高三生物多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna(20xx10)-資料下載頁(yè)
2025-07-25 15:41本頁(yè)面
【正文】 向 3’端延伸。 二、 PCR的反應(yīng)過(guò)程 每個(gè)循環(huán)包括： 變性 —— 復(fù)性 —— 延伸 從第二輪循環(huán)開始，上一次循環(huán)的產(chǎn)物也可以作為模板參與反應(yīng)，并且 由引物 Ⅰ 延伸而成的 DNA單鏈會(huì)與引物 Ⅱ結(jié)合，進(jìn)行 DNA的延伸， 這樣， DNA聚合酶只能特異性地復(fù)制 處于兩個(gè)引物之間的 DNA序列 ，使這段固定長(zhǎng)度的序列 呈指數(shù)擴(kuò)增 。 三、實(shí)驗(yàn)步驟： 準(zhǔn)備 好 PCR反應(yīng)體系的配方 用微量 移液 器按配方在往微量離心管中加入各組分 蓋嚴(yán)蓋子，用手指輕輕彈擊管壁 混合 反應(yīng)液 離心 10分鐘 將離心管放入 PCR儀上，設(shè)置好循環(huán)程序進(jìn)行 反應(yīng) 注意事項(xiàng)：詳見操作提示 四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià) DNA 含量的測(cè)定：稀釋 → 對(duì)照調(diào)零 → 測(cè)定 → 計(jì)算（公式見 P63） 波長(zhǎng)260nm處讀數(shù) 蒸餾水做對(duì)照 50倍 PCR技術(shù)與體內(nèi) DNA復(fù)制的區(qū)別： 1. PCR不需要解旋酶；體內(nèi) DNA復(fù)制需要； 2. PCR需要耐熱的 DNA聚合酶（常用TaqDNA聚合酶），而生物體內(nèi)的聚合酶在高溫時(shí)會(huì)變性； 3. PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，而生物體內(nèi) DNA復(fù)制需要生物體自身的復(fù)制。 練習(xí)鞏固 關(guān)于 PCR技術(shù)的應(yīng)用，錯(cuò)誤的一項(xiàng)是 A 古生物學(xué)、刑偵破案、 DNA序列測(cè)定 B 診斷遺傳疾病、基因克隆、古生物學(xué) C DNA序列測(cè)定、基因克隆、刑偵破案 ‘ D 診斷遺傳疾病、合成核苷酸、 DNA序列測(cè)定 DNA的合成方向總是從子鏈的哪一端向哪一端延伸？ PCR技術(shù)最突出的優(yōu)點(diǎn)是 A 原理簡(jiǎn)單 B 原料易找 C TaqDNA聚合酶有耐熱性 D 快速、高效、靈活、易于操作 做 PCR使用的微量離心管、槍頭、緩沖液及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是 A 反復(fù)洗滌 B 不怕外源 DNA污染 C 高壓滅菌 D 在 — 20 ℃ 儲(chǔ)存
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