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20xx年醫(yī)學(xué)專題—流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡和細(xì)胞周期等應(yīng)用-資料下載頁(yè)

2025-11-06 05:38本頁(yè)面
  

【正文】 熒光信號(hào)的強(qiáng)弱,反映了細(xì)胞抗原的表達(dá)含量,第四十八頁(yè),共五十九頁(yè)。,熒光樣本(y224。ngběn)制備,雙色直接(zh237。jiē)染色,第四十九頁(yè),共五十九頁(yè)。,端粒(熒光(y237。ngguāng)蛋白),第五十頁(yè),共五十九頁(yè)。,六)細(xì)胞內(nèi)鈣離子測(cè)定 1106/ml的細(xì)胞懸液, 加入終濃度為15μmol/ml Fluo3/AM,充分(chōngf232。n)混勻,室溫避光作用60分鐘。 以HEPES緩沖的Hank’s平衡鹽溶液洗三次,重懸于0.5ml同樣的溶液,上流式細(xì)胞儀檢測(cè)。 根據(jù)報(bào)告中給出的樣品熒光強(qiáng)度計(jì)算細(xì)胞內(nèi)鈣離子的濃度。,第五十一頁(yè),共五十九頁(yè)。,FCM檢測(cè)(jiǎn c232。)胞內(nèi)鈣離子、 膜電位和線粒體功能,第五十二頁(yè),共五十九頁(yè)。,M1陰性界限劃分(hu224。 fēn)完全是根據(jù)陰性對(duì)照!如下圖:紅色部分代表陰性對(duì)照,即:所檢測(cè)的物質(zhì)在陰性組中的基礎(chǔ)表達(dá)量,可以理解為背景、靜息狀態(tài)下、基礎(chǔ)水平、未受刺激時(shí)等。藍(lán)色部分即陽(yáng)性組,也就是接受刺激后,功能狀態(tài)下、藥物作用后等。,第五十三頁(yè),共五十九頁(yè)。,六. 分選:,用熒光探針標(biāo)記的細(xì)胞,可被有效地分離出來, 用于分選的效率(xi224。o lǜ)較高的儀器國(guó)內(nèi)較少,臺(tái)式機(jī)一般分選速度為每秒鐘300個(gè)細(xì)胞, 大型機(jī)分選速度可達(dá)到每秒上萬個(gè)細(xì)胞,第五十四頁(yè),共五十九頁(yè)。,,488 nm laser,,,,Fluorescence Activated Cell Sorting,Charged Plates,Single cells sorted into test tubes,FALS Sensor,Fluorescence detector,第五十五頁(yè),共五十九頁(yè)。,對(duì)比(du236。bǐ)流式細(xì)胞儀是一種特殊的顯微鏡,第五十六頁(yè),共五十九頁(yè)。,第五十七頁(yè),共五十九頁(yè)。,謝 謝 大 家,第五十八頁(yè),共五十九頁(yè)。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),流式細(xì)胞術(shù)。在分析的同時(shí)可把具有指定特征的細(xì)胞分離出來,即分選技術(shù)。液柱與激光束相交,細(xì)胞上的熒光染料被激發(fā)產(chǎn)生熒光。側(cè)向角散射光(SSC)細(xì)胞顆粒度及細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的相對(duì)復(fù)雜性。多熒光標(biāo)記胞內(nèi)多種組分,實(shí)現(xiàn)多參數(shù)測(cè)量。細(xì)胞表面/胞漿/核的特異性抗原。在G0/G1峰前出現(xiàn)(chūxi224。n)一個(gè)亞二倍體峰,即凋亡峰。檢測(cè)調(diào)亡,可進(jìn)行抗腫瘤藥物研究和某些因素對(duì)細(xì)胞的損傷機(jī)理的研究。細(xì)胞膜皺折卷曲,但早期細(xì)胞膜的完整性未受到破壞。家,第五十九頁(yè),共五十九頁(yè)。
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