20xx人教版高中生物選修一52多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段-資料下載頁
2024-12-09 14:55本頁面
【導(dǎo)讀】在現(xiàn)代生物技術(shù)中，DNA技術(shù)可謂是尖端技術(shù)。人類基因組計(jì)劃、基因工程、基因診斷、基因檢測、古生物鑒定等都離不開對DNA分子堿基序列的分析。要一定量的DNA片段。今天我們來研究學(xué)習(xí)DNA分子的。擴(kuò)增技術(shù)――PCR技術(shù)。連續(xù)的DNA子鏈連接起來（半不連續(xù)合成。感悟生命的神秘：DNA聚合酶不但能夠催化磷酸二酯鍵的形成，還具有校對功能。能性較大，在RNA引物完成功能后即被DNA聚合酶I刪去，代之以高保真的DNA鏈。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)提供模板；堿基互補(bǔ)配對；DNA聚合酶的復(fù)查功能。RNA合成、蛋白質(zhì)合成?；謴?fù)螺旋：在50℃左右時(shí)，兩條DNA單鏈重新形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，稱為復(fù)性。2．3按照PCR反應(yīng)體系配方配制反應(yīng)液；3．1避免外源DNA污染：所用儀器、緩沖液、蒸餾水等使用前高壓滅菌。3．2緩沖液和酶分裝成小份，－20℃低溫保存。D兩條鏈作為模板，各自合成一條子鏈，然后兩條母鏈重新結(jié)合為原來的雙螺旋分子，
【正文】 D從子鏈的 3，端向 5，端 PCR反 應(yīng)在體外的條件下順利地進(jìn)行，需要嚴(yán)格的控制（ ） A 氧氣的濃度 B酸堿度 C溫度 D 大氣的濕度 PCR反應(yīng)循環(huán)一次后，新合成的那條子鏈的脫氧核苷酸的序列應(yīng)與（ ） A模板母鏈相同 B非模板母鏈相同 C兩條模板母鏈相同 D兩條模板母鏈都不相同 答案： CDADA CBCCB 七、【 課余作業(yè)】 PCR與生物體 DNA復(fù)制有何區(qū)別？ 如果在案件偵破過程中，只收集到一根毛發(fā)，但它所含的遺傳信息太少，該怎么辦呢？ 八、【 教學(xué)體會】 教師在教學(xué)過程中 ，可以鮮引導(dǎo)學(xué)生回憶必修 2的有關(guān) DNA復(fù)制的知識，在此基礎(chǔ)上，學(xué)生可加深對于 PCR原理的認(rèn)識。對于 PCR反應(yīng)過程的教學(xué)，應(yīng)以讀圖識圖為主。教材中反應(yīng)過程圖解詳細(xì)的描繪了參與 PCR的各種組成成分；每一輪反應(yīng)的三個(gè)基本步驟 — 變性、復(fù)性、延伸；每一步驟的作用。教師在教學(xué)中可以請學(xué)生在讀圖的同時(shí)，結(jié)合教科書中的文字說明來加深理解。當(dāng)學(xué)生遇到難以理解的地方時(shí)，教師要及時(shí)給予解答。 九、【 資料袋】 免疫 PCR 免疫 PCR(immunoPCR)是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測系統(tǒng) .它利用抗原 抗體反應(yīng)的特異性和 PCR擴(kuò)增反應(yīng)的極高靈敏性來檢測抗原，尤其適用于極微量抗原的檢測 . 免疫 PCR 試驗(yàn)的主要步驟有三個(gè) :①抗原 抗體反應(yīng)，②與嵌合連接分子結(jié)合，③ PCR擴(kuò)增嵌合連接分子中的 DNA(一般為質(zhì)粒 DNA).該技術(shù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是嵌合連接分子的制備 .在免疫 PCR 中，嵌合連接分子起著橋梁作用，它有兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，一個(gè)與抗原抗體復(fù)合物中的抗體結(jié)合，一個(gè)與質(zhì)粒 DNA結(jié)合，其基本原理與 ELISA和免疫酶染色相似，不同之處在于其中的標(biāo)記物不是酶而是質(zhì)粒 DNA，在操作反應(yīng)中形成抗原抗體 連接分子 DNA 復(fù)合物，通過 PCR擴(kuò)增 DNA來判斷是否存在特異性抗原 . 免疫 PCR優(yōu)點(diǎn)為 :①特異性較強(qiáng)，因?yàn)樗⒃诳乖贵w特異性反應(yīng)的基礎(chǔ)上 .②敏感度高， PCR具有驚人的擴(kuò)增能力，免疫 PCR比 ELISA敏感度高 105倍以上，可用于單個(gè)抗原的檢測 .③操作簡便， PCR擴(kuò)增質(zhì)粒 DNA比擴(kuò)增靶基因容易得多，一般實(shí)驗(yàn)室均能進(jìn)行 .
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