計算機儲存、計算、分析這些數(shù)字化信息，就可得細胞的大小和核酸含量等指標。h224。bāo)分選原理,第十七頁，共七十二頁。,第十八頁，共七十二頁。 科研型既有分析功能又有分選功能，可快速將所感興趣的細胞分選出來。nɡ)又可分為一般流式細胞儀和狹縫掃描流式細胞儀。,狹縫(xi225。,流式細胞儀的結構可分為流動室及液流驅動系統(tǒng)(x236。tǒng)；細胞分選系統(tǒng)(x236。 樣品流在鞘流的環(huán)包下形成聚焦，保證每個細胞通過激光照射區(qū)的時間相等(xiāngděng)，從而得到準確的細胞熒光信息。,第二十五頁，共七十二頁。o)區(qū)的時間僅為1μs左右，且細胞所攜帶熒光物質被激發(fā)出的熒光信號強弱，與被照射的時間和激發(fā)光的強度有關，因此細胞必須達到足夠的光照強度。,第二十七頁，共七十二頁。)的光通過。,第二十九頁，共七十二頁。,第三十頁，共七十二頁。一種是細胞自身在激光照射下發(fā)出微弱的熒光信號，稱為細胞自發(fā)熒光；另一種是經過特異熒光素標記細胞后，受激發(fā)照射得到的熒光信號，通過對這類熒光信號的檢測和定量分析能了解所研究細胞的性質和數(shù)量。在細胞膜表面抗原等的熒光檢測時通常使用對數(shù)放大器。 熒光信號的寬度常用來區(qū)分雙連體細胞。,第三十四頁，共七十二頁。,圖中點A通過透鏡f成像在A’處，而點B通過透鏡f成像在B’處。,第三十六頁，共七十二頁。j236。,2．邏輯電路 為了分選細胞，需要細胞在經過測量(c232。,3．水滴的充電與偏轉 當水滴從流束上將要(jiāngy224。,（六）FCM測量數(shù)據的存貯、顯示與分析 目前FCM數(shù)據的存貯的方式均采用列表排隊(List Mode)方式。,第四十一頁，共七十二頁。,第四十二頁，共七十二頁。,三、前向角散射光檢測靈敏度 前向角散射光檢測靈敏度是指能夠檢測到的最小顆粒大小(d224。d249。大型機已達到每秒幾萬個細胞。 分選純度指要分選的目的細胞占分選出細胞的百分比。,第四十六頁，共七十二頁。q236。q236。)細胞間粘連重疊或細胞碎片過多，都會影響信號的收集及所收集信號的真實性，所以制備單細胞懸液是進行流式細胞儀分析最關鍵的第一步。熒光信號來自于細胞的自發(fā)熒光或被分析細胞經特異性熒光標記染色后通過激光束激發(fā)后所
環(huán)評公示相關推薦
鄂ICP備17016276號-1